李春曉 董言德 鄧 兵 趙彤言*

(1. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所，病原微生物生物安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100071； 2. 北京軍區(qū)疾病預(yù)防控制中心，北京 100042)

登革熱和登革出血熱是全球范圍內(nèi)的重要傳染病之一，主要由埃及伊蚊Aedesaegypti和白紋伊蚊Ae.albopictus傳播，由于目前沒(méi)有預(yù)防登革熱有效的疫苗，對(duì)這種傳染病的控制還是主要依賴(lài)于對(duì)其傳播媒介的控制。多年來(lái)，研究者們不斷研究對(duì)其的防治方法。

埃及伊蚊和白紋伊蚊都是容器型孳生的蚊蟲(chóng)類(lèi)型，人們利用其行為特點(diǎn)，研制出誘卵杯，引誘其產(chǎn)卵，并作為種群監(jiān)測(cè)的方法之一(林立豐等，2005)。隨后，研究人員在誘卵杯中加入殺蟲(chóng)劑，研制出致死性誘卵杯，殺滅接觸殺蟲(chóng)劑的待產(chǎn)卵雌蚊，同時(shí)抑制蚊蟲(chóng)產(chǎn)卵和孵化。通過(guò)在不同國(guó)家和地區(qū)的現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，已證實(shí)將多種類(lèi)型的擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑應(yīng)用于致死性誘卵杯中，對(duì)于防治埃及伊蚊都有很好的作用(Zeichneretal.，1999；Perichetal.，2003；Sithiprasasnaetal.，2003；Williamsetal.，2007；Rapleyetal.，2009；Ritchieetal.，2009)。

在全球范圍內(nèi)，埃及伊蚊是登革熱和登革出血熱的主要傳播媒介，然而，在中國(guó)，尤其是在內(nèi)陸地區(qū)，白紋伊蚊才是登革熱的重點(diǎn)防控對(duì)象(龔道方等，2009)。致死性誘卵杯應(yīng)用于防治埃及伊蚊取得了很好的結(jié)果，但是對(duì)于白紋伊蚊，尤其是中國(guó)地區(qū)的白紋伊蚊防治效果目前還沒(méi)有相關(guān)研究。本研究研制成緩釋型溴氰菊酯致死性誘卵杯，將其應(yīng)用于白紋伊蚊孳生地，通過(guò)觀察白紋伊蚊產(chǎn)卵率、幼蟲(chóng)孵化率和成蚊密度降低率，證明了致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊的防控效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地

選擇北京西山腳下兩個(gè)環(huán)境相似的居民院，院中植被豐富，多為低矮灌木和草地，兩個(gè)居民院相距500 m以上。一個(gè)居民院作為實(shí)驗(yàn)區(qū)，在院中不同地點(diǎn)放置75個(gè)致死性誘卵杯，放置位置都是隱蔽的角落，每個(gè)地點(diǎn)相隔10 m以上；一個(gè)居民院作為對(duì)照區(qū)，不進(jìn)行任何防治措施。

1.2 實(shí)驗(yàn)蚊蟲(chóng)

居民院院內(nèi)及周?chē)苌椭脖恢袟⒌陌准y伊蚊，觀察對(duì)象包括卵、幼蟲(chóng)、蛹和成蟲(chóng)各個(gè)蟲(chóng)態(tài)。

1.3 主要試劑與實(shí)驗(yàn)材料

溴氰菊酯(>99.0%，Sigma)、吸水性樹(shù)脂(200目，巴斯夫)、純凈水、誘卵杯、壓舌棒。

1.4 致死性誘卵杯的制備

將溴氰菊酯、吸水性樹(shù)脂和純凈水按照1.25%、2.00%和96.75%的質(zhì)量百分比混合在一起，待其充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?，分別稱(chēng)取1 g，用紗布包好，放置于黑色陶瓷誘卵杯的底部，誘卵杯杯高12 cm，杯口直徑8 cm。加水至離杯口2 cm處，每個(gè)誘卵杯中放入一支壓舌棒作為卵卡。每次觀察時(shí)，誘卵杯中水位位于杯中一半以上為判斷為有效數(shù)據(jù)，如果誘卵杯中水被打翻，或者誘卵杯破壞等情況，則視為無(wú)效數(shù)據(jù)。

1.5 致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊產(chǎn)卵和幼蟲(chóng)孵化的效果觀察

