張 波，趙曉蓮，楊 宇，張明遠(yuǎn)，梁衍鋒，王芳芳

（佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007）

近年來(lái)，隨著人民生活水平的不斷提高，心腦血管疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升，并且已經(jīng)超過(guò)腫瘤的的趨勢(shì)，成為發(fā)病率和死亡率躍居我國(guó)第一位的疾病。而動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）正是其重要的病理生理學(xué)基礎(chǔ)［1］。隨著基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)不斷的深入，治療AS 趨向于毒性低、副作用小等方向。我國(guó)有著悠久的中醫(yī)藥傳統(tǒng)，豐富的藥用動(dòng)植物資源是巨大的醫(yī)藥寶庫(kù)，從中藥中篩選出藥物不僅是可行的途徑，而且同西藥篩選相比較，具有篩選時(shí)間短、節(jié)省人力、物力、財(cái)力、毒性低、副作用小等優(yōu)勢(shì)。蒺藜總皂苷為心腦疏通膠囊的主要成分［2］，是目前臨床上廣泛應(yīng)用于治療心血管疾病的中成藥，并顯示出良好的應(yīng)用價(jià)值，然而目前對(duì)其在抑制炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、免疫性因子表達(dá)方面的研究卻很少，且其作用機(jī)制尚無(wú)定論。本文研究者復(fù)制了AS家兔模型，檢測(cè)GSTT 對(duì)家兔血清中炎癥因子、抗炎因子水平的影響，進(jìn)而為心腦疏通膠囊在臨床上應(yīng)用于AS治療的機(jī)制進(jìn)行初步的探討。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

IL-6放射免疫試劑盒由北京北免東雅生物技術(shù)研究所提供；TGF酶聯(lián)免疫試劑盒購(gòu)于上海逸晗生物有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

50只健康雄性純種日本大耳白兔（購(gòu)自佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），兔齡4～5個(gè)月，體重（1.8±0.2）kg，實(shí)驗(yàn)前普通飼料喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組繼續(xù)喂以正常普通飼料無(wú)任何添加；AS模型組給予高脂飼料喂養(yǎng)；小劑量治療組，給予高脂飼料同時(shí)添加6.3mg／kg·d GSTT；大劑量治療組，給予高脂飼料添加12.6mg／kg·d GSTT；陽(yáng)性藥物對(duì)照組，給予高脂飼料添加2.35mg／kg·d辛伐他汀，定期稱體重、抽血。連續(xù)喂養(yǎng)6周后，禁食8h，腹腔注射20%烏拉坦20mL／kg，麻醉狀態(tài)下沿腹正中線切開(kāi)皮膚、結(jié)締組織，活體剝離腹主動(dòng)脈取血2mL。

1.3 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)

腹主動(dòng)脈取的全血，靜止幾分鐘后，分離上層血清，全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）；血清IL-6水平由酶聯(lián)免疫吸附方法測(cè)定；TGF水平放射由免疫分析方法測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差方式表示。多組樣本均數(shù)的比較采用AVON分析。

2 結(jié)果

2.1 TC、TG 水平的測(cè)定

與正常對(duì)照組相比較，模型組，大、小劑量GSTT 治療組，陽(yáng)性藥物對(duì)照組，血清中TC 及TG 水平明顯升高（P＜0.05），說(shuō)明AS 模型建立成功。與AS 模型組相比較，GSTT 大、小劑量治療組，陽(yáng)性藥物對(duì)照組TC、TG 濃度水平顯著降低（P＜0.05）；大、小劑量治療組比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)第5周各實(shí)驗(yàn)組TC、TG 水平（±s，mmol／L）

表1 實(shí)驗(yàn)第5周各實(shí)驗(yàn)組TC、TG 水平（±s，mmol／L）

＊與空白對(duì)照組比較P＜0.05，＃ 與模型組比較P＜0.05。

2.2 IL-6、TGF水平的測(cè)定

與AS模型組相比較，GSTT 大、小劑量治療組，陽(yáng)性藥物對(duì)照組血漿IL-6濃度水平升高、同時(shí)TGF 濃度水平顯著降低（P＜0.05）；大、小劑量治療組比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 實(shí)驗(yàn)第5周各實(shí)驗(yàn)組IL-6、TGF水平（±s，mmol／L）

