姚 遠，朱克剛，陳德森，鄒佩霞

(1．湖北醫(yī)藥學院附屬太和醫(yī)院，湖北十堰442000;2．湖北醫(yī)藥學院，湖北十堰442000)

丹參滴丸是提取丹參、三七的有效成分再加入適量冰片而制成的新型純中藥滴丸劑，其主要有效成分為丹參素、兒茶醛和丹酚酸B。該藥藥性芳香，味微苦，具有活血化瘀、理氣止痛之功效，主要用于胸中憋悶、心絞痛，是治療冠心病的中藥，具有擴張心腦血管、改善微循環(huán)、增加冠脈血流量、改善心臟泵血功能作用［1］。由于其對于腎性高血壓兔離體冠狀動脈環(huán)的舒縮功能及其機制鮮有報道，為此筆者對腎性丹參滴丸對高血壓兔離體冠狀動脈環(huán)的影響進行了系統(tǒng)實驗研究，對其作用機制進行分析，旨在為其用于心絞痛及冠心病的治療提供實驗及理論依據(jù)。

1 實驗資料

1.1 動物及分組 家兔24只由湖北省實驗動物研究中心提供，雌雄兼用，體質量(1．80±0．50)kg。采用隨機數(shù)字表隨機分為模型組、維拉帕米組、丹參滴丸組。

1.2 儀器及藥品 BL－420生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟電子有限公司);去甲腎上腺素(NE，武漢遠大制藥集團有限公司，批號:080203);Krebs－Henseleit(KH)營養(yǎng)液(自制)，用1 mol/L HCL調(diào)pH至7．4，通混合氣體(95%O2+5%CO2);維拉帕米(江蘇方強制藥廠生產(chǎn)，批號:20111008);丹參滴丸(天津天士力制藥股份有限公司，國藥準字Z10950111，丸劑，每料27 mg)。

1.3 腎性高血壓模型兔制備方法 參照文獻［2］，動物用3%戊巴妥鈉麻醉，俯臥位固定于第12胸椎水平距棘突旁約1．5 cm處用直剪剪開肌腱、腹膜進入腹腔，暴露腎臟，分離出左右腎動脈約0．5 cm，將一內(nèi)徑為0．3～0．35 mm內(nèi)徑鈦合金夾呈水平方向套在腎動脈上，以狹窄后雙腎顏色變?yōu)椤皽\紅色”為宜，術后每天1次注射青霉素G 80萬IU預防感染，共1周。術后6周即為造模成功的腎性高血壓模型。

1.4 離體兔冠狀動脈的制備及記錄 用BL－420F生物實驗系統(tǒng)記錄實驗結果［3］。兔擊頭處死，打開胸腔，取出心臟迅速分離出冠狀動脈，制成2～3 mm的動脈環(huán)，與張力換能器相連懸掛于10 mL的浴槽中，負荷2 g，浴槽中通入95%O2+5%CO2混合氣體，溫度保持37℃，每10～15 min換Krebs－Henseleit(KH)營養(yǎng)液1次，平衡1 h后加入最大收縮濃度的NE(10－4mol/L)，待收縮達峰值后，加入CaCl2溶液使KH營養(yǎng)液中的CaCl2終濃度達到2．52 mmol/L，待血管收縮達峰值后，用KH液沖洗數(shù)次，使血管恢復至基線水平后再次換無鈣KH 液，5 min 后加入丹參滴丸(5 ×10－2，5 ×10－3，5 ×10－4，5 ×10－5mol/L，溫孵15 min后測定血管收縮張力。

2 結 果

2.1 各組兔冠狀動脈環(huán)收縮張力比較 模型組在4次加入0．1 mL的雙蒸水后，兔冠狀動脈環(huán)的收縮張力降低值無明顯變化。維拉帕米組在加入NE后，分別累計加入5×10－2，5×10－3，5 ×10－4，5 ×10－5mol/L 的維拉帕米，兔冠狀動脈環(huán)的收縮張力與模型組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P均＜0．05)。丹參滴丸組在累計加入10－2～10－3mol/L丹參滴丸后，兔冠狀動脈收縮張力和與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1及表2。

表1 各組兔冠狀動脈環(huán)收縮張力比較(±s，g)

表1 各組兔冠狀動脈環(huán)收縮張力比較(±s，g)

注:①與模型組比較，P ＜0．05。

組別 n 5×10－5mol/L 5×10－4mol/L 5×10－3mol/L 5×10－2mol/L模型組8 0．01 ±0．01 －0．02 ±0．00 0．01 ±0．01 －0．01±0．01維拉帕米組 8 0．08 ±0．02 0．42 ±0．07① 1．65±0．09① 2．32±0．13①丹參滴丸組 8 0．02 ±0．01 0．03±0．01 0．51±0．07① 0．86±0．08①

表2 各組兔冠狀動脈收縮張力降低百分率比較(±s，%)

表2 各組兔冠狀動脈收縮張力降低百分率比較(±s，%)

