杜永華+范靜+魏琴等

摘要：為了提高油樟[Cinnamomum longepaniculatum （Gamble） N.Chao]葉揮發(fā)油的水溶性及其在制劑過(guò)程中的穩(wěn)定性，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定油樟葉揮發(fā)油水乳劑配比，并對(duì)該配方產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，包括水乳劑類(lèi)型鑒別、物理性能、穩(wěn)定性、持泡性等，檢驗(yàn)產(chǎn)品的合格性。結(jié)果表明，油樟葉揮發(fā)油水乳劑最佳乳化工藝確定為乳化劑親水親油平衡值HLB為12.0、乳化劑添加比例為4%、油樟葉揮發(fā)油添加比例為20%，所得乳劑的離心穩(wěn)定性常數(shù)Ke為20.80%。此配方所得油樟葉揮發(fā)油水乳劑穩(wěn)定性好，可有效減少揮發(fā)油的損失。

關(guān)鍵詞：油樟[Cinnamomum longepaniculatum （Gamble） N.Chao]葉；揮發(fā)油；水乳劑；制備；表征

中圖分類(lèi)號(hào)：S565.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）18-4381-06

油樟[Cinnamomum longepaniculatum （Gamble） N.Chao]，系被子植物門(mén)雙子葉植物綱，樟科（Lauraceae）樟屬（Cinnamomum Trew）的珍貴樹(shù)種，俗稱(chēng)大葉樟，中國(guó)除臺(tái)灣省外，獨(dú)有分布于宜賓，亦稱(chēng)“宜賓油樟”[1]。樟樹(shù)的樹(shù)干、樹(shù)兜、樹(shù)根及枝葉都含有樟油和樟腦，它們是重要的香料、農(nóng)藥、礦業(yè)、國(guó)防和化工等原料[2]。

目前對(duì)于油樟的研究主要是集中在其揮發(fā)油成分及其生物活性上。本研究所使用的油樟葉揮發(fā)油來(lái)自宜賓，它是從油樟樹(shù)的葉經(jīng)水蒸氣蒸餾提煉出來(lái)的，由幾十種不同沸點(diǎn)的化學(xué)物質(zhì)組成，是一種混合物[3]。油樟揮發(fā)油中主要含有單萜、倍半萜烯以及芳香族化合物。通過(guò)氣-質(zhì)聯(lián)用色譜分析結(jié)果顯示油樟揮發(fā)油中含有超過(guò)40多種化合物，其中已經(jīng)有26種被確定，其主要成分是1，8-桉葉腦（58.8%）、α-萜品醇（15.43%）、香檜烯（14.6%）[4]。油樟葉揮發(fā)油含有的主要化學(xué)成分均可用于醫(yī)藥領(lǐng)域，其藥用價(jià)值逐漸被學(xué)者所重視。國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究表明，樟樹(shù)含有的物質(zhì)具有殺菌[5-9]、殺蟲(chóng)及抗寄生蟲(chóng)[10]、鎮(zhèn)痛抗炎[11-13]、抗氧化[14]、活血化瘀[15]等功效。

油樟葉揮發(fā)油含量豐富，且具有一定的生物活性，但是揮發(fā)油的性質(zhì)不穩(wěn)定、易揮發(fā)、難溶于水，這些缺點(diǎn)嚴(yán)重影響揮發(fā)油作為藥物的應(yīng)用與發(fā)展，從而導(dǎo)致其在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展比較緩慢。所以在制備液體制劑時(shí)，需要制成乳劑或者加入乙醇、表面活性劑等進(jìn)行增溶[16]。乳劑可以提高難溶藥物的穩(wěn)定性、溶解度，減少藥物的不良反應(yīng)等，該劑型已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床中。本研究結(jié)合油樟揮葉發(fā)油的性質(zhì)、生物活性及生產(chǎn)實(shí)踐使用特點(diǎn)等因素，擬將油樟葉揮發(fā)油制備成水乳劑劑型。

1 材料與方法

1.1 材料

油樟葉揮發(fā)油：由宜賓學(xué)院提供。

親油性非離子表面活性劑：吐溫-80[（Tween-80），HLB 15.0，購(gòu)自成都科農(nóng)化工試劑廠]

