黃瑛

[摘要] 目的 探討氯沙坦對(duì)老年冠心病患者內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）的動(dòng)員作用及改善血管內(nèi)皮功能的機(jī)制。方法 選取老年冠心病患者65例，隨機(jī)分為對(duì)照組 32例 和觀察組 33例 ，分別給予常規(guī)藥物和常規(guī)藥物+氯沙坦治療，檢測(cè)治療前后血EPCs及NO和內(nèi)皮素-1（ET-1）。 結(jié)果 治療后觀察組EPCs及NO水平高于對(duì)照組（P<0.05），ET-1明顯低于對(duì)照組（P<0.01）。觀察組氯沙坦治療后EPCs與NO呈現(xiàn)正相關(guān)（r=0.421， P=0.014），與ET-1呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)（r=-0.398， P=0.021）。結(jié)論 氯沙坦能夠改善老年冠心病患者內(nèi)皮功能，其作用機(jī)制可能是通過對(duì)EPCs的動(dòng)員作用而發(fā)揮功能。

[關(guān)鍵詞] 氯沙坦；內(nèi)皮祖細(xì)胞；冠心??；內(nèi)皮功能；一氧化氮

[中圖分類號(hào)] R541.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）27-0030-03

[Abstract] Objective To study effects of losartan on the mobilization of EPCs and its mechanism of improving endothelial function in elderly patients with coronary heart disease. Methods A total of 65 elderly patients with coronary heart disease were randomly divided into control group （32 cases） and observation group （33 cases）， the former were given conventional medicine and the latter conventional medicine with losartan. The EPCs ， NO and endothelin-1（ET-1） were detected before and after treatment. Results There was no difference between the two groups before treatment in general information （P<0.05）； After treatment， EPCs and NO in observation group were statistically higher than that in the control group（P<0.05）， but ET-1 was significantly lower than the control group（P<0.01）. EPCs and NO were positively correlated in observation group（r=0.421， P=0.014）； EPCs and ET-1 showed a significant negative correlation （r=-0.398， P=0.021）. Conclusion Losartan can improve the function of vascular endothelial in elderly patients with coronary heart disease， and it may be achieve this goal through the mobilization of EPCs.

[Key words] Losartan； Endothelial progenitor cells； Coronary heart disease； Endothelial function； Nitric oxide

冠心病是由于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化致冠脈狹窄、阻塞致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病，損傷應(yīng)答學(xué)說認(rèn)為內(nèi)皮細(xì)胞的損傷是其發(fā)病的始動(dòng)環(huán)節(jié)。冠心病在老年人中發(fā)病率特別高，這與老年人血管老化、內(nèi)皮功能減退有關(guān)。近年來國內(nèi)外研究表明，由骨髓釋放入外周的循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cells，EPCs）可以自我更新、增殖、遷移、黏附于受損內(nèi)皮處并分化為成熟的內(nèi)皮細(xì)胞，從而修復(fù)損傷的血管內(nèi)皮。冠心病患者外周血液中EPCs不僅數(shù)量減少，同時(shí)伴有增殖及分化成熟功能的減退[1]，鑒于EPCs的重要作用，針對(duì)EPCs水平和功能的調(diào)控成為冠心病藥物治療的新靶點(diǎn)[2]。研究證實(shí)，血管緊張素Ⅱ受體（AT1受體）拮抗藥ARB不僅具有舒張血管、降血壓、防治心血管重構(gòu)，還具有獨(dú)立于此之外的改善內(nèi)皮功能的作用[3]，但目前對(duì)于其作用機(jī)制的闡釋還不確切?；诖宋覀冞x擇了ARB類藥物氯沙坦，研究氯沙坦對(duì)老年冠心病患者EPCs的動(dòng)員作用，探討其改善血管內(nèi)皮功能的可能機(jī)制。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選取2011年1月～2014年1月在我院接受治療同時(shí)經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影明確診斷為冠心病的老年患者65例作為研究對(duì)象，年齡 60～75歲 ；所有入選患者近2個(gè)月未發(fā)生急性心梗；無合并嚴(yán)重肝腎功能障礙及腦梗死等腦血管意外；無合并糖尿病及服用降糖藥物；無合并難以控制的高血壓及瓣膜性心臟病等。所有患者臨床資料完整，隨機(jī)分為兩組，一組給予常規(guī)藥物治療作為對(duì)照組32例，另一組給予常規(guī)藥物加+氯沙坦治療，作為觀察組33例。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

