邵銀玲
摘 要 目的:探討GEB-600(高爾寶)尿液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞、白細(xì)胞酯酶(LEU)、尿葡萄糖(GLU)的效果。方法:收集臨床門診患者新鮮尿液680份,用尿液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞、LEU和GLU水平,并與鏡檢法檢測(cè)的紅細(xì)胞和白細(xì)胞、全自動(dòng)生化分析儀定量檢測(cè)的GLU水平進(jìn)行比較。結(jié)果:在檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞和LEU時(shí),聯(lián)合應(yīng)用尿液分析儀和鏡檢法可提高檢出準(zhǔn)確性。在檢測(cè)尿液中GLU時(shí),尿液分析儀與全自動(dòng)生化分析儀的符合率較高。結(jié)論:尿液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞和LEU時(shí)需與鏡檢法聯(lián)合應(yīng)用才能確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,在檢測(cè)GLU時(shí)與全自動(dòng)生化分析儀符合性較好,能滿足臨床篩查需要。
關(guān)鍵詞 尿液檢測(cè) 尿液分析儀 診斷
中圖分類號(hào):R446.12+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1006-1533(2014)22-0029-03
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)分析在疾病的診療中起著十分重要的作用,近年來(lái),尿液干化學(xué)分析已在全國(guó)各地普及,越來(lái)越受到人們的重視,該法原理是利用成品尿試紙上各種特有發(fā)色膜塊與尿液中有關(guān)的化學(xué)成分、細(xì)胞發(fā)生顏色反應(yīng),經(jīng)尿液分析儀分析比較,結(jié)果打印顯示,其特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、快速、檢測(cè)少量尿液即可一次性獲得多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),能為臨床診斷及預(yù)后提供很高的參考價(jià)值,同時(shí)減少了實(shí)驗(yàn)室的工作強(qiáng)度。檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞酯酶(LEU)、尿葡萄糖(GLU)水平,對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病和糖尿病患者的診斷和疾病控制十分重要,但由于尿液干化學(xué)分析受自身檢測(cè)原理的局限,本文評(píng)估GEB-600(高爾寶)尿液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞、LEU和GLU的效果,并與鏡檢法和全自動(dòng)生化分析儀結(jié)果比較。
材料與方法
對(duì)象與材料
收集門診及住院內(nèi)科680例患者的尿液,采用GEB-600(高爾寶)尿液分析儀檢測(cè)RBC、LEU和GLU水平,并用離心鏡檢法檢測(cè)RBC、LEU水平,用生化分析儀(HITACHI 7100)定量檢測(cè)GLU水平,比較不同方法的結(jié)果符合程度。
方法
尿液分析儀和生化分析儀每天開(kāi)機(jī)后先分別按上海市臨床檢驗(yàn)中心要求做室內(nèi)質(zhì)控。
用一次性清潔尿杯收集患者隨機(jī)尿,充分混勻后分為2管測(cè)GLU水平,1管用尿液分析儀檢測(cè),另1管用生化分析儀檢測(cè),檢測(cè)步驟均按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
用尿液分析儀檢測(cè)的尿液再經(jīng)1 500 g離心5 min,取沉渣進(jìn)行鏡檢。比較兩種方法的檢測(cè)符合率。
評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
尿液分析儀檢測(cè)結(jié)果中紅細(xì)胞、白細(xì)胞以鏡檢法為參考,正常參考值為紅細(xì)胞0~3/HP,白細(xì)胞為0~5/HP,超出正常范圍者為異常;尿葡萄糖以全自動(dòng)生化分析儀定量結(jié)果為參考標(biāo)準(zhǔn)。
統(tǒng)計(jì)方法
用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果
采用尿液分析儀檢測(cè)和顯微鏡檢出紅細(xì)胞結(jié)果見(jiàn)表1,尿液分析儀檢測(cè)LEU和顯微鏡檢查白細(xì)胞符合率見(jiàn)表2。
采用尿液分析儀和生化分析儀檢測(cè)尿GLU水平比較見(jiàn)表3。
討論
