邵望舒 姜雅秋 張 華 (吉林大學(xué)白求恩第一臨床醫(yī)院心內(nèi)科，吉林 長春 3002)

高同型半胱氨酸(Hhcy)血癥是近年來確認(rèn)的心肌梗死(MI)獨(dú)立的危險(xiǎn)因素〔1〕，不亞于高血壓、糖尿病、高脂血癥等因素的影響。再灌注治療是急性MI(AMI)最重要的治療方法。但治療過程中有高達(dá)5%～25%的患者會發(fā)生無復(fù)流現(xiàn)象(NRP)〔2〕，嚴(yán)重影響了AMI患者的預(yù)后。AMI再灌注后NRP的發(fā)生由多種因素所致，主要與氧化應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)和微血管結(jié)構(gòu)、功能的異常相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過建立Hhcy血癥AMI再灌注模型，檢測大鼠血漿Hcy、丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT)、可溶性細(xì)胞間黏附因子(sICAM-1)、人蛋白S(P-S)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌鈣蛋白(Tn-I)的水平，觀察MI再灌注后NRP的范圍，旨在觀察Hhcy對大鼠AMI再灌注后NRP的影響，評價(jià)辛伐他汀對Hhcy大鼠AMI再灌注后NRP的作用，并探討其發(fā)生機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 SD大鼠，體重130～160 g，沈陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供〔SCXK(遼)2010-0001，遼寧省科學(xué)技術(shù)廳簽發(fā)〕，飼料為繁育鼠全價(jià)固體顆粒飼料，沈陽市于洪區(qū)前民動物飼料廠提供。L-半胱氨酸、伊文氏藍(lán)，Sigma公司產(chǎn)品。辛伐他汀(片劑)，天津施維雅制藥有限公司。Hcy、MDA、CAT、sICAM-1、P-S、SOD、TN-I檢測試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 SD大鼠隨機(jī)分為四組，雌性各半。正?？瞻捉M(10只)、正常對照組(12只):腹腔注射生理鹽水5 ml·kg-1·d-1，灌胃給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1;Hhcy模型組(12只):腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1;辛伐他汀組(12只):腹腔注射2%L-半胱氨酸 5 ml·kg-1·d-1，灌胃給予辛伐他汀 3.5 ml·kg-1·d-1。所有大鼠均飼以常規(guī)動物飼料和水。連續(xù)給藥12 w后3%戊巴比妥鈉腹腔注射45 mg/kg麻醉，結(jié)扎冠狀動脈左室支90 min，再灌注90 min。以ST段明顯抬高為結(jié)扎成功的標(biāo)志。正?？瞻捉M只穿線不接扎。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)選2只大鼠，進(jìn)行伊文氏藍(lán)心肌染色，并計(jì)算NRP范圍。余大鼠取血檢測血漿Hcy、MDA、CAT、sICAM-1、P-S、SOD、TN-I的水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，所得數(shù)據(jù)用s表示，兩組間數(shù)據(jù)對比采用配對t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 AMI再灌注后心肌NRP范圍 采用Image-Pro Plus彩色圖像處理系統(tǒng)測量左心室室壁心肌面積及無復(fù)流區(qū)域的面積。正常對照組2只大鼠NRP區(qū)域與左心室面積比例分別為14.17%、16.30%;Hhcy模型組分別為30.47%、29.03%;辛伐他汀組分別為13.77%、14.58%。

2.2 血漿TN-I的比較 正常對照組大鼠血漿TN-I水平顯著高于正常空白組;Hhcy組明顯高于正常對照組。辛伐他汀組大鼠血漿Hcy水平與Hhcy組比較無明顯變化，但可使大鼠血漿TN-I含量顯著降低。見表1。

表1 辛伐他汀對Hhcy大鼠各組血漿中Hcy、TN-I含量的影響(s，n=10)

表1 辛伐他汀對Hhcy大鼠各組血漿中Hcy、TN-I含量的影響(s，n=10)

與正?？瞻捉M比較:1)P＜0.001;與Hhcy模型組比較:2)P＞0.05

組別 Hcy(μmol/L)TN-I(pg/ml)正?？瞻捉M 5.26±0.61 102.8±28.2正常對照組 4.93±0.51 191.1±12.41)Hhcy模型組 19.88±5.031) 220.4±18.41)辛伐他汀組 19.45±5.171)2) 148.8±31.62)