1.2定義及標(biāo)準(zhǔn)

冠心病的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2001年美國心臟病協(xié)會(huì)制定的AHA/ACC指南[4，15]：①有心肌缺血的典型心絞痛病史，心電圖存在缺血性改變的表現(xiàn)； ②冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)存在狹窄病變。對(duì)照組常規(guī)治療藥物口服拜阿司匹林100 mg qd；單硝酸異山梨酯片20 mg bid；阿托伐他汀20 mg睡前1次；鹽酸曲美他嗪20 mg tid，觀察組除上述藥物外加服氯沙坦50 mg qd，服藥時(shí)間為3個(gè)月。氯沙坦采用默沙東公司產(chǎn)氯沙坦鉀片（科素亞，批號(hào)國藥準(zhǔn)字H20000371）。endprint

外周血EPCs的檢測(cè)采用流式細(xì)胞術(shù)。內(nèi)皮功能的評(píng)價(jià)采用血清NO和內(nèi)皮素-1（ET-1）兩項(xiàng)指標(biāo)。其中NO采用化學(xué)比色法測(cè)定，ET-1采用放射免疫法 （以上相關(guān)試劑均由武漢生物技術(shù)有限公司提供，嚴(yán)格按照說明書操作）。治療前后分別于清晨空腹抽取靜脈血用于上述指標(biāo)的檢測(cè)。

1.3觀察指標(biāo)

比較觀察組和對(duì)照組一般臨床資料（包括兩組受試者治療前血清EPCs、NO和ET-1水平）； 受試者治療后血清EPCs水平； 受試者治療后NO和ET-1水平； 觀察組治療后的EPCs水平與NO和ET-1的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，率的比較使用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1治療后兩組受試者EPCs、 NO、ET-1的比較

兩組受試者治療后觀察組EPCs值顯著高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.01）；治療后觀察組NO明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.05）；治療后觀察組ET-1明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.01），見表2。

3討論

隨著人們生活水平的提高以及診療水平的不斷進(jìn)步，老年患者冠心病的發(fā)病率逐年增加，越來越受到關(guān)注。在冠心病的發(fā)病過程中，內(nèi)皮功能的損傷被認(rèn)為在其發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮了關(guān)鍵的作用，因而內(nèi)皮功能的檢測(cè)具有重要的意義。本研究選擇血清NO和ET-1兩項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)內(nèi)皮功能。NO和ET-1都由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌，NO作為血管內(nèi)皮細(xì)胞舒張因子，對(duì)于血管舒張，調(diào)節(jié)血壓具有重要的作用，其生成減少與冠心病密切相關(guān)。ET-1是目前已知的最強(qiáng)的血管收縮因子，當(dāng)內(nèi)皮功能減退時(shí)，血液中NO水平相應(yīng)降低，而ET-1水平則相應(yīng)升高。對(duì)于NO和ET-1目前已有深入的研究，檢測(cè)方法成熟可靠，所以本研究選擇這兩種方法作為評(píng)估內(nèi)皮功能的指標(biāo)[5， 6]。

循環(huán)血液中的內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）來源于骨髓中的干細(xì)胞巢，靜止?fàn)顟B(tài)下骨髓干細(xì)胞巢中的造血干細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞通過整聯(lián)蛋白連接，在后者的誘導(dǎo)下發(fā)生增殖、分化出EPCs前體細(xì)胞。當(dāng)收到外界環(huán)境如炎癥、氧化應(yīng)激等刺激時(shí)，EPCs前體細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞分離，通過循環(huán)血液到達(dá)相應(yīng)的作用部位，這一系列過程稱為EPCs的動(dòng)員[7]。在冠心病發(fā)病過程中，內(nèi)皮細(xì)胞功能受損，啟動(dòng)EPCs的動(dòng)員。但是老年患者隨著年齡增長(zhǎng)，骨髓造血功能逐漸衰退，EPCs動(dòng)員過程變得更為困難，而內(nèi)皮功能的修復(fù)難度也相應(yīng)增大。因此改善內(nèi)皮功能、動(dòng)員EPCs 成為治療老年患者冠心病新的切入點(diǎn)[8]。血管緊張素Ⅱ受體（AT1受體）拮抗藥（ARB）具有獨(dú)立的改善內(nèi)皮功能的作用，但目前對(duì)于其作用機(jī)制的闡釋還不確切，我們選擇了ARB類藥物氯沙坦[9]，研究氯沙坦對(duì)老年冠心病患者EPCs動(dòng)員及對(duì)內(nèi)皮功能的改善作用，探討其改善血管內(nèi)皮功能的可能機(jī)制。