儀器檢測(cè)與傳統(tǒng)鏡檢紅細(xì)胞
從表1可見(jiàn),尿分析儀與鏡檢法檢測(cè)結(jié)果差異顯著(P<0.05),造成這一差異主要原因是兩者的檢測(cè)原理不同。尿液分析儀是利用尿液中紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白或破壞釋放的血紅蛋白中含有的亞鐵血紅素具有的過(guò)氧化物酶活性,在有氧條件下,使過(guò)氧氫茴香素或過(guò)氧化氫烯鈷釋放出新生態(tài)氧,后者可將試帶中的聯(lián)苯胺氧化成聯(lián)苯胺藍(lán)而顯藍(lán)色,因此該法既可對(duì)完整紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng),也可檢測(cè)游離血紅蛋白,而鏡檢法是傳統(tǒng)的常規(guī)檢驗(yàn)方法,能直接觀察紅細(xì)胞的形態(tài)。
本研究中,尿液分析儀檢出紅細(xì)胞異常者較多,鏡檢紅細(xì)胞數(shù)卻并不多,主要是泌尿系統(tǒng)感染時(shí),尿中大多革蘭陰性菌和某些革蘭陽(yáng)性菌能合成觸酶,過(guò)氧化物酶和超氧化物歧化酶能使試紙條呈色反應(yīng),因此假陽(yáng)性率極高,常導(dǎo)致臨床誤診。還有一部分原因是由于尿比重低,尿pH過(guò)高或盛尿容器被污染等原因也可導(dǎo)致紅細(xì)胞在體內(nèi)或體外受到破壞,以致鏡檢找不到紅細(xì)胞,腎病患者終尿中的紅細(xì)胞可因各種因素變形裂解使血紅蛋白逸出,尿中某些氧化性污染物以及大劑量抗壞血酸存在均可出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。此外,尿中含有易熱酶、肌紅蛋白也可引起假陽(yáng)性。
還有少部分病例鏡檢法檢測(cè)到紅細(xì)胞而尿液分析儀檢測(cè)結(jié)果卻是正常,這是由于用尿液分析儀測(cè)定隱血時(shí),維生素C會(huì)干擾試驗(yàn)結(jié)果,引起假陰性,當(dāng)維生素C濃度≥5.6 mmol/L時(shí),紅細(xì)胞檢出假陰性率為100%[1]。用尿液分析儀時(shí),高相對(duì)體積質(zhì)量和高蛋白在檢測(cè)中會(huì)降低紅細(xì)胞測(cè)定的靈敏度,服用還原型谷胱甘肽、硫代硫酸鈉、安乃近、甲硫丙脯酸均可致假陰性。
尿液分析儀是根據(jù)干化學(xué)試帶法原理檢測(cè)尿中紅細(xì)胞,能對(duì)大量標(biāo)本進(jìn)行簡(jiǎn)便快速處理,但會(huì)出現(xiàn)與鏡檢結(jié)果存在差異的現(xiàn)象,顯微鏡法檢測(cè)尿中紅細(xì)胞能直接觀察紅細(xì)胞的形態(tài),有利于臨床治療觀察及病情變化監(jiān)測(cè),但是大量標(biāo)本檢驗(yàn)時(shí)不利于快速、簡(jiǎn)便出報(bào)告。從上述結(jié)果可見(jiàn),兩種方法所測(cè)結(jié)果存在差異,尿液分析儀測(cè)定尿液存在許多影響因素,應(yīng)嚴(yán)格操作規(guī)程,加強(qiáng)尿液沉渣顯微鏡檢查[2]。因此,尿液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞時(shí)需結(jié)合人工顯微鏡檢查,兩種方法相互補(bǔ)充,可得到更為可靠的結(jié)果。此時(shí)除了排除干擾因素外,還需結(jié)合臨床進(jìn)行綜合分析。
白細(xì)胞或LEU測(cè)定
從表2可見(jiàn),尿液分析儀檢測(cè)結(jié)果與鏡檢法之間也存在顯著差異(P<0.05)。尿液分析儀檢測(cè)白細(xì)胞的原理是基于粒細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有酯酶,可作用于試帶模塊中的吲哚酚酯,從而釋放出吲哚酚,后者與重氮鹽反應(yīng)生成紫色縮合物,當(dāng)尿中出現(xiàn)不含顆粒的淋巴或單核細(xì)胞時(shí),試紙則檢測(cè)不出白細(xì)胞,只能靠鏡檢。
當(dāng)尿中淋巴、單核細(xì)胞增多(如腎移植患者發(fā)生移植反應(yīng))時(shí)會(huì)使試紙條呈假陰性。另有報(bào)道,尿中有大量先鋒Ⅳ、慶大霉素或高糖、高比重、高蛋白尿和服用較多四環(huán)素,也可降低干化學(xué)法檢查白細(xì)胞的陽(yáng)性程度,出現(xiàn)假陰性,這可能與蛋白質(zhì)與染料結(jié)合過(guò)程中的某種中間產(chǎn)物或氧化酶氧化GLU產(chǎn)生過(guò)氧化氫抑制白細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的酯酶活性及GLU氧化反應(yīng)有關(guān)。另外,尿液分析試紙的保存中,如將干燥的紙片暴露在空氣中3 h對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)影響,但將紙片用蒸餾水濕潤(rùn)后,置空氣中3-5 min就會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。