注:①與模型組比較，P ＜0．05;②與維拉帕米組，P ＜0．05。

組別 n 5×10－5mol/L 5×10－4mol/L 5×10－3mol/L 5×10－2mol/L模型組8 0．04 ±0．01 －0．02 ±0．01 0．01 ±0．01 －0．01±0．01維拉帕米組 8 0．07 ±0．03 8．19 ±1．14① 30．21±5．67① 46．29±9．13①丹參滴丸組 8 0．03 ±0．01 0．13±0．03 16．29±6．39① 27．58±6．97①

2.2 各組兔冠狀動脈收縮量效曲線比較 實驗測得模型組雙蒸水對NE引起的血管收縮無任何影響。模型組的NE對內(nèi)、外源性鈣兔冠狀動脈環(huán)的收縮張力為(1．76±0．14)g和(2．31±0．15)g，丹參滴丸5×10－2mol/L 和5 ×10－3mol/L 測定NE引起的外源性鈣收縮張力分別為(1．29±0．13)g和(0．91±0．11)g，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。NE可劑量依賴性地引起兔冠狀動脈環(huán)收縮，加入5×10－2mol/L，5 ×10－3mol/L，5 ×10－4mol/L，5 ×10－5mol/L 丹參滴丸后，再以同樣的方式累加給予不同濃度的NE可見NE的量效曲線均非平行右移，最大反應曲線壓低，說明丹參滴丸與NE呈非競爭性拮抗關系，可以使腎性高血壓兔冠狀動脈環(huán)舒張。見圖1。

3 討 論

丹參滴丸的藥理作用主要是對心血管系統(tǒng)的，有文獻報道丹參滴丸能降低冠脈阻力及動脈壓，明顯增加冠脈流量［4］。丹參滴丸可以口服，也可舌下含服，不僅可以作為冠心病的常規(guī)用藥，而且可作為緩解心絞痛的急救藥。由于NE激活α1受體，促進細胞膜上的鈣通道開放并通過第二信使IP3的作用使細胞內(nèi)鈣釋放引起肌張力升高［5］。故本研究以NE作為激動劑，使腎性高血壓兔離體冠狀動脈平滑肌收縮，以觀察丹參滴丸對血管平滑肌細胞電壓依賴性鈣通道和受體操縱鈣通道介導的外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放的影響。本研究發(fā)現(xiàn)，丹參滴丸可抑制NE引起的冠脈收縮，證實丹參滴丸對NE有拮抗作用，可劑量依賴性的抑制NE對內(nèi)源性鈣釋放及外源性鈣內(nèi)流所引起的腎性高血壓兔離體冠狀動脈環(huán)的收縮，丹參滴丸既可抑制兔冠狀動脈平滑肌細胞膜電壓依賴性和受體操縱性外鈣內(nèi)流，又可抑制受體操縱性細胞內(nèi)鈣庫釋放鈣。由此可以判斷丹參滴丸具有擴張腎性高血壓兔冠狀動脈的作用，這可能與其降低細胞內(nèi)鈣濃度有關。既可以減少Ca2+內(nèi)流，又有Ca2+拮抗作用。朱怡等［6］報道兔冠狀動脈平滑肌細胞上交感縮血管纖維分布較少(其末梢釋放NE)，但無論何種原因引起的冠脈收縮都是通過增加平滑肌細胞內(nèi)的Ca2+來實現(xiàn)的［7］。

丹參滴丸可以抑制NE引起的腎性高血壓兔離體冠狀動脈環(huán)收縮，具有舒張冠狀動脈血管平滑肌、增加冠脈血流量的作用，其作用機制可能與其抑制平滑肌細胞受體操縱鈣通道介導的外鈣內(nèi)流和電壓依賴性鈣通道的內(nèi)鈣釋放，擴張冠狀動脈有關，為臨床治療高血壓冠心病的有效中藥丸劑。

［1］何蘭香．復方丹參滴丸的作用機制及臨床應用［J］．現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2010，19(8):1030 －1032

［2］陳德森，李莉，郭俐宏，等．腹主動脈狹窄致左室肥厚動物模型制備［J］．山西醫(yī)科大學學報，2004，35(6):627－628

［3］陳德森，郭俐宏，李莉，等．丹參滴丸對大鼠局灶性腦缺血再澆灌注損傷的影響［J］．山西醫(yī)科大學學報，2010，41(9):780 －781

［4］唐建華，郭莉娜，李玲妹，等．復方丹參滴丸治療冠心病心絞痛療效觀察［J］．現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2011，20(34):4367－4368

［5］魯春鶴，喬國芬，侯云龍，等．丹參提取物對犬離體冠狀動脈環(huán)的作用及其機制［J］．黑龍江醫(yī)學，2008，32(2):121－122

［6］朱怡，陳霞，黃屏，等．丹參川芎嗪對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用［J］．現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2011，20(7):802－804

［7］孫建波，梁軍，閆玉仙，等．復方丹參滴丸的臨床應用及作用機理［J］．現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2002，11(11):1087－1088