劉華 黃杰 郭家龍 羅湘玉 劉斌 羅玲 張軍

影響CXCL12/CXCR4在NSCLC中表達(dá)的相關(guān)性研究

劉華 黃杰 郭家龍 羅湘玉 劉斌 羅玲 張軍

目的 檢測CXCL12、CXCR4在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)組織及癌旁正常肺組織中的表達(dá)情況, 分析其陽性表達(dá)的意義及其陽性表達(dá)與NSCLC相關(guān)參數(shù)的聯(lián)系。方法 采用免疫組織化學(xué)染色方法對(duì)臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標(biāo)本62例進(jìn)行檢測。結(jié)果 NSCLC細(xì)胞CXCL12、CXCR4與NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與NSCLC的TNM分期、縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中表達(dá)能夠促進(jìn)NSCLC癌組織的浸潤、發(fā)展及轉(zhuǎn)移, 并且與縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)；其表達(dá)是專一性的,具有靶向性。

CXCL12；CXCR4；非小細(xì)胞肺癌；免疫組織化學(xué)

趨化因子(chemokines)是被最早發(fā)現(xiàn)與免疫細(xì)胞具有控制細(xì)胞向炎癥定向遷移的一類細(xì)胞因子, 在調(diào)控免疫細(xì)胞分化、發(fā)育及定向遷移過程中起重要作用?？蒲凶C明CCL2、CCL3、CCL4、CXCL13等19種趨化因子在癌組織中有表達(dá)［1］。其中, CCL5激活CCR1、CCR3、CCR5, 并在患者的腫瘤細(xì)胞中表達(dá), 且在Ⅰ期肺腺癌中與患者生存率有關(guān)；抗CXCR1抗體使細(xì)胞增殖明顯降低, 但抗CXCR2抗體卻沒有此效應(yīng),在CXCL8促肺癌有絲分裂功能主要是由CXCR1受體介導(dǎo)的。

CXCL12和CXCR4結(jié)合后可能參與非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)。趨化因子CXCL12與其特異性受體CXCR4相互作用而構(gòu)成的一個(gè)與細(xì)胞間信息傳遞、細(xì)胞遷移有密切關(guān)系的偶聯(lián)分子對(duì)［2］。其實(shí)質(zhì)在于CXCR4對(duì)其配體CXCL12的高度親和力和絕對(duì)特異性, 即CXCR4作CXCL12的專屬受體而存在。

1 材料與方法

1.1 材料 收集本院胸心外科2011年9月～2013年2月臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標(biāo)本70例, 最終病理確診及納入本實(shí)驗(yàn)標(biāo)本62例。標(biāo)本均行S-P法免疫組織化學(xué)染色。每張切片在顯微鏡下觀察10個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)(×400), 陽性細(xì)胞數(shù)≥10%為陽性(+), 陽性數(shù)＜10%為陰性(-)。陽性為細(xì)胞染色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網(wǎng)狀。

1.2 采用免疫組織化學(xué)染色方法對(duì)臨床確診的NSCLC癌組織、離其最短徑5 cm以上正常肺組織標(biāo)本62例進(jìn)行檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CXCL12主要在NSCLC細(xì)胞胞漿中表達(dá), 檢測到胞漿中色呈不均勻棕黃色顆粒狀、棕褐色塊狀、網(wǎng)狀染色,而NSCLC癌旁正常肺組織中信號(hào)相對(duì)很弱。NSCLC細(xì)胞CXCL12的陽性表達(dá)率73.8%, NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達(dá)率15.0%, 兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.135, P=0.027)。而CXCR4主要在NSCLC癌細(xì)胞中表達(dá), 其余指標(biāo)相同。NSCLC細(xì)胞CXCR4的陽性表達(dá)33例, NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達(dá)2例, 兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.742, P=0.035)。CXCL12、CXCR4的表達(dá)與NSCLC的 TNM分期、縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有顯著相關(guān)性, 與性別、發(fā)病年齡、吸煙史、家族史、文化程度、組織學(xué)病理類型等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩者表達(dá)陽性率隨TNM分期的升高而升高,Ⅲa～Ⅲb期表達(dá)率(90.9%)明顯高于Ⅱa～Ⅱb期(55.5%), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；CXCL12、CXCR4的陽性表達(dá)率在縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性表達(dá)率(94.7%)顯著高于縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性表達(dá)率(56.5%), 表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