2.3 血漿SOD、CAT、MDA的比較 與正?？瞻捉M比較，正常對照組大鼠血漿 SOD、CAT活性顯著降低，MDA水平顯著升高。與正常對照組比較，Hhcy組大鼠MDA水平明顯升高，SOD、CAT活性明顯降低。辛伐他汀組可使Hhcy大鼠血漿MDA含量降低，SOD、CAT活性升高。見表2。

表2 辛伐他汀對Hhcy大鼠各組血漿中SOD、CAT、MDA含量的影響(s，n=10)

表2 辛伐他汀對Hhcy大鼠各組血漿中SOD、CAT、MDA含量的影響(s，n=10)

與正?？瞻捉M比較:1)P＜0.001;與正常對照組比較:2)P＜0.001;與Hhcy模型組比較:3)P＜0.001;下表同

組別 SOD(U/ml)CAT(U/ml)MDA(nmol/ml)正?？瞻捉M 132.8±14.8 22.36±1.74 4.99±1.01正常對照組 101.2±15.11) 10.37±1.311) 8.50±1.591)Hhcy模型組 65.5±8.72) 5.70±1.712) 12.60±2.122)辛伐他汀組 100.6±14.03) 17.81±1.633) 8.34±1.633)

2.4 血漿sICAM-1、P-S的比較 與正?？瞻捉M比較，正常對照組大鼠血漿 sICAM-1、P-S含量顯著升高。與正常對照組比較，Hhcy組大鼠sICAM-1、P-S含量顯著升高。辛伐他汀組可使Hhcy大鼠血漿sICAM-1、P-S含量降低。見表3。

表3 辛伐他汀對Hhcy大鼠各組血漿中sICAM-1、P-S含量的影響(s，n=10)

表3 辛伐他汀對Hhcy大鼠各組血漿中sICAM-1、P-S含量的影響(s，n=10)

組別 sICAM-1(ng/L)P-S(ng/L)正常空白組 1.28±0.10 9.66±0.87正常對照組 1.89±0.081) 12.09±0.801)Hhcy模型組 1.98±0.142) 16.11±2.832)辛伐他汀組 1.61±0.173) 12.41±1.013)

3 討論

在AMI再灌注模型中，通過伊文氏藍(lán)染色心肌，再灌注區(qū)域呈藍(lán)色，NRP區(qū)域不著色。本實(shí)驗(yàn)顯示TN-I與心肌梗死的范圍呈正相關(guān)〔3，4〕。

SOD、CAT是機(jī)體抗氧化酶體系的重要成員之一，可有效清除超氧陰離子自由基，防止脂質(zhì)過氧化，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。MDA是機(jī)體氧自由基引發(fā)脂質(zhì)過氧化的反應(yīng)產(chǎn)物，可反映機(jī)體氧自由基的水平，從而間接反映出細(xì)胞損傷的程度。sICAM-1、P-S為細(xì)胞黏附因子家族的成員之一，正常情況下表達(dá)很微弱，缺血再灌時(shí)大量表達(dá)，介導(dǎo)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，增加NRP的發(fā)生。

辛伐他汀是常見的調(diào)脂藥物，大量研究表明，其除具有調(diào)脂作用外，還具有抗氧自由基作用〔5〕，可抑制炎癥反應(yīng)〔6〕，并可抑制缺氧復(fù)氧心肌細(xì)胞凋亡〔7〕?？山档托难苁录l(fā)生率，減少缺血再灌注MI面積，對心臟有保護(hù)作用。

目前對辛伐他汀在心血管疾病尤其在心肌缺血再灌注損傷中的作用及機(jī)制的研究很少。本實(shí)驗(yàn)研究表明辛伐他汀雖不能降低血漿Hcy濃度，但可明顯降低MI再灌注后NRP的范圍，降低血漿 TN-I、MDA、sICAM-1、P-S 水平，提高 SOD、CAT 活性，對Hcy及缺血再灌注引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)有明顯的抑制作用，同時(shí)可降低炎癥反應(yīng)，從而有效防止NRP的發(fā)生，起到再灌注時(shí)期心肌保護(hù)的作用，降低氧化應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)可能是其機(jī)制之一。

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