本研究發(fā)現(xiàn)，在基線水平觀察組與對(duì)照組EPCs與代表內(nèi)皮功能的NO和ET-1等指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后觀察組EPCs水平較對(duì)照組明顯增高。阿司匹林及他汀類藥物對(duì)EPCs也存在影響，在常規(guī)治療藥物中同時(shí)服用這兩類藥物，我們?cè)O(shè)置了對(duì)照組以排除干擾，觀察組較對(duì)照組EPCs改善更為明顯提示氯沙坦能有效的啟動(dòng)EPCs的動(dòng)員過程，提高循環(huán)血液中的EPCs數(shù)量，EPCs可以分化為內(nèi)皮細(xì)胞參與內(nèi)皮功能的修復(fù)。治療后觀察組NO明顯高于對(duì)照組，ET-1明顯低于對(duì)照組，提示氯沙坦治療能明顯改善內(nèi)皮功能。觀察組冠心病患者氯沙坦治療后EPCs水平與NO變化呈現(xiàn)顯著正相關(guān)，與ET-1呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)，因此我們推斷氯沙坦能夠通過對(duì)EPCs的動(dòng)員起到改善內(nèi)皮功能的作用，這與國外某些研究結(jié)論相一致[10-12]。Matsuura K等[2]研究認(rèn)為，血管緊張素Ⅱ加速內(nèi)皮功能障礙及動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展，外周血中骨髓來源的EPCs有助于血管修復(fù)和血管生成，但高血壓及糖尿病會(huì)抑制EPCs的內(nèi)源性修復(fù)，加速粥樣硬化的發(fā)展。外周血中EPCs的數(shù)量與心血管事件的發(fā)生及死亡率呈負(fù)相關(guān)。血管緊張素Ⅱ在氧化應(yīng)激、炎癥、胰島素抵抗等因素介導(dǎo)下能夠?qū)е翬PCs功能障礙，因此，以氯沙坦為代表的血管緊張素Ⅱ受體（AT1受體）拮抗藥ARB能夠成為增強(qiáng)EPCs功能的新的治療靶點(diǎn)。

研究顯示，炎癥以及氧化應(yīng)激等眾多因素都能夠?qū)PCs的動(dòng)員產(chǎn)生影響。炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）等諸多炎癥因子能夠刺激EPCs的動(dòng)員，促進(jìn)EPCs向內(nèi)皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及新生血管的生成。氧化應(yīng)激狀態(tài)下，提別是冠心病等長(zhǎng)期持續(xù)性刺激下活性氧類物質(zhì)通過減弱抗氧化酶的作用，以及過度的炎癥刺激可降低EPCs的增殖、分化能力并加快EPCs的耗竭[13]。ARB類藥物可以阻斷血管緊張素Ⅱ受體介導(dǎo)的炎癥和氧化應(yīng)激等刺激，從而改善EPCs動(dòng)員，間接提高內(nèi)皮功能[14，15]。

綜上所述，我們的研究結(jié)果證實(shí)了氯沙坦在提高老年冠心病患者EPCs動(dòng)員、改善內(nèi)皮功能方面的作用，為氯沙坦在冠心病的治療提供了新的理論依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 白小涓. 內(nèi)皮祖細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊中的作用[J]. 中國動(dòng)脈硬化雜志， 2011，（7）：543-546.

[2] Matsuura K， Hagiwara N. The pleiotropic effects of ARB in vascular endothelial progenitor cells[J]. Curr Vasc Pharmacol， 2011，9（2）：153-157.

