江永承 譚尚華

（1 廣東德慶縣婦幼保健院，廣東 德慶 526600；2 廣東省肇慶市第一人民醫(yī)院，廣東 肇慶 526040）

新生兒溶血病（HDN）臨床上是指由于母嬰血型不合，胎兒的血液隨母體血液循環(huán)進(jìn)入母體后，導(dǎo)致母體產(chǎn)生相應(yīng)的IgG抗體[1]，產(chǎn)生的IgG抗體歲母體血液循環(huán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)并作用于胎兒的紅細(xì)胞而產(chǎn)生同種被動(dòng)免疫性疾病。HDN可導(dǎo)致因而出現(xiàn)黃疸、水腫、貧血，嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)膽紅素腦病，危及新生兒的生命[2]。HDN嚴(yán)重影響著新生兒的正常生長發(fā)育及生命安全，因此如何有效的進(jìn)行HDN的治療具有重要的意義。臨床診斷是疾病治療的前提，準(zhǔn)確的臨床診斷可有效的提高疾病的治療效果，基于此，筆者進(jìn)行了HDN血清學(xué)檢查的相關(guān)臨床研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2009年6月至2012年3月我院接受分娩的O型血產(chǎn)婦108例，年齡1～30 d，平均年齡（16.4±4.7）d，產(chǎn)婦所產(chǎn)新生兒臨床表現(xiàn)為高膽紅素血癥，疑似HDN，按照新生兒血型不同，依次分為A型血組（A組）和B型血組（B組），其中A型血組新生兒50例，1～10 d新生兒14例，10～20 d新生兒26例，20～30 d新生兒10例，男性新生兒24例，女性新生兒26例；B型血組新生兒58例，1～10 d新生兒22例，10～20 d新生兒22例，20～30 d新生兒14例，男性新生兒30例，女性新生兒28例，兩組新生兒在年齡構(gòu)成比及性別構(gòu)成比方面無顯著性差異（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 檢測儀器

Grifols專用孵育器（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），Dianafuge-232專用離心機(jī)（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），HH.W21-420電熱恒溫（上海悅豐儀器儀表有限公司）。

1.2.2 檢測試劑

Diana-Ge1 Coombs卡（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），1%A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（上海醫(yī)藥生物公司），生理鹽水。

1.2.3 血液樣品的采集

兩組新生兒各取1管血液樣品，使用乙二胺四乙酸作為抗凝劑。

1.2.4 檢查方法

1.2.4.1 直接抗人球蛋白試驗(yàn)

取各組新生兒紅細(xì)胞適量，使用生理鹽水進(jìn)行洗滌，洗滌3次，除去上清液，制備1%紅細(xì)胞懸浮液（取洗滌后紅細(xì)胞5 μL，加入生理鹽水500 μL），于Diana-Ge1 Coombs檢測卡的一個(gè)小孔內(nèi)加入1%紅細(xì)胞懸浮液50 μL，離心9 min，取出，直接觀察結(jié)果。

1.2.4.2 游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)

對Diana-Ge1 Coombs檢測卡的6個(gè)小孔進(jìn)行標(biāo)記，前三個(gè)孔用于游離試驗(yàn)，依次放入A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞50 μL，再各放入患兒血清50 μL。放散試驗(yàn)（ABO血型系統(tǒng)采用熱放散法、Rh血型系統(tǒng)采用醚放散法），參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作[3]，于后三個(gè)小孔依次放入A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞50 μL，再各放入患兒血清50 μL，將Diana-Ge1 Coombs檢測卡置于賦予相中，37 ℃孵育15 min，離心9 min，取出，直接觀察結(jié)果。

表1 ABO血型系統(tǒng)不同血清學(xué)檢查結(jié)果比較

1.2.5 檢查結(jié)果判定

陽性：紅細(xì)胞分布在凝膠中或留在微柱上端；陰性：紅細(xì)胞分布于微柱的底部或出現(xiàn)沉降。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)兩組新生兒的各項(xiàng)檢查指標(biāo)結(jié)果，使用SPSS13.0軟件包進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，以P<0.05作為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的基本檢測標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1 結(jié)果分析