親水性非離子表面活性劑：斯盤(pán)-80[（Span-80），HLB 4.3，購(gòu)自成都科農(nóng)化工試劑廠]

抗凍劑：乙醇

溶劑：自來(lái)水、蒸餾水、去離子水、硬水，四川農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

染色劑：蘇丹-Ⅲ、亞甲藍(lán)。

1.2 方法

1.2.1 單因素試驗(yàn) 以水乳劑的穩(wěn)定性（分層現(xiàn)象和渾濁程度）為考察標(biāo)準(zhǔn)，分別考察復(fù)合表面活性劑HLB值、乳化劑添加比例、揮發(fā)油添加比例（分散相濃度）、抗凍劑、不同溶劑對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。①?gòu)?fù)合表面活性劑HLB值對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。將吐溫-80和斯盤(pán)-80配成HLB值為7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0、14.0的混合乳化劑，取8支具塞試管，加入2mL油樟葉揮發(fā)油，再分別加入上述不同HLB值的混合乳化劑，劇烈振搖10 s，然后加入蒸餾水4 mL，振搖20次，然后沿著管壁緩慢加入蒸餾水，使之成全量10 mL，分別觀察記錄乳劑分層毫升數(shù)。② 乳化劑添加比例對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。取8只具塞試管，選擇復(fù)合乳化劑HLB為13.0，揮發(fā)油的含量20%，研究不同乳化劑比例（1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%）對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。③揮發(fā)油添加比例（分散相濃度）對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。取12只具塞試管，選擇乳化劑添加比例為5.0%，研究不同揮發(fā)油添加比例（1%、2%、3%、4%、5%、6%、10%、20%、30%、40%、50%、60%）對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。④抗凍劑對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。選擇復(fù)合表面活性劑HLB值13.0、乳化劑添加比例5.0%和揮發(fā)油添加比例（分散相濃度）為20.0%，在低溫下貯存7 d，每天觀察有無(wú)凍結(jié)現(xiàn)象，若沒(méi)有則無(wú)需加入防凍劑。若有凍結(jié)現(xiàn)象，則進(jìn)行抗凍劑的添加和篩選。取8只具塞試管，配制20%的水乳劑，研究不同添加抗凍劑比例（1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%）對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。⑤不同溶劑對(duì)水乳劑穩(wěn)定性的影響。水乳劑在不同溫度下對(duì)連續(xù)水相要求，在通常情況下應(yīng)不出現(xiàn)分層或其他現(xiàn)象。用自來(lái)水、蒸餾水、去離子水和標(biāo)準(zhǔn)硬水配制20%水乳劑，常溫靜置24 h，觀察分層現(xiàn)象和渾濁程度；置于冰箱（4 ℃）24 h，觀察分層現(xiàn)象和渾濁程度。

1.2.2 正交試驗(yàn) 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，為了確定水乳劑制備的最佳工藝條件，選用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)油樟葉揮發(fā)油水乳劑制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，因素與水平見(jiàn)表1。以穩(wěn)定常數(shù)Ke（乳劑離心前后光密度變化百分率即穩(wěn)定常數(shù)，作為研究乳劑穩(wěn)定性的定量指標(biāo)）作為試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)。

Ke的計(jì)算公式如下：Ke=（A0-A）/A0×100%，式中，Ke為穩(wěn)定常數(shù)，A0為未離心乳劑稀釋液的吸光度，A為離心后乳劑稀釋液的吸光度。

具體方法如下：將油樟葉揮發(fā)油水乳劑裝入離心管中在4 000 r/min離心15min，取出下層液體29 μL于10 mL容量瓶，加去離子水至刻度，以去離子水為空白在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A），同法不經(jīng)離心直接測(cè)定A0值。根據(jù)上述計(jì)算公式算出每組水乳劑的Ke值，根據(jù)Ke值分析乳劑穩(wěn)定性[18]。

1.2.3 油樟葉揮發(fā)油水乳劑的表征 水乳劑的制備完成后，必須進(jìn)行表征，即對(duì)于水乳劑的類(lèi)型、物化性能、穩(wěn)定性等作出一個(gè)評(píng)價(jià)[19]。