[3] Yu Y， Wang Y， Zhou LN， et al. ARB treatment prevents the decrease in endothelial progenitor cells and the loss of renal microvasculature in remnant kidney[J]. Am J Nephrol， 2011，33（6）：550-557.endprint

[4] Smith SC Jr， Blair SN， Bonow RO， et al. AHA/ACC Scientific Statement： AHA/ACC guidelines for preventin heart attack and death in patients with atherosclerotic cardiovascular disease： 2001 update： A statement for healthcare professionals from the American Heart Association and the American College of Cardiology[J]. Circulation， 2001，104（13）：1577-1579.

[5] Lemarie CA， Shbat L， Marchesi C， et al. Mthfr deficiency induces endothelial progenitor cell senescence via uncoupling of eNOS and downregulation of SIRT1[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2011，300（3）：745-753.

[6] Leung JW， Wong WT， Koon HW， et al. Transgenic mice over-expressing ET-1 in the endothelial cells develop systemichypertension with altered vascular reactivity[J]. PLOS ONE， 2011，6（11）：e26994.

[7] Gao D， Nolan DJ， Mellick AS， et al. Endothelial progenitor cells control the angiogenic switch in mouse lungmetastasis[J]. Science，2008，319（5860）：195-198.

[8] Jialal I， Devaraj S， Singh U， et al. Decreased number and impaired functionality of endothelial progenitor cells insubjects with metabolic syndrome： Implications for increased cardiovascular risk[J]. Atherosclerosis，2010，211（1）：297-302.

[9] Yao EH， Fukuda N， Matsumoto T， et al. Losartan improves the impaired function of endothelial progenitor cells inhypertension via an antioxidant effect[J]. Hypertens Res， 2007，30（11）：1119-1128.

[10] Matsuura K， Hagiwara N. The pleiotropic effects of ARB in vascular endothelial progenitor cells[J]. Curr Vasc Pharmacol， 2011，9（2）：153-157.

[11] Yu Y， Wang Y， Zhou LN， et al. ARB treatment prevents the decrease in endothelial progenitor cells and the loss of renal microvasculature in remnant kidney[J]. Am J Nephrol， 2011，33（6）：550-557.

[12] 吳志蓮，沈小梅，杜瑞，等. 血管緊張素受體在內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 中國心血管雜志，2010，（3）：230-232.

[13] Grisar JC， Haddad F， Gomari FA， et al. Endothelial progenitor cells in cardiovascular disease and chronic inflammation： From biomarker to therapeutic agent[J]. Bio mark Med， 2011，5（6）：731-744.

[14] Suzuki R， Fukuda N， Katakawa M， et al. Effects of an angiotensin II receptor blocker on the impaired function ofendothelial progenitor cells in patients with essential hypertension[J]. Am J Hypertens，2014，27（5）：695-701.

[15] 葉禮新，宋曉娜，喻佳， 等. 320排動(dòng)態(tài)容積CT冠狀動(dòng)脈成像在隱匿性冠狀動(dòng)脈疾病篩查中的應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2012，24（7）：34-37.

（收稿日期：2014-05-28）endprint

[4] Smith SC Jr， Blair SN， Bonow RO， et al. AHA/ACC Scientific Statement： AHA/ACC guidelines for preventin heart attack and death in patients with atherosclerotic cardiovascular disease： 2001 update： A statement for healthcare professionals from the American Heart Association and the American College of Cardiology[J]. Circulation， 2001，104（13）：1577-1579.

[5] Lemarie CA， Shbat L， Marchesi C， et al. Mthfr deficiency induces endothelial progenitor cell senescence via uncoupling of eNOS and downregulation of SIRT1[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2011，300（3）：745-753.

[6] Leung JW， Wong WT， Koon HW， et al. Transgenic mice over-expressing ET-1 in the endothelial cells develop systemichypertension with altered vascular reactivity[J]. PLOS ONE， 2011，6（11）：e26994.

[7] Gao D， Nolan DJ， Mellick AS， et al. Endothelial progenitor cells control the angiogenic switch in mouse lungmetastasis[J]. Science，2008，319（5860）：195-198.

[8] Jialal I， Devaraj S， Singh U， et al. Decreased number and impaired functionality of endothelial progenitor cells insubjects with metabolic syndrome： Implications for increased cardiovascular risk[J]. Atherosclerosis，2010，211（1）：297-302.

[9] Yao EH， Fukuda N， Matsumoto T， et al. Losartan improves the impaired function of endothelial progenitor cells inhypertension via an antioxidant effect[J]. Hypertens Res， 2007，30（11）：1119-1128.

