亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        CXCL13及其受體CXCR5與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移及KRAS基因突變關(guān)系的探討

        2014-12-02 04:34:02劉彥魁游慶軍金琳芳馮靜潔齊曉薇
        山東醫(yī)藥 2014年34期
        關(guān)鍵詞:趨化因子基因突變直腸癌

        劉彥魁,游慶軍,金琳芳,馮靜潔,齊曉薇

        (無錫市第四人民醫(yī)院,江蘇無錫214062)

        淋巴轉(zhuǎn)移是結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的主要方式。瘤細胞浸入淋巴管后,隨淋巴流首先到達局部引流淋巴結(jié),之后聚集于邊緣竇,繼續(xù)增殖累及整個淋巴結(jié)。結(jié)直腸癌伴淋巴轉(zhuǎn)移者預(yù)后明顯不良,且對放化療敏感性低[1~3]。CXCL13是趨化因子 CXC 家族的一員,主要分布在人體肝臟、淋巴結(jié)和血清中,其編碼基因定位于 4q21[4,5]。CXCL13 能夠吸附 B 細胞,并參與免疫系統(tǒng)信號的傳遞。CXCL13與其受體CXCR5共同作用發(fā)揮生物學效應(yīng),后者主要分布在成熟B細胞上,參與免疫功能微環(huán)境的構(gòu)建,具有協(xié)調(diào)體液免疫的功能。最近研究表明,CXCL13及其受體CXCR5的表達與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有緊密的關(guān)系[6,7]。KRAS基因是結(jié)直腸癌的重要相關(guān)基因,已有分子靶向藥物絡(luò)氨酸激酶抑制劑用于臨床。結(jié)直腸癌組織中CXCL13表達是否與KRAS基因有關(guān)尚不清楚。2013年1~11月,我們觀察了CXCL13及其受體CXCR5對結(jié)直腸癌淋巴轉(zhuǎn)移的影響,并探討其與KRAS基因突變的關(guān)系。現(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 97例結(jié)直腸癌原發(fā)灶標本(觀察A組)和51例轉(zhuǎn)移灶標本(觀察B組)為2007~2009年間無錫市第四人民醫(yī)院手術(shù)切除標本,經(jīng)病理檢查確診;52例正常結(jié)直腸標本(對照A組)和43例正常淋巴結(jié)標本(對照B組)為2011~2012年該院手術(shù)切除標本,經(jīng)病理診斷為癌癥陰性者。觀察組結(jié)直腸癌患者中男63例,女85例;對照組男45例,女50例。兩組入選標本所涉及患者年齡36~77歲,中位年齡49歲。本研究涉及患者標本采集前均簽署知情同意書,手術(shù)前均未接受放化療及其他特殊藥物治療。觀察組結(jié)腸癌84例,直腸癌64例;管狀腺癌58例,乳頭狀腺癌52例,黏液癌31例,未分化癌7例。隨訪?個月,失訪11例,死亡41例,意外死亡4例。

        1.2 CXCL13和CXCR5表達檢測及結(jié)果判定方法采用免疫組化法。CXCR5和CXCL13鼠抗人抗體購自美國R&D Systems公司,DAB顯色劑購自基因科技上海有限公司。標本采集后立即浸入10%中性甲醛液中固定12 h,經(jīng)病理醫(yī)生取材后、脫水、透明、包埋,4 μm切片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇除去二甲苯,高壓鍋修復(fù),3%的正常羊血清封閉特異性位點20 min,接著用一抗孵育1 h,二抗孵育30 min,最后用DAB顯色。免疫組化結(jié)果由兩名副主任以上職稱醫(yī)師判讀得出。細胞膜和(或)細胞質(zhì)出現(xiàn)棕褐色為CXCR5或CXCL13陽性。按著色強度評分:無著色得0分,弱陽性得1分,中等強度陽性得2分,強陽性得3分。按陽性細胞比例評分:無細胞著色得0分,陽性細胞比例1%~9%得0.1分,陽性細胞比例10%~49%的0.5分,陽性細胞比例大于50%得1分。最終結(jié)果H評分為著色強度評分和陽性細胞比例得分的乘積[6]。

