錢曉燕

青海省血液中心成分科，青海西寧 810000

隨著醫(yī)學(xué)新技術(shù)的開展，臨床對(duì)血小板制品的需求正在穩(wěn)步增加。血小板制品在救治各種原因引起的血小板減少，或功能異常引起的出凝血障礙患者中發(fā)揮重要作用。我國目前血小板成分制品的種類按來源分為兩類，一類為機(jī)采單人份血小板（SDPs），是血細(xì)胞分離機(jī)從單一體內(nèi)采集，其優(yōu)點(diǎn)為純度高、紅細(xì)胞、白細(xì)胞污染少。但存在設(shè)備耗材貴、采集時(shí)間長、招募獻(xiàn)血者困難，難以滿足臨床需求增長。一類由新鮮全血制備濃縮血小板（WBDPs），資源豐富、成本低，即充分利用寶貴的血液資源，又能補(bǔ)充臨床需求和危重患者搶救用血。探討在我省特殊的地理環(huán)境下制備濃縮血小板和機(jī)采血小板的質(zhì)量有無不同，我省地處高原平均海拔3400～3600之間，人的機(jī)體長期處于高原環(huán)境中，由于缺氧導(dǎo)致紅細(xì)胞過度增生，血液粘滯度增加，并引起一系列臨床癥狀，稱高原紅細(xì)胞增多癥（HAPC）[1]。這種在高原人群常見現(xiàn)象對(duì)血小板成分制品的制備、質(zhì)量有無影響?，F(xiàn)將該中心2014年3月以機(jī)采法和BC法兩種不同方法制備的血小板制品共100人份，并對(duì)這兩種方法制備的血小板制品的質(zhì)量分別進(jìn)行檢測，統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

①機(jī)采血小板獻(xiàn)血員。年齡20～45周歲，男性體重≥50kg，女性體重≥45kg。符合國家標(biāo)準(zhǔn)《GB獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》[2]。采血前 pt≥150×10L，獻(xiàn)血間隔時(shí)間≧30 d，1周內(nèi)禁服阿司匹林類藥物，獻(xiàn)血者每次只采集1個(gè)治療量血小板，共采集50人份。

②街頭固定采血點(diǎn)采集的符合國家標(biāo)準(zhǔn)?！禛B獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》[2]的自愿無償獻(xiàn)血者全血（400 mL/50名），采血前1周內(nèi)未服用阿斯匹林等藥物，采血順暢，無反復(fù)穿刺，常溫保存和運(yùn)輸，8 h內(nèi)采用白膜法制備濃縮血小板符合 《全血及成分血質(zhì)量要求》[3]，共制備 50人份。

1.2 設(shè)備

MCS+血細(xì)胞分離機(jī)（美國輸血技術(shù)公司）、一次性封閉式采集成分血耗材（美國輸血技術(shù)公司）、Cryofuge 6000i大容量低溫離心機(jī)（美國）、XHZ-IB血小板振蕩保存箱（蘇州醫(yī)療設(shè)備廠）。

1.3 方法

①采集前將合格獻(xiàn)血者血小板計(jì)數(shù)、性別、身高、體重等數(shù)據(jù)輸入血細(xì)胞分離機(jī)，并選擇血小板采集程序，按MCS+血細(xì)胞分離機(jī)操作規(guī)程操作。

②將采集400 mL新鮮全血6～8 h內(nèi)先重離心（1970×g 22℃15分），分離出白膜層，再將白膜層輕離心（790×g 22℃ 10分）去除白細(xì)胞、紅細(xì)胞，后分離出富含血小板的上層液，即為2u濃縮血小板。

1.4 血小板質(zhì)量測定

血小板含量、白細(xì)胞混入量、紅細(xì)胞混入量測定按血球計(jì)數(shù)儀說明書提供的方法及配套試劑，對(duì)血小板制品進(jìn)行檢測計(jì)算，血小板數(shù)＝血小板計(jì)數(shù)∕L×稀釋倍數(shù)×血小板容量（L），紅細(xì)胞＝紅細(xì)胞計(jì)數(shù)∕L×稀釋倍數(shù)×血小板容量（L），白細(xì)胞＝白細(xì)胞∕L×血小板容量（L）。

血小板無菌試驗(yàn) 無菌條件下分別向血液細(xì)菌培養(yǎng)瓶中各接種10微升待測標(biāo)本，置細(xì)菌培養(yǎng)儀37℃培養(yǎng)72 h，每日觀察并記錄結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

以Excel表格統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，利用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行χ2檢驗(yàn)計(jì)算分析。

2 結(jié)果

兩種血小板成分制品的質(zhì)量對(duì)比情況，見表1。

表1 兩種血小板成分制品的質(zhì)量對(duì)比情況（n=50）

隨機(jī)采集機(jī)采血小板成分制品（SDPs）共50份，經(jīng)22℃血小板振蕩保存箱水平振蕩（60次/min）1 h后留樣，送中心質(zhì)控科監(jiān)測并記錄。最終測定為血小板平均含量為（2.50±0.08）×1011/L，白細(xì)胞混入量為（3.42±0.70）×108/L，紅細(xì)胞混入量為（5.86±0.76）×109/L，細(xì)菌培養(yǎng)為陰性，pH值為6.8～7.0之間。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

隨機(jī)采集由400 mL全血用白膜法制備的濃縮血小板（WBDPs）共50袋，通過重離心制備白膜層，然后輕離心去除紅細(xì)胞白細(xì)胞，即得濃縮血小板（60～75 mL/袋）。將分離出的濃縮血小板于血小板振蕩保存箱水平振蕩（60次/min）1 h留樣并送質(zhì)控科，監(jiān)測紀(jì)錄。最終測定血小板平均含量為（2.41±0.28）×1011/L，白細(xì)胞混入量為（1.85±0.62）×108/L，紅細(xì)胞混入量為（6.13±0.58）×109/L，細(xì)菌培養(yǎng)為陰性，pH值為6.9～7.2之間。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