分別于使用致死性誘卵杯前7 d、使用后10、17、24、30和45 d時(shí)觀察誘卵杯中是否有幼蟲(chóng)孳生并收集卵卡。將卵卡收集帶回實(shí)驗(yàn)室后，首先在解剖鏡下觀察卵卡上的產(chǎn)卵數(shù)；然后將帶回的卵卡放入純凈水中觀察卵是否可孵化，根據(jù)所有孵出的幼蟲(chóng)數(shù)，計(jì)算幼蟲(chóng)孵化率。計(jì)算公式為：幼蟲(chóng)孵化率(%)=(收集卵卡時(shí)誘卵杯中幼蟲(chóng)數(shù)+卵卡在實(shí)驗(yàn)室孵化的幼蟲(chóng)數(shù))×100%/卵卡上的卵數(shù)量。

1.6 致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊成蚊密度的影響觀察

分別于使用致死性誘卵杯前7 d、使用后10、30和45 d時(shí)，應(yīng)用人誘法對(duì)實(shí)驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)的白紋伊蚊進(jìn)行成蚊密度監(jiān)測(cè)。實(shí)驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)分別設(shè)置3個(gè)人，監(jiān)測(cè)時(shí)間為傍晚17:00～17:30。監(jiān)測(cè)時(shí)，監(jiān)測(cè)人裸露右腿小腿，使用電動(dòng)吸蚊器，捕獲監(jiān)測(cè)時(shí)間段內(nèi)停落在腳踝和膝蓋之間部位上的白紋伊蚊雌蚊。

將采集的蚊蟲(chóng)取平均值后，根據(jù)對(duì)照區(qū)的數(shù)據(jù)換算實(shí)驗(yàn)區(qū)使用致死性誘卵杯后的蚊蟲(chóng)的相對(duì)密度指數(shù)和密度下降率。相關(guān)計(jì)算公式如下：相對(duì)密度指數(shù)(RPI)=(對(duì)照區(qū)處理前密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理后密度)/(對(duì)照區(qū)處理后密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理前密度)；密度下降率(%)=(1-RPI)×100%。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件包處理，用實(shí)驗(yàn)分析數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan進(jìn)行兩兩比較。

2 結(jié)果

2.1 致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊產(chǎn)卵和幼蟲(chóng)孵化的效果

由表1可以看出，使用致死性誘卵杯后，白紋伊蚊在誘卵杯中的產(chǎn)卵數(shù)降低了約3/4的數(shù)量，而且在45 d內(nèi)杯中都沒(méi)有孳生幼蟲(chóng)，即便是將卵卡帶回實(shí)驗(yàn)室，放入純凈水中進(jìn)行飼養(yǎng)，幼蟲(chóng)的孵化率仍然低于60%，說(shuō)明致死性誘卵杯中的殺蟲(chóng)劑在45 d的過(guò)程中不斷緩慢釋放，抑制了白紋伊蚊的產(chǎn)卵和孵化。

2.2 致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊成蚊密度的影響

由表2可以看出，使用致死性誘卵杯后，雖然實(shí)驗(yàn)區(qū)的白紋伊蚊成蚊密度在絕對(duì)值上沒(méi)有明顯下降，但是對(duì)比對(duì)照區(qū)不斷上升的成蚊密度，實(shí)驗(yàn)區(qū)的成蚊密度下降率顯著升高(P<0.05)，10 d后下降率達(dá)到了42.6%，30 d后超過(guò)了50%，45 d后達(dá)到了66.6%的下降率。

3 討論

由本研究可以看出，使用致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊進(jìn)行防治可以取得一定的效果，在使用45 d后，仍然可以抑制蚊蟲(chóng)在其中產(chǎn)卵，而且沒(méi)有幼蟲(chóng)在誘卵杯中孵化，即使將卵卡帶回實(shí)驗(yàn)室，孵化率仍然很低，說(shuō)明致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊的產(chǎn)卵具有非常好的抑制作用。同時(shí)，通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)的成蚊密度進(jìn)行監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示，對(duì)比對(duì)照區(qū)，實(shí)驗(yàn)區(qū)的成蚊密度下降率在誘卵杯的使用過(guò)程中逐漸上升，在使用45 d后，實(shí)驗(yàn)區(qū)的成蚊密度下降率已達(dá)到66.6%，說(shuō)明致死性誘卵杯的使用對(duì)于成蚊密度的上升是有一定的抑制作用的，本次實(shí)驗(yàn)是在白紋伊蚊密度上升期間開(kāi)始，如果致死性誘卵杯在更早時(shí)間使用，白紋伊蚊種群密度尚未上升，應(yīng)該有更好的防控效果。