1）乳劑類(lèi)型鑒別。采用脂溶性染料蘇丹-Ⅲ和水溶性染料亞甲藍(lán)染色法測(cè)定該乳劑的類(lèi)型。具體方法：乳劑樣品經(jīng)過(guò)2.0 μm的濾膜過(guò)濾后，稀釋10倍涂于載玻片上，用蘇丹-Ⅲ和亞甲藍(lán)各染色一次，于顯微鏡下觀察，如果蘇丹-Ⅲ染料在體系中均勻分散，則乳劑類(lèi)型為W/O型（油包水型）；如果亞甲藍(lán)均勻分散的則為O/W型（水包油型）。

2）乳劑物化性能測(cè)定。①外觀性能。肉眼觀察該乳劑的外觀性狀、分散性、流動(dòng)性。水包油型水乳劑的外觀為不透明的乳白色或者灰白色乳狀液，具有較好的分散性和流動(dòng)性。②形態(tài)學(xué)研究。光學(xué)顯微鏡觀察乳劑中乳滴形態(tài)。③穩(wěn)定性參數(shù)Ke值。按照“水乳劑制備工藝優(yōu)化”中的方法，測(cè)定該乳劑的乳劑離心前后光密度變化百分率即穩(wěn)定常數(shù)Ke值。

3）穩(wěn)定性測(cè)定。①稀釋穩(wěn)定性。取1 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑，用標(biāo)準(zhǔn)硬水稀釋20倍，攪拌均勻，靜置1h后，無(wú)沉淀和浮油為合格。用蒸餾水代替標(biāo)準(zhǔn)硬水重復(fù)做1次。②離心穩(wěn)定性。取一定量油樟葉揮發(fā)油水乳劑于3個(gè)離心管中，4 000 r/min離心15、30、60 min，然后觀察其外觀變化。③低溫穩(wěn)定性。取5 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑于10 mL具塞試管中，一共測(cè)試10個(gè)樣品，分別置于（4±1）℃和-20±1 ℃冰箱中，冷藏15 d，分別于0、5、10、15 d觀察乳劑外觀變化，記錄分層情況。若在低溫出現(xiàn)結(jié)塊或者渾濁情況，置于室溫，這些現(xiàn)象逐漸消失，或者經(jīng)過(guò)適當(dāng)振搖可以恢復(fù)原來(lái)乳狀液的情況，則為合格。④高溫穩(wěn)定性。取5 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑于10 mL具塞試管中，一共測(cè)試10個(gè)樣品，置于（54±1）℃恒溫箱中，貯存15 d，分別于0、5、10、15 d觀察乳劑外觀變化，記錄分層情況。要求物理穩(wěn)定性好，外觀保持均勻，若出現(xiàn)分層，在室溫振搖后可以恢復(fù)原狀。⑤凍融穩(wěn)定性。取一定量樣品，封存于西林瓶中，在常溫貯存4 h后，轉(zhuǎn)到（54±1）℃下貯存8 h，再轉(zhuǎn)至常溫貯存4 h，最后轉(zhuǎn)至（-5±1）℃下貯存8 h，如此循環(huán)凍融5次，觀察其外觀變化。⑥長(zhǎng)期穩(wěn)定性。取5 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑于西林瓶中密封，共測(cè)試10個(gè)樣品，于常溫下放置6個(gè)月，分別于1、2、3、4、5、6個(gè)月后觀察有無(wú)渾濁，沉淀、分層、相分離的現(xiàn)象。

4）持泡性。取1 mL油樟揮發(fā)油水乳劑于100 mL具塞試管中，加入99 mL標(biāo)準(zhǔn)硬水，來(lái)回顛倒30次后，室溫靜置（60±10）s后，觀察泡沫量。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)方法 所有數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素結(jié)果