3.1 CXCL12陽性表達(dá)分析 CXCL12是CXC族趨化因子中的成員, 其特點(diǎn)是分子內(nèi)無谷-亮-精氨酸(ELR)基序。由組成骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌并發(fā)揮對(duì)造血細(xì)胞的歸巢到骨髓的關(guān)鍵作用。CXCL12對(duì)T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等均有趨化作用。NSCLC細(xì)胞CXCL12的陽性表達(dá)率73.8%, NSCLC癌旁正常肺組織陽性表達(dá)率15.0%, 兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.135, P=0.027)。這說明NSCLC癌巢中有CXCL12表達(dá)。

3.2 CXCR4陽性表達(dá)分析 趨化因子受體CXCR4屬于G蛋白耦聯(lián)7次跨膜受體, 廣泛表達(dá)在許多細(xì)胞表面。同CXCR1、CXCR2、CXCR3一樣, 在腫瘤組織中他們的表達(dá)直接或間接反應(yīng)了腫瘤的生物學(xué)特性。但CXCR4的陽性表達(dá)是促癌還是抑癌效應(yīng), 則成為下一步將要進(jìn)行的分析。

3.3 CXCL12 與CXCR4的陽性表達(dá)與NSCLC臨床參數(shù)的分析 CXCL12、CXCR4在NSCLC組織中均一致性表達(dá)。縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與CXCL12、CXCR4陽性表達(dá)有關(guān), 但CXCL12、CXCR4陽性表達(dá)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機(jī)制所起的作用并不清楚。也就是說, 縱隔淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移也有其他機(jī)制參與其中。CXCL12、CXCR4的陽性表達(dá)是專一性的, 是一對(duì)一的關(guān)系,這使CXCL12與CXCR4結(jié)合后讓研究者專注于他們的通道研究, 這更具有靶向性。

［1］ 耿華, 徐美林.趨化因子CXCL12/CXCR4在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá).天津醫(yī)藥, 2012(3):74-76.

［2］ 周雯慧, 劉越.趨化因子受體CXCR7在人肺癌組織和肺癌細(xì)胞系的表達(dá).中華臨床醫(yī)師雜志, 2013(17):45-50.

Relevant research of influence on expression of CXCL12/CXCR4 in NSCLC

LIU Hua, HUANG Jie, GUO Jia-long, et al.Department of Chest Heart Great Vessels Surgery, Hubei Shiyan City Taihe Hospital, Shiyan 442000, China

Objective To detect the expression of CXCL12 and CXCR4 in non small cell lung cancer (NSCLC) and adjacent normal tissue, and to analyze the significance of their positive expression, and the correlation between positive expression and related NSCLC parameters.Methods Immunohistochemical staining method was applied to detect 62 cases of clinically diagnosed NSCLC and the normal lung tissue samples above 5 cm of the shortest path.Results There were statistically significant difference between the positive expression of CXCL12, CXCR4 in NSCLC and NSCLC adjacent normal tissue (P＜0.05).The positive expression of CXCL12,CXCR4 in NSCLC also had statistically significant difference with TNM period of NSCLC and mediastinal lymph node metastasis (P＜0.05).Conclusion The expression of CXCL12 and CXCR4 in NSCLC tissue can promote the infiltration, development and metastasis of NSCLC cancer tissue, and it is correlated with mediastinal lymph node metastasis.The expression has specificity and targeting feature.

CXCL12; CXCR4; Non small cell lung cancer; Immunohistochemistry

2014-08-26］

442000 湖北省十堰市太和醫(yī)院胸心大血管外科

張軍