表2 實(shí)驗(yàn)第5周各實(shí)驗(yàn)組IL-6、TGF水平（±s，mmol／L）

＃與模型組比較P＜0.05。

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生過(guò)程是一個(gè)相當(dāng)緩慢的過(guò)程，而且是一個(gè)變化的動(dòng)態(tài)過(guò)程［3］。現(xiàn)國(guó)際上已公認(rèn)，高脂血癥是導(dǎo)致AS的最重要原因，其中TC、LDL-C 被視為致AS的危害因子。高血脂誘發(fā)家兔動(dòng)脈粥樣硬化，是經(jīng)典的研究動(dòng)脈粥樣硬化病理機(jī)制和治療方法的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀１緦?shí)驗(yàn)中TG、TC 水平明顯增高，說(shuō)明高脂血癥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型成功建立。二級(jí)干預(yù)試驗(yàn)表明：降低血TC、TG 水平能顯著減緩肢體和冠狀粥樣斑塊的形成。在本次實(shí)驗(yàn)研究中，蒺藜總皂苷能夠顯著降低實(shí)驗(yàn)性AS 家兔血清中TC和TC 的含量水平，說(shuō)明其能延緩動(dòng)脈粥樣硬化血脂的形成。

隨著研究逐步深入，一些化學(xué)因子和細(xì)胞因子不斷被檢出，近年來(lái)又重新提出了AS是炎癥的觀點(diǎn)，AS的表現(xiàn)符合炎癥表現(xiàn)的普遍規(guī)律［4～6］，而越來(lái)越多的證據(jù)表明，炎癥過(guò)程在動(dòng)脈粥樣硬化及其并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中起著重要作用［7］，近年來(lái)對(duì)其發(fā)病機(jī)制的研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)炎癥啟動(dòng)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生并影響其進(jìn)程［8］，其實(shí)質(zhì)上是對(duì)AS發(fā)病機(jī)理研究的概括和啟示。

從AS是一種炎癥的觀點(diǎn)出發(fā)，其治療只有針對(duì)炎癥發(fā)生發(fā)展的基本環(huán)節(jié)，才能真正達(dá)到防治的目的。炎癥的表現(xiàn)既有損傷一面，也有抗損傷一面，不能一概而論。血管炎癥標(biāo)記物的血漿水平有助于區(qū)分高危心血管病患者。這些標(biāo)記物包括P選擇素（P-selectin）、白介素-6（IL-6）、白介素-1（IL-1）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、腫瘤轉(zhuǎn)化因子（TGF）、可溶性細(xì)胞內(nèi)黏附因子和C反應(yīng)蛋白（CRP）。免疫反應(yīng)在AS中的作用是由微環(huán)境中致炎因子／抗炎因子平衡決定［9］。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)蒺藜總皂苷拮抗動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，可能通過(guò)：①降低血漿TG和LDL-C水平，延緩動(dòng)脈粥樣斑塊的形成；②IL-6含量降低、TGF的含量升高，說(shuō)明蒺藜總皂苷具有明顯抑制炎癥因子的形成以及促進(jìn)抗炎因子生成的作用。減輕血管壁炎癥反應(yīng)，進(jìn)而產(chǎn)生抗AS的作用。為心腦疏通膠囊應(yīng)用于動(dòng)脈粥樣硬化的抗炎治療給予我們一些新的啟示，展現(xiàn)出一種新的研究方向和途徑，為其臨床應(yīng)用提供了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。

［1］管高峰，華先平，王琳，等.丹紅注射液對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔血管壁炎癥的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2006，10（4）：884-886

［2］胡文蘭.高密度脂蛋白抗動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)內(nèi)科學(xué)分冊(cè)，2003，30（6）：235-323

［3］陳賀中，朱曉峰，趙麗娜.動(dòng)脈粥樣硬化病因的現(xiàn)代概念［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，1999，22（3）：40

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［5］Leinnoen M，Soiklsu P.Infectious and atherosclerosis［J］.Scand Cardiovas J，2000，34（1）：12-20

［6］Kiechl S，Egger G，MayM，et al.Chronic infectious and risk of carotid atherosclerosis prospective results from a large population study［J］.Circulation，2001，103（8）：1064-1070

［7］Li JJ.Silent myocardial ischemia may be related to inflammatory response［J］.Med Hypotheses，2004，62：252-256

［8］王賀田，李娟.急性冠狀動(dòng)脈綜合征與炎癥的關(guān)系［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2007，30（6）：88-89

［9］Ficht lscherer S，Brener S，Heeschen C，et al.Interleukin-10serum levels and syst emic endothelial vasoreact ivit y in patients withcoronary artery disease［J］.J Am Coll Cardiol，2004，44（1）：44-49