2.1.1 復(fù)合表面活性劑HLB值的篩選 將吐溫-8（HLB=15.0）和斯盤(pán)-80（HLB=4.3）按照一定比例混合，配成不同HLB值的混合乳化劑，同時(shí)按照一定的水油比例混合，不同時(shí)間，觀察分層情況，乳劑分層后，其上層為黏稠狀半流動(dòng)性的液體，下層為混濁狀態(tài)不均一的液體，結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，油樟葉揮發(fā)油水乳劑的顏色均為乳白色，從乳化劑HLB值7.0～14.0由淺到深。當(dāng)乳化劑HLB值為7.0、8.0和9.0時(shí)，乳劑24 h后分層很明顯；當(dāng)乳化劑HLB值為10.0和11.0時(shí)，乳劑24 h后分層不明顯，分層乳劑的上下兩層顏色有一定的區(qū)別，上層較深；當(dāng)HLB為12.0時(shí)，乳劑24 h后分層不明顯，分層乳劑的上下兩層顏色區(qū)別不大，透過(guò)強(qiáng)光可以看到一些區(qū)別；當(dāng)HLB值為13.0、14.0時(shí)，乳劑24 h后不分層。綜上所述，HLB值為12.0、13.0和14.0的混合乳化劑乳化效率高，可作為工藝優(yōu)化的待選條件。

2.1.2 乳化劑添加比例的篩選 由表3可知，當(dāng)乳化劑的添加比例為4%、5%和6%時(shí)，幾乎看不見(jiàn)分層情況，這3個(gè)添加比例可以作為乳劑工藝優(yōu)化時(shí)的待選條件。如果乳化劑的量少于4%，則油相不能被完全乳化，乳化劑分層；若乳化劑的添加量大于6%，則乳化劑過(guò)量，也出現(xiàn)分層的情況。

2.1.3 揮發(fā)油添加比例的篩選 由表4可知，當(dāng)油樟葉揮發(fā)油的添加比例為20%、30%和40%時(shí)，分層很不明顯，這3個(gè)添加比例可以作為乳劑工藝優(yōu)化時(shí)的待選條件。

2.1.4 抗凍劑的篩選 選擇篩選得到的效果較好的HLB值、 乳化劑添加比例值和揮發(fā)油添加比例值進(jìn)行配置20%的水乳劑，在低溫下貯存7 d，每天觀察無(wú)凍結(jié)現(xiàn)象，故無(wú)需加入防凍劑。

2.1.5 不同溶劑（水相）的篩選 分別用自來(lái)水、蒸餾水、去離子水和標(biāo)準(zhǔn)硬水配制20%水乳劑，常溫靜置24 h，觀察分層現(xiàn)象和渾濁程度；置于冰箱（4 ℃）24 h，觀察分層現(xiàn)象和渾濁程度。結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知，用自來(lái)水、蒸餾水、去離子水作為溶劑（水相），均未出現(xiàn)分層情況，乳劑顏色均勻，且穩(wěn)定；標(biāo)準(zhǔn)硬水作為溶劑，其水乳劑顏色不均勻，易分層。

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果

正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6和表7。方差分析顯示，混合乳化劑的HLB值（A）對(duì)乳化效果有顯著性影響，而揮發(fā)油添加比例、乳化劑添加比例對(duì)其影響不顯著，各因素影響作用大小依次為A>C>B。由表6可知，當(dāng)乳化劑HLB 12.0、乳化劑添加比例為4%、揮發(fā)油添加比例為20%時(shí)，測(cè)得乳劑未離心稀釋液吸光度（A0）為0.226，同法測(cè)得乳劑離心后稀釋液吸光度（A）為0.197，經(jīng)計(jì)算Ke為20.80%，此值最小，所得油樟葉揮發(fā)油水乳劑較穩(wěn)定。綜上所述，優(yōu)選出最佳乳化工藝確定為A1B1C1，即乳化劑HLB 12.0、乳化劑添加比例為4%、揮發(fā)油添加比例為20%。按照優(yōu)選出來(lái)的最佳乳化工藝制備油樟葉揮發(fā)油水乳劑，進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，平行試驗(yàn)3次。結(jié)果油樟葉揮發(fā)油水乳劑穩(wěn)定性常數(shù)Ke值分別為22.35%、21.80%和20.27%，油樟葉揮發(fā)油水乳劑穩(wěn)定性常數(shù)Ke的平均值為21.47%，與之前最佳工藝篩選是測(cè)定的油樟葉揮發(fā)油水乳劑穩(wěn)定性常數(shù)Ke為20.80%很接近，表明該工藝穩(wěn)定、有效、具有可重復(fù)性。

