陳彥婷等

[摘要] 目的 探討中期因子（midkine，MK）在卵巢上皮腫瘤中的表達及與其臨床病理特征的關(guān)系。方法 采用雙抗體夾心法（ELISA）檢測50例上皮性卵巢癌、50例良性上皮性卵巢腫瘤及40例正常女性血清MK濃度。 結(jié)果 卵巢癌組血清MK含量明顯高于卵巢良性腫瘤組與正常對照組的血清MK含量（P<0.05），而卵巢良性腫瘤組與正常對照組的血清MK含量接近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；隨著臨床分期的提高，血清MK值逐漸增高；MK表達與腫瘤病理類型無相關(guān)性（P>0.05）；隨著病理分級的提高，血清MK值逐漸增高。 結(jié)論 卵巢癌患者血清MK含量明顯高于卵巢良性腫瘤和正常人群，并與TNM分期和病理分級成正相關(guān)，MK可作為1種有價值的腫瘤標志物。

[關(guān)鍵詞] 中期因子；卵巢上皮性腫瘤；ELISA法

[中圖分類號] R737 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）01（a）-0015-03

The Expression of Midkine in Epithelial Ovarian Tumor Detected by ELISA and Its Relationship with Clinicopathological Characteristics

CHEN Yanting XU Qing* CHEN Yan YE Ninghe LUO Xiaojie CHEN Xi LIU Qingqing

Nanjing Maternity and Child Health Care Hospital of Nanjing Medical University， Nanjing， 210004， Jiangsu Province， China

[Abstract] Objective To investigate the expression of midkine （MK） in epithelial ovarian tumor and its relationship with clinicopathological characteristics. Methods The double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to measure MK levels in 50 patients with epithelial ovarian carcinoma， 50 cases of epithelial ovarian carcinoid and 40 normal women. Results The serum MK concentrations in ovarian carcinoma group were significantly higher than those of ovarian carcinoid group and those of normal control group （P<0.05）， while serum MK concentrations of the ovarian carcinoid group were close to those of normal control group with no significant difference （P>0.05）. The serum MK levels increased gradually with the clinical staging while there was no correlation between the MK expression and the tumor pathological types （P>0.05）； The serum MK levels increased gradually with the increasing of pathological staging. Conclusion The serum MK contents in ovarian carcinoma patients were higher than those of ovarian carcinoid and normal ones， and which were positively correlated with TNM staging and pathological grading. The MK could be used as a valuable tumor marker.

[Key words] Midkine； Epithelial ovarian tumor； ELISA

中期因子（Midkine，MK）是一種肝素結(jié)合性生長因子，由于其在小鼠妊娠中期廣泛表達，出生后只在腎臟中有表達，因此被命名為中期因子。目前發(fā)現(xiàn)，MK還可能參與腫瘤的生長和血管生成的調(diào)節(jié)[1]，在多種腫瘤組織中出現(xiàn)高表達，在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。我們采用ELISA法檢測50例上皮性卵巢癌，50例良性上皮性卵巢腫瘤及40正常女性血清MK濃度。該院2007年6月—2011年6月期間探討中期因子（midkine，MK）在卵巢上皮腫瘤中的表達及與其臨床病理特征的關(guān)系現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取該院婦科手術(shù)治療并經(jīng)病理檢查確診的上皮性卵巢癌患者血清50例，年齡（45.67±8.90）歲。采用國際婦、產(chǎn)科聯(lián)合會（FIGO）2000年制定的標準進行腫瘤分期：I期10例、Ⅱ期12例、Ⅲ期20例、Ⅳ期8例，所有病人無其他器官腫瘤病史，術(shù)前3個月內(nèi)均未應(yīng)用任何激素治療，未行化療或放療。以上病例采血時均非月經(jīng)期，并已排除血小板異常、血栓性疾病、其他內(nèi)分泌疾病及其他器官腫瘤病史。根據(jù)WHO分類標準進行組織學(xué)分型，其中漿液性囊腺癌36例、粘液性囊腺癌14例，分化程度中高分化29例、中分化10例，低分化11例。良性上皮性卵巢腫瘤患者血清50例，年齡（43.10±5.23）歲。其中漿液性囊腺瘤34例、粘液性囊腺瘤16例。對照組40例，均為健康體檢者，年齡（44.46±5.91）歲。所有對象均了解并同意進行這項研究。

1.2 標本采集及測定

所有研究對象均空腹12 h后于晨間采靜脈血5 mL，迅速分離血清并置于80℃冰箱中凍存。雙抗體夾心法（ELISA）檢測血清中MK水平。操作步驟嚴格按試劑盒（R&D;）說明書進行。

1.3 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS16.0軟件進行分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示。計量資料比較采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 正常人、卵巢良性疾病及卵巢癌患者血清MK值

卵巢癌患者血清MK含量平均為（140.82±21.81）pg/mL；卵巢良性腫瘤組MK含量平均為（48.02±8.82）pg/mL；正常對照組血清MK含量平均為（44.59±12.03）pg/mL；卵巢癌組血清MK含量明顯高于卵巢良性腫瘤組與正常對照組的血清MK含量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而卵巢良性腫瘤組與正常對照組的血清MK含量接近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