        1.3 KRAS基因突變情況檢測方法 KRAS基因突變檢測試劑盒購自廈門艾德生物醫(yī)藥科技有限公司。首先用FFPE DNA提取試劑盒提取石蠟包埋的原發(fā)灶或者轉(zhuǎn)移灶標本的DNA,然后采用Real Time PCR法檢測人類KRAS基因的突變,包括12和13密碼子上7種熱點體細胞的突變,分別為:Gly12Asp、Gly12Ala、Gly12Val、Gly12Ser、Gly12Arg、Gly12Cys、Gly13Asp。

        1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料的集中趨勢與離散趨勢以±s表示。各臨床病理參數(shù)與CXCL13和CXCR5表達的相關(guān)性分析采用四格表χ2或R×C列表χ2分析;組間生存分析數(shù)據(jù)的比較應(yīng)用Kaplan-Meier's分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 CXCL13及CXCR5表達 CXCL13主要表達于間質(zhì)細胞,觀察A組陽性表達率為36.08%,觀察B組47.06%,對照A組0,對照 B組11.63%。CXCL13陽性表達率觀察B組>觀察A組>對照B組>對照A組,P均<0.05。CXCR5主要表達于上皮細胞,觀察 A組陽性表達率 41.24%,觀察 B組49.01%,對照A組0,對照B組9.30%。CXCR5陽性表達率觀察B組>觀察A組>對照B組>對照A組,P均<0.05。觀察組CXCL13與CXCR5表達水平有相關(guān)性(P<0.05)。

        2.2 CXCL13及CXCR5蛋白表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 觀察組CXCL13及CXCR5蛋白表達與TNM分期呈正相關(guān)(P<0.05),與分化程度呈負相關(guān)(P<0.05),與患者的性別、年齡、腫瘤大小及腫瘤組織學分類等無明顯相關(guān)(P均>0.05)。詳見表1。

        表1 觀察組CXCL13及CXCR5蛋白陽性表達與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

        2.3 CXCL13及CXCR5蛋白表達與結(jié)直腸癌預(yù)后的關(guān)系 觀察B組CXCL13表達陽性者5年無進展中位生存時間(PFS)為(9.0±2.3)個月,陰性者為(12.0±7.3)個月,P <0.05;CXCR5表達陽性者5 年P(guān)FS為(11.4 ±5.4)個月,陰性者為(25.5 ±9.3)個月,P<0.05。觀察A組CXCL13表達陽性者5年P(guān)FS為(25.0 ±11.3)個月,陰性者(37.0 ±16.5)個月,P<0.05;CXCR5表達陽性者5年P(guān)FS為(21.7±4.8)個月,陰性者為(55.0 ±17.5)個月,P <0.05。

        2.4 CXCL13及CXCR5蛋白表達與KRAS基因突變的關(guān)系 觀察A組KRAS基因突變型36例(其中CXCL13表達陽性12例、CXCR5表達陽性17例),野生型61例(其中CXCL13表達陽性23例、CXCR5表達陽性23例),CXCL13及CXCR5蛋白表達與KRAS基因是否發(fā)生突變均有相關(guān)性(P均<0.05)。觀察B組KRAS基因突變型20例(其中CXCL13表達陽性16例、CXCR5表達陽性14例),野生型31例(其中CXCL13表達陽性8例、CXCR5表達陽性11例),CXCL13及CXCR5蛋白表達與KRAS基因是否發(fā)生突變均有相關(guān)性(P均<0.05)。

        3 討論

        結(jié)直腸癌是我國常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率僅次于胃癌和食管癌,居腫瘤發(fā)病率的第5位,且近年有逐漸增加的趨勢[8,9]。結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移常作為評價預(yù)后的重要指標,轉(zhuǎn)移的程度對治療策略的選擇也有重要的意義。結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移以淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為主,結(jié)腸癌在結(jié)腸上、旁、中間和終末四組淋巴結(jié)均有轉(zhuǎn)移;直腸癌首先轉(zhuǎn)移至直腸旁淋巴結(jié),然后再擴散,浸及直腸及肛周組織[3,10]。近年發(fā)現(xiàn)一系列與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移有重要關(guān)系的小分子調(diào)節(jié)蛋白,趨化因子就是其中重要的一類。趨化因子通過與其受體相互作用發(fā)揮重要的生物學功能。