2.3 油樟葉揮發(fā)油水乳劑的表征

2.3.1 油樟葉揮發(fā)油水乳劑的制備 根據(jù)“水乳劑制備工藝的優(yōu)化”中得出的油樟葉揮發(fā)油水乳劑最佳制備工藝，將乳化劑和油樟葉揮發(fā)油置于機(jī)械攪拌器中不斷攪拌，再加入溶劑（蒸餾水）繼續(xù)攪拌成乳白色液體，然后用FSH-Ⅱ型高速勻漿機(jī)乳化此溶液，最后用高壓勻質(zhì)機(jī)進(jìn)一步乳化，得到的乳劑密封保存于室溫下即可。

2.3.2 乳劑類(lèi)型鑒別 采用脂溶性染料蘇丹-Ⅲ和水溶性染料亞甲藍(lán)染色法測(cè)定油樟葉揮發(fā)油水乳劑的類(lèi)型（圖1和圖2）在光學(xué)顯微鏡下觀察，亞甲藍(lán)在油樟葉揮發(fā)油乳劑中均勻分散，而蘇丹-Ⅲ在乳劑中呈現(xiàn)斑塊狀不均勻的分布。油樟葉揮發(fā)油乳劑為O/W（水包油）型。

2.3.3 乳劑物理性能測(cè)定

1）外觀性能。油樟葉揮發(fā)油水乳劑眼觀為乳白色液體，顏色均勻，有一定的流動(dòng)性。

2）形態(tài)學(xué)研究。根據(jù)最佳處方工藝制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，加水稀釋5～10倍，用光學(xué)顯微鏡觀察，可見(jiàn)其乳滴形狀為圓形，較為均勻。

3）物理穩(wěn)定性參數(shù)Ke值。平行測(cè)定根據(jù)最佳處方工藝制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑的物理穩(wěn)定性參數(shù)Ke值，測(cè)定結(jié)果為20.35%、20.32%和22.60%，則油樟葉揮發(fā)油水乳劑穩(wěn)定性常數(shù)Ke的平均值為21.07%，與之前最佳工藝篩選是測(cè)定的油樟葉揮發(fā)油水乳劑穩(wěn)定性常數(shù)Ke為20.80%很接近，該水乳劑穩(wěn)定。

2.3.4 乳劑穩(wěn)定性測(cè)定

1）稀釋穩(wěn)定性。根據(jù)最佳處方工藝制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，取1 mL并加標(biāo)準(zhǔn)硬水稀釋20倍，攪拌均勻，靜置1 h后，沒(méi)有出現(xiàn)沉淀和浮油，說(shuō)明該產(chǎn)品合格。用蒸餾水代替標(biāo)準(zhǔn)硬水重復(fù)做1次，均沒(méi)有沉淀和浮油，產(chǎn)品合格。

2）離心穩(wěn)定性。取一定量按照最佳工藝配制的油樟葉揮發(fā)油水乳劑于3個(gè)離心管中4 000 r/min離心15、30、60 min，3個(gè)離心管中的水乳劑僅最下層顏色稍淺，振搖后可以恢復(fù)原來(lái)乳狀液的情況，產(chǎn)品合格。

3）低溫穩(wěn)定性。取按照最佳工藝配制的5 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑于10 mL具塞試管中，一共10個(gè)樣品，分別置于（4±1）℃和（-20±1）℃冰箱中，冷藏15 d，分別于0、5、10、15 d觀察乳劑外觀變化，均未出現(xiàn)分層情況。但是在低溫出現(xiàn)結(jié)塊情況，而非完全凍結(jié)，置于室溫，結(jié)塊迅速融化，經(jīng)過(guò)適當(dāng)振搖恢復(fù)原來(lái)乳狀液的情況，產(chǎn)品合格。

4）高溫穩(wěn)定性。取按照最佳工藝配制5 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑于10 mL具塞試管中，一共測(cè)試10個(gè)樣品，置于54±1 ℃恒溫箱中，貯存15 d，分別于0、5、10、15 d觀察乳劑外觀變化，均未出現(xiàn)分層情況，僅下層乳劑顏色稍變淺，經(jīng)過(guò)適當(dāng)振搖恢復(fù)原來(lái)乳狀液的情況，產(chǎn)品合格。