108例疑似HDN的高膽紅素血癥新生兒中，確診為HDN的患兒49例，占45.37%，其中ABO血型系統(tǒng)HDN患兒為45例（91.84%），其中A組21例（42.86%），B組24例（48.98%），Rh血型系統(tǒng)HDN患兒為4例（8.16%）。

2.2 ABO血型系統(tǒng)各項(xiàng)檢查結(jié)果比較

ABO血型系統(tǒng)不同檢查方法的檢查結(jié)果見表1。

3 討 論

現(xiàn)代臨床研究發(fā)現(xiàn)，HDN的起源來自胎兒從父親方面繼承的一部分紅細(xì)胞抗原，由于母親體內(nèi)沒有這些抗原，因此當(dāng)胎兒紅細(xì)胞中的抗原通過血液循環(huán)進(jìn)入母體內(nèi)，母體的免疫系統(tǒng)將會(huì)長生相應(yīng)的抗體IgG，這部分抗體又會(huì)隨著母胎血液循環(huán)進(jìn)入胎兒的體內(nèi)，從而破壞胎兒的紅細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致HDN的發(fā)生。ABO型HDN是臨床上最為常見的新生兒溶血證類型，其主要由于O型血目前血清中的IgG抗體抗A(B)效價(jià)較B型血清中的抗A和A型血清中的抗B效價(jià)高[4]，從而導(dǎo)致ABO血型系統(tǒng)HDN的母親多為O型血，本次臨床研究發(fā)現(xiàn)，ABO血型系統(tǒng)HDN患兒占91.84%，明顯高于Rh血型，與臨床報(bào)道一致；HDN的檢查方法中，直接抗人球蛋白試驗(yàn)主要用于檢查患兒的紅細(xì)胞是否收到抗體致敏，而游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)主要檢測胎兒新生兒體內(nèi)IgG抗體存在的與否，其中直接抗人球蛋白試驗(yàn)在HDN的檢查中具有重要作用，其可區(qū)分HDN是ABO血液系統(tǒng)還是Rh血液系統(tǒng)，這是因?yàn)锳BO血型系統(tǒng)所致的HDN對直接抗人球蛋白試驗(yàn)強(qiáng)度很弱，僅有強(qiáng)ABO血型系統(tǒng)所致的HDN導(dǎo)致直接抗人球蛋白試驗(yàn)呈弱陽性，而其他血液系統(tǒng)，尤其是Rh血型系統(tǒng)HDN對直接抗人球蛋白試驗(yàn)強(qiáng)度通常超過“+”，本次臨床研究中，4例Rh型HDN患兒的直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果均為“++++”，同時(shí)，通常直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果越強(qiáng)，患兒的HDN越嚴(yán)重。本次臨床研究中通過對不同血型新生兒進(jìn)行游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，放散試驗(yàn)對于ABO血型系統(tǒng)HDN的檢測靈敏度優(yōu)于游離試驗(yàn)。

總之，母嬰血型不合的HDN主要發(fā)生于ABO血型系統(tǒng)，放散試驗(yàn)對ABO血型新生兒溶血病的檢查敏感度最高，直接抗人球蛋白試驗(yàn)對Rh血型新生兒溶血病檢查檢查敏感度最高，可作為判定HDN的臨床診斷依據(jù)。

[1]謝世榮,張興明.凝聚胺技術(shù)在產(chǎn)前血型抗體及新生兒溶血病檢查中的應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(4):218-219.

[2]孫六娜.108例新生兒溶血病患兒血清學(xué)檢測結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(21):2718-2719.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:256-257.

[4]劉孟黎,張艷,劉晟,等.新生兒溶血病患兒母親血清中IgG 亞類水平的臨床意義[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2006,22(4): 498-499.