[10] Matsuura K， Hagiwara N. The pleiotropic effects of ARB in vascular endothelial progenitor cells[J]. Curr Vasc Pharmacol， 2011，9（2）：153-157.

[11] Yu Y， Wang Y， Zhou LN， et al. ARB treatment prevents the decrease in endothelial progenitor cells and the loss of renal microvasculature in remnant kidney[J]. Am J Nephrol， 2011，33（6）：550-557.

[12] 吳志蓮，沈小梅，杜瑞，等. 血管緊張素受體在內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 中國心血管雜志，2010，（3）：230-232.

[13] Grisar JC， Haddad F， Gomari FA， et al. Endothelial progenitor cells in cardiovascular disease and chronic inflammation： From biomarker to therapeutic agent[J]. Bio mark Med， 2011，5（6）：731-744.

[14] Suzuki R， Fukuda N， Katakawa M， et al. Effects of an angiotensin II receptor blocker on the impaired function ofendothelial progenitor cells in patients with essential hypertension[J]. Am J Hypertens，2014，27（5）：695-701.

[15] 葉禮新，宋曉娜，喻佳， 等. 320排動(dòng)態(tài)容積CT冠狀動(dòng)脈成像在隱匿性冠狀動(dòng)脈疾病篩查中的應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2012，24（7）：34-37.

（收稿日期：2014-05-28）endprint

[4] Smith SC Jr， Blair SN， Bonow RO， et al. AHA/ACC Scientific Statement： AHA/ACC guidelines for preventin heart attack and death in patients with atherosclerotic cardiovascular disease： 2001 update： A statement for healthcare professionals from the American Heart Association and the American College of Cardiology[J]. Circulation， 2001，104（13）：1577-1579.

[5] Lemarie CA， Shbat L， Marchesi C， et al. Mthfr deficiency induces endothelial progenitor cell senescence via uncoupling of eNOS and downregulation of SIRT1[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2011，300（3）：745-753.

[6] Leung JW， Wong WT， Koon HW， et al. Transgenic mice over-expressing ET-1 in the endothelial cells develop systemichypertension with altered vascular reactivity[J]. PLOS ONE， 2011，6（11）：e26994.

[7] Gao D， Nolan DJ， Mellick AS， et al. Endothelial progenitor cells control the angiogenic switch in mouse lungmetastasis[J]. Science，2008，319（5860）：195-198.

[8] Jialal I， Devaraj S， Singh U， et al. Decreased number and impaired functionality of endothelial progenitor cells insubjects with metabolic syndrome： Implications for increased cardiovascular risk[J]. Atherosclerosis，2010，211（1）：297-302.

[9] Yao EH， Fukuda N， Matsumoto T， et al. Losartan improves the impaired function of endothelial progenitor cells inhypertension via an antioxidant effect[J]. Hypertens Res， 2007，30（11）：1119-1128.

[10] Matsuura K， Hagiwara N. The pleiotropic effects of ARB in vascular endothelial progenitor cells[J]. Curr Vasc Pharmacol， 2011，9（2）：153-157.

[11] Yu Y， Wang Y， Zhou LN， et al. ARB treatment prevents the decrease in endothelial progenitor cells and the loss of renal microvasculature in remnant kidney[J]. Am J Nephrol， 2011，33（6）：550-557.

[12] 吳志蓮，沈小梅，杜瑞，等. 血管緊張素受體在內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 中國心血管雜志，2010，（3）：230-232.

[13] Grisar JC， Haddad F， Gomari FA， et al. Endothelial progenitor cells in cardiovascular disease and chronic inflammation： From biomarker to therapeutic agent[J]. Bio mark Med， 2011，5（6）：731-744.

[14] Suzuki R， Fukuda N， Katakawa M， et al. Effects of an angiotensin II receptor blocker on the impaired function ofendothelial progenitor cells in patients with essential hypertension[J]. Am J Hypertens，2014，27（5）：695-701.

[15] 葉禮新，宋曉娜，喻佳， 等. 320排動(dòng)態(tài)容積CT冠狀動(dòng)脈成像在隱匿性冠狀動(dòng)脈疾病篩查中的應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2012，24（7）：34-37.

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