        趨化因子主要有C、CC、CXC、CX3C四個家族,其主要與機體的免疫系統(tǒng)相關(guān)。最早發(fā)現(xiàn)其與HIV病毒感染的機制有一定的關(guān)系[11,12]。近年研究發(fā)現(xiàn),其與多種腫瘤的進展有一定的關(guān)系,尤其是CXCL13及其受體蛋白CXCR5的表達。CXCL13是CXC家族的一種,研究者最先在肝臟和淋巴結(jié)中檢測到其表達。Burkle等[13]研究發(fā)現(xiàn)CXCR5在慢性淋巴細胞白血病病情的進展中發(fā)揮重要作用。CXCLl3和CXCR5的表達與HIV感染過程中B細胞機能障礙的形成有關(guān)。張巖等[14]檢測到其在胸腺瘤合并重癥肌無力的發(fā)病中發(fā)揮重要作用,CXCL13及其受體CXCR5的表達更易引起上述疾病的發(fā)生。易誠青等[15]發(fā)現(xiàn)CXCL13和CXCR5與成骨活躍程度相關(guān),并表現(xiàn)為明顯的時間與位點特征。鄒春華等[16]研究發(fā)現(xiàn)CXCR5的表達與肺癌組織學類型密切相關(guān)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)其與結(jié)直腸癌組織學類型和復(fù)發(fā)有一定關(guān)系。

        本研究結(jié)果顯示,CXCL13在結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達高于原發(fā)灶,在正常的結(jié)直腸組織中未檢測到其表達。CXCL13在轉(zhuǎn)移灶淋巴結(jié)中的表達明顯高于正常淋巴結(jié)。CXCR5的表達與CXCL13具有相似的特征。由此可以看出,CXCL13及其受體蛋白CXCR5可以作為評估結(jié)直腸癌發(fā)病及轉(zhuǎn)移的新的指標。但是關(guān)于CXCL13及CXCR5在結(jié)直腸癌發(fā)病中的具體作用機制,仍需要進一步研究。通過觀察CXCL13及CXCR5的表達與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系,我們發(fā)現(xiàn)CXCL13及CXCR5的表達與結(jié)直腸癌的TNM分期和腫瘤的分化程度具有相關(guān)性。腫瘤的TNM分期越高,越容易檢測到CXCR5的表達;腫瘤的分化程度越低,越易檢測到CXCL13及CXCR5的表達。后者與曹寶森等[4]研究發(fā)現(xiàn)的CXCL13及CXCR5在非小細胞肺癌中的表達特點具有一定的相似性。

        結(jié)合隨訪資料分析發(fā)現(xiàn),無論是否有淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移,在有CXCL13及其受體蛋白CXCR5表達組中,其無進展生存期均短于CXCL13及CXCR5無表達者。可以看出,CXCL13及其受體蛋白CXCR5的表達,是結(jié)直腸癌不良預(yù)后的一個標志。這與Razis等[17]研究發(fā)現(xiàn) CXCL13及 CXCR5的表達對 Her2陰性乳腺癌患者預(yù)后的影響是一致的,然而對于Her2陽性的乳腺癌患者,CXCL13及CXCR5的表達卻是一個有利的預(yù)后因子。CXCL13及CXCR5如何與Her2基因發(fā)生相互作用以及其具體作用的機制,有待進一步研究。

        KRAS基因是RAS基因家族的一種,定位于第12號染色上。在RAS基因家族中,KRAS對人類癌癥影響最大,它能控制調(diào)控細胞生長的信號通路;其發(fā)生異常時,則導(dǎo)致細胞持續(xù)生長,并阻止細胞自我毀滅。它參與細胞內(nèi)的信號傳遞,若KRAS基因發(fā)生突變,該基因永久活化,不能產(chǎn)生正常的RAS蛋白,使細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)紊亂,細胞增殖失控而癌變[18~20]。當前研究其與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有較為明顯的關(guān)系,尤其是對結(jié)直腸癌的預(yù)后有較為明顯的關(guān)系。在KRAS未發(fā)生突變的情況下,使用分子靶向藥物帕尼單抗治療結(jié)直腸癌患者取得了較好的治療效果[21,22]。本研究發(fā)現(xiàn),CXCL13 及其受體蛋白CXCR5的表達與KRAS基因的突變具有一定的相關(guān)性,我們推測CXCL13及CXCR5與KRAS基因的信號傳遞有一點關(guān)聯(lián),其具體影響機制有待進一步研究。