5）凍融穩(wěn)定性。取一定量樣品，封存于西林瓶中按“常溫4 h→（54±1）℃ 8 h→常溫4 h→（-5±1）℃8 h”，反復(fù)凍融5次，乳狀液并未發(fā)生明顯變化，顏色均勻，未分層，產(chǎn)品合格。

6）長(zhǎng)期穩(wěn)定性。取5 mL油樟揮發(fā)油（或者印楝油）水乳劑于西林瓶中密封，共測(cè)試10個(gè)樣品，于常溫下放置6個(gè)月，分別于1、2、3、4、5、6個(gè)月后觀察有無(wú)渾濁，隨著時(shí)間的增加，乳劑下層液體逐漸變淺，經(jīng)過(guò)適當(dāng)振搖恢復(fù)原來(lái)乳狀液的情況，但未出現(xiàn)混濁、分層、水油相分離的情況，產(chǎn)品合格。

2.3.5 持泡性 取1 mL油樟葉揮發(fā)油水乳劑于100 mL具塞試管中，加入99 mL標(biāo)準(zhǔn)硬水，來(lái)回顛倒30次后，室溫靜置（60±10） s后，泡沫量為7 mL，小于15 mL，產(chǎn)品合格。

3 小結(jié)與討論

水乳劑是一種以微小液滴分散在水中的制劑，是水包油型（O/W）乳狀液分散體[20]。水乳劑是多相分散體系，有很大的界面面積和界面能，具有熱力學(xué)的不穩(wěn)定性，所以一般通過(guò)加入乳化劑來(lái)提高其穩(wěn)定性。合適的乳化劑能在液滴表面形成致密有彈性膜以避免液滴接觸時(shí)聚結(jié)而失去穩(wěn)定，同時(shí)加入黏度調(diào)節(jié)劑以避免由于油相和水相的密度不同，在重力作用下液滴上浮或下沉引起的乳析或沉降[21]。每種乳化劑都有特定的HLB值，如果使用單一的乳化劑，一般是不能滿足含有多種組分的體系的乳化要求。通常將多種具有不同HLB值的乳化劑混合使用，構(gòu)成混合乳化劑，既可以滿足復(fù)雜體系的要求，又可以大大增進(jìn)乳化效果[22]。此外，制備水乳劑時(shí)，高能量（即高剪切攪拌器和均質(zhì)器）加入是必需的，目的是使液體行變破裂成小液滴，克服Laplace壓力[23]。本試驗(yàn)首先對(duì)乳化劑、油相比例、溶劑等單因素的篩選確定了三個(gè)對(duì)油樟葉揮發(fā)油水乳劑制備影響最大的因素，即混合乳化劑親水疏水平衡值HLB、乳化劑添加比例和油樟葉揮發(fā)油添加比例。通過(guò)正交試驗(yàn)，篩選得到了20%油樟葉揮發(fā)油水乳劑的最佳制備工藝為：混合乳化劑親水疏水平衡值HLB為12.0、乳化劑添加比例為4%、油樟葉揮發(fā)油添加比例為20%。制備時(shí)應(yīng)在專(zhuān)門(mén)的高能量設(shè)備（即高剪切攪拌器和均質(zhì)器）內(nèi)進(jìn)行，可以保證制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑的穩(wěn)定性和均勻性。

乳液可以分成兩類(lèi)：一類(lèi)是水包油型乳液（以O(shè)/W表示），即外相（或者連續(xù)相）為水，內(nèi)相（或者不連續(xù)相）為油的乳液；另一類(lèi)是油包水性型乳液（以W/O表示），即外相（或者連續(xù)相）為油，內(nèi)相（或者不連續(xù)相）為水的乳液。乳化劑的HLB值得可決定乳化劑的類(lèi)型，即制備O/W型乳劑應(yīng)選用HLB 8～18的乳化劑[24]。本試驗(yàn)旨得到的是O/W型乳劑，試驗(yàn)結(jié)果所篩選出來(lái)的混合乳化劑HLB為12.0，與上述結(jié)論相符合。通過(guò)亞甲藍(lán)和蘇丹-Ⅲ染色試驗(yàn)可知，當(dāng)?shù)渭觼喖姿{(lán)染液至油樟葉揮發(fā)油水乳劑中時(shí)，藍(lán)色染液擴(kuò)散較快；滴加蘇丹-Ⅲ染液至油樟葉揮發(fā)油水乳劑中時(shí)，擴(kuò)散慢，且出現(xiàn)兩者不相溶的情況。通過(guò)電子顯微鏡觀察可知，水溶性亞甲藍(lán)染液在乳劑中分散均勻，多分散在水相；而脂溶性蘇丹-Ⅲ染料分散不均勻，多顆粒狀分布于油相中。綜上可驗(yàn)證，根據(jù)本配方制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑為O/W（水包油）型。根據(jù)該工藝制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，外觀為乳白色不透明的液體，具有一定的黏度和流動(dòng)性，穩(wěn)定性好。