3 討論

兩組血小板成分制品的血小板數(shù)均達(dá)到國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，白膜法制備的（濃縮血小板數(shù)（10～14 U為1個(gè)治療量）與機(jī)采（IU為1個(gè)治療量）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而紅細(xì)胞、白細(xì)胞混入量明顯高于機(jī)采血小板。白膜法制備濃縮血小板質(zhì)量低于機(jī)采血小板，制備工藝有待優(yōu)化和改進(jìn)，降低紅細(xì)胞、白細(xì)胞混入量，提高濃縮血小板質(zhì)量。由于捐血者血小板含量、分離制備方法及操作人員手法等諸多原因，由全血制備的濃縮血小板差異很大，因此要得到1個(gè)成人治療劑量的血小板需要匯集不同量的濃縮血小板[4]。從上表中顯示我省血小板成分制品中濃縮血小板的血小板計(jì)數(shù)基本合格，紅細(xì)胞明顯混入量尤為明顯，明顯高于內(nèi)地其他省份。我省地處高原地區(qū)，HAPC患者獻(xiàn)血時(shí)，需要考慮到其血紅蛋白，高血液黏滯度的因素，在加工儲(chǔ)存的過程中予以關(guān)注[5]。目前關(guān)于HAPC患者獻(xiàn)血領(lǐng)域的文獻(xiàn)報(bào)道十分有限，有待更多研究對(duì)HAPC患者的獻(xiàn)血指征等臨床問題提出建議。

影響血小板質(zhì)量因素：①制備方法 血小板很脆弱，制備方法是保證血小板質(zhì)量的前提。②保存的溫度最佳貯存溫度20～24℃，包括采集、運(yùn)輸、制備等各個(gè)環(huán)節(jié)，接觸低溫會(huì)縮短血小板壽命。③血小板成分制品的pH值有研究發(fā)現(xiàn)pH值6.9～7.4時(shí)形態(tài)無明顯改變，pH值低于6.8以下時(shí)血小板形態(tài)發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變化，輸入后體內(nèi)存活率低。④血小板中紅細(xì)胞、白細(xì)胞混入量 白細(xì)胞超標(biāo)可引起同種異體的免疫輸血反應(yīng)，紅細(xì)胞超標(biāo)因代謝導(dǎo)致成分制品pH值下降?？刂萍t細(xì)胞白細(xì)胞混入量是濃縮血小板質(zhì)量關(guān)鍵。

目前血小板去除白細(xì)胞及血小板保存成為關(guān)注的熱點(diǎn)，我省相關(guān)研究存在明顯差距。白膜法制備濃縮血小板都會(huì)混入較多白細(xì)胞，輸血前濾除血制品中白細(xì)胞可降低血小板抗體產(chǎn)生[6]。為了降低輸血治療造成的不良反應(yīng)及疾病感染，去除治療用血液制品中的白細(xì)胞含量，己成為近代輸血的新趨勢[7]。血小板成分制品的白細(xì)胞濾器，不改變血小板形態(tài)，對(duì)血小板聚集功能及抗低滲休克能力無明顯影響，使血小板成分制品在臨床有更好治療效果。機(jī)采血小板對(duì)獻(xiàn)血者身體及血小板計(jì)數(shù)要求高，其質(zhì)量較好，但因捐獻(xiàn)者不確定性導(dǎo)致臨床供應(yīng)緊張。而全血采集后如果僅分離制備紅細(xì)胞和血漿，會(huì)造成血小板成分浪費(fèi)，因分離制備技術(shù)提高，使手工分離的濃縮血小板成分制品質(zhì)量己達(dá)到很高水平，所以分離制備濃縮血小板己成為機(jī)采血小板的有力補(bǔ)充[8]。成分輸血不僅有效地節(jié)約了血液資源，而且促進(jìn)了輸血的科學(xué)化有效化和安全化[9]。

[1]高亮，崔建華，馬廣全，等.大豆異黃酮對(duì)海拔5000 m以上高原紅細(xì)胞增多癥患者氧自由基代謝的影響 [J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012（34）：2528-2529.

[2]中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn).GB18467-2011.獻(xiàn)血者健康檢查要求[M].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2011：9.

[3]中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn).GB18469-2012.全血及成分血質(zhì)量要求[M].中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012：9.

[4]王紅，吳瑕，鐘銳，等.全血制備濃縮血小板的匯集及濾除白細(xì)胞的多中心研究[J].中國輸血雜志，2012，25（10）：990-992.

[5]吳小東.杜磊.高原紅細(xì)胞增多癥[J].中國輸血雜志，2013，26（6）：589-590.

[6]饒美英，葉水文，張楠，等.多次輸血患者血小板抗體檢測及輸注效果分析[J].中國輸血雜志，2013，26（9）：891-892.

[7]羅曉娟，桂麗.影響混合濃縮血小板濾除白細(xì)胞效果的分析[J].中國輸血雜志，2013，26（12）：1248-1249.

[8]易中梅，王紅蘋，李晨晨，等.全血手工制備濃縮血小板后的血漿再制備冷沉淀的質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].中國輸血雜志，2013，26（2）：117-118.

[9]完曉菊，王保龍.血漿制劑的種類及臨床應(yīng)用分析[J].中國輸血雜志，2011，10（24）：848-849.