        本研究結(jié)果表明,趨化因子CXCL13及CXCR5蛋白在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移灶中的表達高于其原發(fā)灶,提示其與結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移有一定相關(guān),其具體作用機制有待進一步探索。CXCL13及CXCR5蛋白表達陽性的結(jié)直腸癌患者其無進展生存期明顯低于CXCL13及 CXCR5陰性表達患者,提示 CXCL13及CXCR5是結(jié)直腸癌患者的不良預(yù)后因子,其具體機制有待進一步研究。CXCL13及CXCR5的表達與KRAS基因的突變有一定的相關(guān)性,CXCL13及CXCR5表達的患者中KRAS基因突變發(fā)生率較高,提示CXCL13及CXCR5可能參與KRAS基因信號的傳遞,其具體影響機制尚需深入探討。

        [1]周松濤,高峰,張鑫,等.結(jié)直腸癌淋巴管生成與淋巴轉(zhuǎn)移的研究進展[J].結(jié)直腸肛門外科,2012,18(5):333-337.

        [2]高春芳,范乃軍,王秀麗,等.應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)初步建立結(jié)直腸癌區(qū)域淋巴轉(zhuǎn)移分類樹模型[J].解放軍醫(yī)學雜志,2010,12(3):121-125.

        [3]高友福,姜波健.進展期結(jié)直腸癌淋巴轉(zhuǎn)移規(guī)律的臨床研究[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2000,7(1):27-29.

        [4]曹寶森,李霞,常茂葉,等.CXCL13及其受體CXCR5表達與非小細胞肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥,2013,53(1):59-61.

        [5]道書艷,郭葆玉.趨化因子CXCL13及其受體CXCR5研究進展[J].國外醫(yī)學:分子生物學分冊,2003,25(4):200-203.

        [6]Agesen TH,Sveen A,Merok MA,et al.ColoGuideEx:a robust gene classifier specific for stage II colorectal cancer prognosis[J].Gut,2012,61(11):1560-1567.

        [7]Chaput N,Svrcek M,Auperin A,et al.Tumour-infiltrating CD6+8and CD5+7cells predict patient outcome in stage II-III colorectal cancer.Br J Cancer,2013,109(4):1013-1022.

        [8]梁棟,摘譯.結(jié)直腸癌流行病學特征的研究[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2012,19(4):363.

        [9]萬德森.結(jié)直腸癌流行病學與預(yù)防[J].中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志,2011,17(1):3-7.

        [10]Cho S,Song IH,Yang HC,et al.Prognostic factors of pulmonary metastasis from colorectal carcinoma[J].Interact Cardiovasc Thorac Surg,2013,17(2):303-307.

        [11]Breen EC,F(xiàn)atahi S,Epeldegui M,et al.Elevated serum soluble CD30 precedes the development of AIDS-associated non-Hodgkin's B cell lymphoma[J].Tumour Biol,2006,27(4):187-194.

        [12]Widney DP,Breen EC,Boscardin WJ,et al.Serum levels of the homeostatic B cell chemokine,CXCL13,are elevated during HIV infection[J].J Interferon Cytokine Res,2005,25(11):702-706.

        [13]Burkle A,Niedermeier M,Schmitt-Graff A,et al.Overexpression of the CXCR5 chemokine receptor,and its ligand,CXCL13 in B-cell chronic lymphocytic leukemia[J].Blood,2007,110(9):3316-3325.

        [14]張巖,王鐵栓,趙松.趨化因子CXCL13在胸腺瘤合并重癥肌無力發(fā)病中的作用[J].中國老年學雜志,2012,32(12):2484-2486.