表1 正常人、卵巢良性疾病及卵巢癌患者血清MK水平（x±s）

注：*P>0.05，**P<0.05與正常對照組比較；△P<0.05與卵巢良性腫瘤組比較。

2.2 卵巢癌患者血清MK含量與臨床分期的關(guān)系

卵巢癌患者血清MK含量I期為（60.32±4.67）pg/mL，Ⅱ期為（97.50±8.98）pg/mL，Ⅲ期為（138.22±10.82）pg/mL，Ⅳ期血清MK含量平均為（150±16.49）pg/mL，隨著臨床分期的提高，血清MK值逐漸增高。

2.3 卵巢癌患者血清MK含量與病理組織分型的關(guān)系

漿液性卵巢癌患者血清MK含量為（130.23±10.49）pg/mL，粘液性卵巢癌患者血清MK含量為（135.23±12.92）pg/mL，兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

2.4 卵巢癌患者血清MK含量與病理分級的關(guān)系

卵巢癌患者血清MK含量高分化為（88.19±8.57）pg/mL，中分化為（100.30±11.78）pg/mL，低分化為（141.72±13.90）pg/mL，隨著病理分級的提高，血清MK值逐漸增高。同時，隨著患者FIGO分期的加重，患者的血清MK水平也在不斷的升高；漿液性患者的血清MK含量和粘液性患者的血清MK含量之間的差異不顯著，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。詳見表2。

表2 血清MK值與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系（x±s）

3 討論

卵巢癌是目前女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一[2]，且患者有年輕化趨勢。卵巢癌中上皮性癌是最常見的類型，占卵巢原發(fā)性惡性腫瘤的85%～90%[3]，由于其發(fā)病隱匿，易于腹腔內(nèi)播散轉(zhuǎn)移，多數(shù)患者有明顯癥狀時通常已是疾病晚期，喪失了許多治療機會，給個人及家庭帶來巨大痛苦。而早期治療和晚期治療的生存率有顯著的區(qū)別[4]。目前較為常用的卵巢癌標志物為糖類抗原CA125，但是由于其特異性差，令其在臨床運用中受到了不少限制，尋找更多的敏感和特異的卵巢標志物成為婦科學(xué)界研究的熱點。

中期因子胚胎期在組織中廣泛分布，出生后其表達降低，僅限于某些特定的部位如腎臟和小腸上皮。然而.在腫瘤發(fā)生過程中，MK的表達增強。MK能促進細胞存活和細胞遷移并與腫瘤的侵襲、炎性疾病的發(fā)生及受損細胞的保護和修復(fù)密切相關(guān)。MK也被期待成為一種阻止細胞凋亡的治療手段。與此同時，MK已成為惡性腫瘤和炎性疾病治療中頗具前景的分子靶點并已成為一種新的腫瘤標記物[5]。MK作為一種分泌型蛋白，當(dāng)MK在腫瘤組織中高表達，血清MK的水平亦升高。近期研究表明，血清MK的水平在多種腫瘤患者中升高，并與腫癌的侵襲性相關(guān)，包括食道癌[6]、結(jié)直腸癌[7]和肝癌[8]等。但很少有文獻報道卵巢癌患者血清MK的水平。

目前，隨著時代的進步和醫(yī)學(xué)的發(fā)展，尤其是現(xiàn)代醫(yī)療檢查設(shè)備的優(yōu)化、創(chuàng)新和應(yīng)用，MK家族血清檢測已經(jīng)在不斷的發(fā)展過程中逐漸成為研究的熱點和難點，酶聯(lián)免疫吸附試驗表明，某些惡性腫瘤患者血清中MK水平已經(jīng)遠遠超過了臨界值。該文采用ELISA法研究了卵巢癌血清MK水平，發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清MK含量明顯高于卵巢良性腫瘤和正常人群，并與TNM分期和病理分級成正相關(guān)，與其他腫瘤的結(jié)論一致[7]，有助于卵巢癌的早期發(fā)現(xiàn)。隨著病程的進展，血清MK濃度亦升高，并可能促進腫瘤的侵襲性，其機制可能是腫瘤組織中的MK蛋白分泌MK進人細胞間液再人血，血清MK再通過腫瘤細胞膜的MK受體及相應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方式反作用于腫瘤細胞，這種可能機制還需要相關(guān)的研究證實。國外學(xué)者研究食道癌病人血清MK值變化，發(fā)現(xiàn)術(shù)后4周血清MK值明顯下降，在他們觀察的39例復(fù)發(fā)病人中，有16例在術(shù)后6個月血清MK值升高，而此時臨床尚未發(fā)現(xiàn)有復(fù)發(fā)[9]。因此，MK可能作為術(shù)后療效判斷及隨訪的指標。為今后的進一步研究提供了理論基礎(chǔ)。

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（收稿日期：2013-11-11）