以往的研究發(fā)現(xiàn)，使用溴氰菊酯等擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑制成致死性誘卵杯，在對(duì)埃及伊蚊的現(xiàn)場(chǎng)防控中有很好的作用，一般使用的都是乳油、懸浮劑、可濕性粉劑、可濕性粒劑等商品化的殺蟲(chóng)劑劑型(Zeichneretal.，1999；Perichetal.，2003)，具有使用方便、快捷的優(yōu)點(diǎn)，但是效果難以持久，在使用過(guò)程中往往要再次添加。本實(shí)驗(yàn)首次嘗試配置緩釋型溴氰菊酯制劑，利用高吸水性樹(shù)脂的吸水性和緩釋效果，制成顆粒劑，置于誘卵杯底部，在一定時(shí)間內(nèi)緩慢釋放溴氰菊酯殺蟲(chóng)劑，在實(shí)驗(yàn)的45 d內(nèi)沒(méi)有進(jìn)行殺蟲(chóng)劑的更換，仍然對(duì)白紋伊蚊孳生有很好的防控效果，不僅抑制了白紋伊蚊幼蟲(chóng)在誘卵杯中的孳生，而且在使用后可有效降低成蚊的密度。說(shuō)明這種殺蟲(chóng)劑劑型適用于制成致死性誘卵杯用于白紋伊蚊的防控，這是一次有益的嘗試，為未來(lái)白紋伊蚊致死性誘卵杯的研究設(shè)計(jì)提供了思路。

表1 致死性誘卵杯使用前后白紋伊蚊產(chǎn)卵數(shù)和幼蟲(chóng)孵化率Tab.1 Number of egg laying and hatching before and after treatment

注：同行數(shù)據(jù)后標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，相同字母表示差異無(wú)顯著性(P>0.05)。以下表中字母意義相同。Within each line, values followed by the different letter are significantly different (P<0.05). The same below.

*有效杯數(shù)：誘卵杯中水位位于杯中一半以上為判斷為有效數(shù)據(jù)，如果誘卵杯中水被打翻，或者誘卵杯破壞等情況，則視為無(wú)效數(shù)據(jù)。No. of the positive ovitrap: The ovitrap containing 1/2 cup of water was positive. Whereas, if the ovitrap was spilled out or broken, the data was negative.

**孵化幼蟲(chóng)總數(shù)=杯中孳生幼蟲(chóng)數(shù)+帶回實(shí)驗(yàn)室后放入純凈水中孵化的幼蟲(chóng)數(shù)。No. of the larva hatching: the number of larva laying in ovitrap + the number of larva hatching in the lab.

表2 致死性誘卵杯使用前后實(shí)驗(yàn)區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)的白紋伊蚊成蚊密度Tab.2 Adult density of Ae. albopictus in the experimental site and control site before and after treatment

注：成蚊相對(duì)密度指數(shù)(RPI)=(對(duì)照區(qū)處理前密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理后密度)/(對(duì)照區(qū)處理后密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理前密度)；成蚊密度下降率(%)=(1-RPI)×100%。RP I=(Adult density of the control site before treatment ×Adult density of the experimental site after treatment) / (Adult density of the control site after treatment ×Adult density of the experimental site before treatment); Decreasing rate of adult (%)=(1-RPI) ×100%.

從本次實(shí)驗(yàn)的現(xiàn)場(chǎng)結(jié)果來(lái)看，雖然單獨(dú)使用致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊進(jìn)行防治見(jiàn)效比較慢，不及孳生地處理和超低容量噴灑的防治效果快速，但是致死性誘卵杯是主要針對(duì)白紋伊蚊待產(chǎn)卵雌蚊進(jìn)行治理，通過(guò)人為的增加白紋伊蚊產(chǎn)卵的容器，減少白紋伊蚊在其他容器中產(chǎn)卵的可能性，是一種長(zhǎng)期防控的可行措施。從獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，致死性誘卵杯對(duì)白紋伊蚊的產(chǎn)卵抑制的效果是比較明顯的。因此，在完成孳生地處理和超低容量噴灑殺蟲(chóng)劑處理成蚊等防治措施之后，使用該方法來(lái)進(jìn)一步鞏固防治效果，仍然可以作為白紋伊蚊綜合防治中的重要措施。