        [15]易誠青,馬春輝,張國橋,等.CXCLl3和CXCR5在骨缺損成骨微環(huán)境中的表達特征[J].上海交通大學學報:醫(yī)學版,2012,32(12):1536-1539.

        [16]鄒春華,周青春,馮瑋,等.趨化因子受體CXCR5在肺癌中的表達及其意義[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學,2010,18(5):906-908.

        [17]Razis E,Kalogeras KT,Kotoula V,et al.Improved outcome of high-risk early HER2 positive breast cancer with high CXCL13-CXCR5 messenger RNA expression[J].Clin Breast Cancer,2012,12(3):183-193.

        [18]Magliano MP,Logsdon CD.Roles for KRAS in pancreatic tumor development and progression[J].Gastroenterology,2013,144(6):1220-1229.

        [19]Demes M,Scheil-Bertram S,Bartsch H,et al.Signature of microsatellite instability,KRAS and BRAF gene mutations in German patients with locally advanced rectal adenocarcinoma before and after neoadjuvant 5-FU radiochemotherapy[J].J Gastrointest Oncol,2013,4(2):182-192.

        [20] Ouerhani S,Bougatef K,Soltani I,et al.The prevalence and prognostic significance of KRAS mutation in bladder cancer,chronic myeloid leukemia and colorectal cancer[J].Mol Biol Rep,2013,40(6):4109-4114.

        [21]Parsons B L,Myers M B.Personalized cancer treatment and the myth of KRAS wild-type colon tumors[J].Discov Med,2013,15(83):259-267.

        [22] Eklof V,Wikberg ML,Edin S,et al.The prognostic role of KRAS,BRAF,PIK3CA and PTEN in colorectal cancer[J].Br J Cancer,2013,108(10):2153-2163.

        猜你喜歡
        趨化因子基因突變直腸癌
        大狗,小狗——基因突變解釋體型大小
        英語世界(2023年6期)2023-06-30 06:29:10
        管家基因突變導(dǎo)致面部特異性出生缺陷的原因
        基因突變的“新物種”
        腹腔鏡下直腸癌前側(cè)切除術(shù)治療直腸癌的效果觀察
        直腸癌術(shù)前放療的研究進展
        COXⅠ和COX Ⅲ在結(jié)直腸癌組織中的表達及其臨床意義
        趨化因子及其受體在腫瘤免疫中調(diào)節(jié)作用的新進展
        GRP及GRPR在結(jié)直腸癌中的表達及意義
        肝細胞癌患者血清趨化因子CXCR12和SA的表達及臨床意義
        從EGFR基因突變看肺癌異質(zhì)性
        亚洲va欧美va国产综合| 久久久久人妻精品一区二区三区| 国产精品99无码一区二区| 久久久久久久久888| 中文字幕无码免费久久9一区9| 国产伦一区二区三区久久| 日本道色综合久久影院| 国产麻豆成人精品av| 欧美一区二区午夜福利在线yw| 狼人综合干伊人网在线观看| 国产亚洲超级97免费视频| 亚洲日本va中文字幕| 欧美一级人与嘼视频免费播放| 午夜亚洲精品视频网站| 女优av一区二区三区| 国产天美传媒性色av| 亚洲国产香蕉视频欧美| 中文字幕成人精品久久不卡91 | 亚洲国产精品色一区二区| 国产精品一区二区三区在线蜜桃| 国产午夜精品一区二区三区嫩草| 国产一毛片| 亚洲中字永久一区二区三区| 亚洲成av人综合在线观看| 日韩a无v码在线播放| 欧美在线观看www| 国产片在线一区二区三区| 少妇被粗大的猛烈进出69影院一| 在线综合网| 日本一区二区精品色超碰| 欧美高清视频手机在在线| 在线观看午夜亚洲一区| 无码伊人66久久大杳蕉网站谷歌| 人妻中文久久人妻蜜桃| 各种少妇正面着bbw撒尿视频| 亚洲自偷自拍另类图片小说| 久久五月精品中文字幕| 亚洲av中文无码字幕色本草| 日韩精品无码一区二区中文字幕 | 精品久久亚洲一级α| 久久亚洲免费精品视频|