因此,必須按要求保存試紙,除非立即使用,否則不得將紙片從瓶中取出[3]。還有部分病例尿液分析儀檢測(cè)陽(yáng)性而鏡檢卻找不到白細(xì)胞,常見(jiàn)原因是女性陰道分泌物上皮細(xì)胞受污染,其有類似粒細(xì)胞的功能,與試紙上的白細(xì)胞模塊發(fā)生反應(yīng)。尿液分析儀檢測(cè)時(shí),若尿液受甲醛、大量膽紅素、氧化型清潔劑等污染也可產(chǎn)生假陽(yáng)性,另外,某些藥物(如呋喃坦啶)及高濃度膽紅素都可導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。鏡檢法檢測(cè)白細(xì)胞是將尿液離心沉淀后直接計(jì)數(shù)白細(xì)胞,因此鏡檢法檢測(cè)白細(xì)胞數(shù)明顯高于尿液分析儀法。
由上可見(jiàn),尿液分析儀存在假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)規(guī)定的手工法是有效的復(fù)核方法,在檢測(cè)尿液中LEU時(shí)即使尿液分析法檢測(cè)陰性也應(yīng)用鏡檢法檢測(cè)尿沉渣,給臨床提供更準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。
GLU測(cè)定
從表3可見(jiàn),尿液分析儀與定量法檢測(cè)尿GLU正常或異常的符合度較好,差異不顯著(P>0.05)。尿液分析儀所采用的GLU氧化酶法操作簡(jiǎn)單、快速,用于糖尿病患者的尿糖篩查,完全能滿足臨床需要。
干化學(xué)法檢測(cè)尿中GLU是采用GLU氧化酶法,即GOD-POD法,GLU先在GLU氧化酶作用下形成葡萄糖醛酸和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶作用下釋放氧分子,氧分子再還原碘化鉀,其顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)至綠或黃色至棕色。該法對(duì)GLU檢測(cè)有特異性,不與乳糖、半乳糖(酶)、果糖等還原糖反應(yīng),也不與萘啶酸、水楊酸等還原藥物反應(yīng)。但由于尿液分析儀檢測(cè)試帶為含酶制品,一些理化因素(高溫、低溫、PH等)均可使酶失去活性而呈假陰性;當(dāng)尿中維生素C濃度達(dá)500~1 000 mg/L、而尿糖含量<14 mmol/L時(shí)或服用龍膽酸、尿黑酸、酚磺二胺及安乃近等藥物時(shí),試紙條會(huì)因抑制反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,隨著維生素C濃度逐漸增加,尿GLU含量呈逐漸下降趨勢(shì),維生素C起著負(fù)干擾作用[4];高pH同時(shí)高比重(1.020以上)的尿液可降低試紙條對(duì)GLU的靈敏度出現(xiàn)假陰性結(jié)果;酮體也能降低試紙靈敏度 ,可使含低濃度GLU的尿液出現(xiàn)假陰性結(jié)果;當(dāng)試紙條在空氣中暴露時(shí)間太久或存放尿液的容器中殘留如過(guò)氧化氫、漂白粉等具有氧化性的消毒劑或低比密尿時(shí)可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。所以,出現(xiàn)兩種檢測(cè)方法結(jié)果不符合的情況是因?yàn)樯治鰞x直接檢測(cè)尿中GLU含量,特異性比尿液分析儀更高,但其操作較復(fù)雜,且檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、成本高。由此可見(jiàn),尿液分析儀檢測(cè)GLU氧化酶操作簡(jiǎn)單、快速,作為糖尿病患者的尿GLU篩查,完全能滿足臨床需要。
綜上所述,尿液分析儀雖檢測(cè)速度較快,但測(cè)定中存在許多影響因素,受到試劑、方法及靈敏度等多方面影響,因該法不能替代病理性尿液標(biāo)本的顯微鏡檢查[5],兩者應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用才具有較高準(zhǔn)確性和特異性。尿液分析儀與生化儀定量法在檢測(cè)GLU中符合性較高,但也會(huì)因諸多因素存在而產(chǎn)生假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果。因此,檢驗(yàn)人員要有高度負(fù)責(zé)的態(tài)度,積累實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,認(rèn)真對(duì)待每份標(biāo)本,從各個(gè)環(huán)節(jié)注意質(zhì)量控制,盡可能避免各種原因造成的漏診和誤診。
參考文獻(xiàn)
戴海玲, 蘇嶼. 尿中維生素C對(duì)干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果的影響[J]. 海南醫(yī)學(xué), 2010, 21(20): 121-122.