按照國(guó)家藥典規(guī)定成分比例，皮膚外用藥的膏霜等，乳劑的基質(zhì)和輔料，一般添加比例為1%～5%，本試驗(yàn)制備的水乳劑的后期應(yīng)用目標(biāo)也是皮膚外用藥，試驗(yàn)結(jié)果表明，乳化劑添加比例為4%，符合藥典的相關(guān)規(guī)定。同時(shí)，乳劑的物理穩(wěn)定性評(píng)價(jià)也是其質(zhì)量評(píng)價(jià)中比較重要的指標(biāo)。乳劑的物理穩(wěn)定性變化表現(xiàn)為分層、吸油、破乳等現(xiàn)象[25]。主要是以離心前后的物理穩(wěn)定性參數(shù)Ke值變化大小作為判定指標(biāo)，變化大則不穩(wěn)定，反之則穩(wěn)定。本試驗(yàn)得到的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，在一定轉(zhuǎn)速離心一段時(shí)間后，通過(guò)測(cè)定乳劑的物理穩(wěn)定性參數(shù)Ke值，其變化不大，該水乳劑較穩(wěn)定。

本試驗(yàn)選擇的模型藥物為油樟葉揮發(fā)油，對(duì)溫度比較敏感，易揮發(fā)，不穩(wěn)定，在制備是應(yīng)該在室溫下進(jìn)行，以減少油相的損失。通過(guò)該試驗(yàn)制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，可以克服制約油樟葉揮發(fā)油廣泛應(yīng)用的易揮發(fā)、難保存等缺點(diǎn)；制備工藝簡(jiǎn)單，重復(fù)性高；且以水為溶劑，僅含有少量的有機(jī)溶劑，無(wú)毒并對(duì)環(huán)境效益好。符合當(dāng)今中獸藥發(fā)展的趨勢(shì)，使得油樟葉揮發(fā)油在臨床的應(yīng)用上具有很好的推廣前景。

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本試驗(yàn)選擇的模型藥物為油樟葉揮發(fā)油，對(duì)溫度比較敏感，易揮發(fā)，不穩(wěn)定，在制備是應(yīng)該在室溫下進(jìn)行，以減少油相的損失。通過(guò)該試驗(yàn)制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，可以克服制約油樟葉揮發(fā)油廣泛應(yīng)用的易揮發(fā)、難保存等缺點(diǎn)；制備工藝簡(jiǎn)單，重復(fù)性高；且以水為溶劑，僅含有少量的有機(jī)溶劑，無(wú)毒并對(duì)環(huán)境效益好。符合當(dāng)今中獸藥發(fā)展的趨勢(shì)，使得油樟葉揮發(fā)油在臨床的應(yīng)用上具有很好的推廣前景。

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本試驗(yàn)選擇的模型藥物為油樟葉揮發(fā)油，對(duì)溫度比較敏感，易揮發(fā)，不穩(wěn)定，在制備是應(yīng)該在室溫下進(jìn)行，以減少油相的損失。通過(guò)該試驗(yàn)制備的油樟葉揮發(fā)油水乳劑，可以克服制約油樟葉揮發(fā)油廣泛應(yīng)用的易揮發(fā)、難保存等缺點(diǎn)；制備工藝簡(jiǎn)單，重復(fù)性高；且以水為溶劑，僅含有少量的有機(jī)溶劑，無(wú)毒并對(duì)環(huán)境效益好。符合當(dāng)今中獸藥發(fā)展的趨勢(shì)，使得油樟葉揮發(fā)油在臨床的應(yīng)用上具有很好的推廣前景。

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