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劉闊葉, 朱愛(ài)民, 陳文東. 干化學(xué)法與顯微鏡法檢查尿液白細(xì)胞的結(jié)果分析[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南, 2007, 5(11): 274-275.
(收稿日期:2014-07-30)
由上可見(jiàn),尿液分析儀存在假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)規(guī)定的手工法是有效的復(fù)核方法,在檢測(cè)尿液中LEU時(shí)即使尿液分析法檢測(cè)陰性也應(yīng)用鏡檢法檢測(cè)尿沉渣,給臨床提供更準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。
GLU測(cè)定
從表3可見(jiàn),尿液分析儀與定量法檢測(cè)尿GLU正?;虍惓5姆隙容^好,差異不顯著(P>0.05)。尿液分析儀所采用的GLU氧化酶法操作簡(jiǎn)單、快速,用于糖尿病患者的尿糖篩查,完全能滿足臨床需要。
干化學(xué)法檢測(cè)尿中GLU是采用GLU氧化酶法,即GOD-POD法,GLU先在GLU氧化酶作用下形成葡萄糖醛酸和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶作用下釋放氧分子,氧分子再還原碘化鉀,其顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)至綠或黃色至棕色。該法對(duì)GLU檢測(cè)有特異性,不與乳糖、半乳糖(酶)、果糖等還原糖反應(yīng),也不與萘啶酸、水楊酸等還原藥物反應(yīng)。但由于尿液分析儀檢測(cè)試帶為含酶制品,一些理化因素(高溫、低溫、PH等)均可使酶失去活性而呈假陰性;當(dāng)尿中維生素C濃度達(dá)500~1 000 mg/L、而尿糖含量<14 mmol/L時(shí)或服用龍膽酸、尿黑酸、酚磺二胺及安乃近等藥物時(shí),試紙條會(huì)因抑制反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,隨著維生素C濃度逐漸增加,尿GLU含量呈逐漸下降趨勢(shì),維生素C起著負(fù)干擾作用[4];高pH同時(shí)高比重(1.020以上)的尿液可降低試紙條對(duì)GLU的靈敏度出現(xiàn)假陰性結(jié)果;酮體也能降低試紙靈敏度 ,可使含低濃度GLU的尿液出現(xiàn)假陰性結(jié)果;當(dāng)試紙條在空氣中暴露時(shí)間太久或存放尿液的容器中殘留如過(guò)氧化氫、漂白粉等具有氧化性的消毒劑或低比密尿時(shí)可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。所以,出現(xiàn)兩種檢測(cè)方法結(jié)果不符合的情況是因?yàn)樯治鰞x直接檢測(cè)尿中GLU含量,特異性比尿液分析儀更高,但其操作較復(fù)雜,且檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、成本高。由此可見(jiàn),尿液分析儀檢測(cè)GLU氧化酶操作簡(jiǎn)單、快速,作為糖尿病患者的尿GLU篩查,完全能滿足臨床需要。
綜上所述,尿液分析儀雖檢測(cè)速度較快,但測(cè)定中存在許多影響因素,受到試劑、方法及靈敏度等多方面影響,因該法不能替代病理性尿液標(biāo)本的顯微鏡檢查[5],兩者應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用才具有較高準(zhǔn)確性和特異性。尿液分析儀與生化儀定量法在檢測(cè)GLU中符合性較高,但也會(huì)因諸多因素存在而產(chǎn)生假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果。因此,檢驗(yàn)人員要有高度負(fù)責(zé)的態(tài)度,積累實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,認(rèn)真對(duì)待每份標(biāo)本,從各個(gè)環(huán)節(jié)注意質(zhì)量控制,盡可能避免各種原因造成的漏診和誤診。
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陳春華. 尿液分析儀檢測(cè)尿中白細(xì)胞影響因素的探討[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床, 2009, 6(22): 1952-1953.
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(收稿日期:2014-07-30)
由上可見(jiàn),尿液分析儀存在假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)規(guī)定的手工法是有效的復(fù)核方法,在檢測(cè)尿液中LEU時(shí)即使尿液分析法檢測(cè)陰性也應(yīng)用鏡檢法檢測(cè)尿沉渣,給臨床提供更準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。
GLU測(cè)定
從表3可見(jiàn),尿液分析儀與定量法檢測(cè)尿GLU正?;虍惓5姆隙容^好,差異不顯著(P>0.05)。尿液分析儀所采用的GLU氧化酶法操作簡(jiǎn)單、快速,用于糖尿病患者的尿糖篩查,完全能滿足臨床需要。
干化學(xué)法檢測(cè)尿中GLU是采用GLU氧化酶法,即GOD-POD法,GLU先在GLU氧化酶作用下形成葡萄糖醛酸和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶作用下釋放氧分子,氧分子再還原碘化鉀,其顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)至綠或黃色至棕色。該法對(duì)GLU檢測(cè)有特異性,不與乳糖、半乳糖(酶)、果糖等還原糖反應(yīng),也不與萘啶酸、水楊酸等還原藥物反應(yīng)。但由于尿液分析儀檢測(cè)試帶為含酶制品,一些理化因素(高溫、低溫、PH等)均可使酶失去活性而呈假陰性;當(dāng)尿中維生素C濃度達(dá)500~1 000 mg/L、而尿糖含量<14 mmol/L時(shí)或服用龍膽酸、尿黑酸、酚磺二胺及安乃近等藥物時(shí),試紙條會(huì)因抑制反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,隨著維生素C濃度逐漸增加,尿GLU含量呈逐漸下降趨勢(shì),維生素C起著負(fù)干擾作用[4];高pH同時(shí)高比重(1.020以上)的尿液可降低試紙條對(duì)GLU的靈敏度出現(xiàn)假陰性結(jié)果;酮體也能降低試紙靈敏度 ,可使含低濃度GLU的尿液出現(xiàn)假陰性結(jié)果;當(dāng)試紙條在空氣中暴露時(shí)間太久或存放尿液的容器中殘留如過(guò)氧化氫、漂白粉等具有氧化性的消毒劑或低比密尿時(shí)可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。所以,出現(xiàn)兩種檢測(cè)方法結(jié)果不符合的情況是因?yàn)樯治鰞x直接檢測(cè)尿中GLU含量,特異性比尿液分析儀更高,但其操作較復(fù)雜,且檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、成本高。由此可見(jiàn),尿液分析儀檢測(cè)GLU氧化酶操作簡(jiǎn)單、快速,作為糖尿病患者的尿GLU篩查,完全能滿足臨床需要。
綜上所述,尿液分析儀雖檢測(cè)速度較快,但測(cè)定中存在許多影響因素,受到試劑、方法及靈敏度等多方面影響,因該法不能替代病理性尿液標(biāo)本的顯微鏡檢查[5],兩者應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用才具有較高準(zhǔn)確性和特異性。尿液分析儀與生化儀定量法在檢測(cè)GLU中符合性較高,但也會(huì)因諸多因素存在而產(chǎn)生假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果。因此,檢驗(yàn)人員要有高度負(fù)責(zé)的態(tài)度,積累實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,認(rèn)真對(duì)待每份標(biāo)本,從各個(gè)環(huán)節(jié)注意質(zhì)量控制,盡可能避免各種原因造成的漏診和誤診。
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(收稿日期:2014-07-30)