陳玉興，黃雪君，杜鐵良，曾曉會，姚 楠，黃丹娥(廣東省中醫(yī)研究所，廣東廣州 510095)

我國心腦血管疾病的發(fā)病率已經(jīng)排在各種疾病之首［1］，高脂血癥是構成心腦血管疾病的危險因素之一，是動脈粥樣硬化、脂肪肝、冠心病、糖尿病、肥胖癥等的伴發(fā)癥及誘發(fā)因素，降脂治療對預防和降低冠心病、腦梗死等的發(fā)生率、病死率具有重要意義［2］。銀藍調(diào)脂膠囊為中藥六類新藥，經(jīng)臨床十余年應用篩選形成，由銀杏葉、絞股藍等中藥組成，具有益氣健脾、活血化瘀、祛痰利濕等功效，主要適用于氣虛痰瘀阻痹型高脂血癥的治療。本實驗主要對其調(diào)血脂作用進行了動物實驗觀察，為銀藍調(diào)脂膠囊臨床治療高脂血癥提供實驗依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑 銀藍調(diào)脂膠囊，由廣東省中醫(yī)研究所制劑室制備提供，批號 090402;非諾貝特膠囊 (法國利博福尼制藥公司，批號93640);血脂康膠囊 (北京北大維信生物科技有限公司，批號20090210);膽固醇 (廣州合達生物科技有限公司，批號20090520);豬油，市售豬板油煉制，臨用現(xiàn)煉;丙基硫氧嘧啶 (廣州康和藥業(yè)有限公司，批號20090211);吐溫80(廣東達濠精細化學品公司，批號20080107);1，2-丙二醇 (天津市大茂化學試劑廠，批號20081014);膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒 (上?？菩郎锛夹g研究所，批號20090912、20090907);直接高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、直接低密度脂蛋白膽固醇試劑盒 (中生北控生物科技股份有限公司，批號090162、090191);LPL/HL測試盒、FFA測試盒 (南京建成生物工程研究所，批號20090829、20090812);載脂蛋白A1測定試劑盒、載脂蛋白B測定試劑盒 (上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，批號20090816、20090714)。

1.2 動物 SPF級新西蘭兔，雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.4 kg，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(粵)2008－0002，實驗動物質(zhì)量合格證號№0055268。動物實驗環(huán)境:廣東省中醫(yī)研究所SPF級動物實驗室，許可證號SCXK(粵)2005-0059。

1.3 儀器 JJ3000動物電子秤 (G＆G公司);BS224S電子天平 (d=0.1 g)(德國SARTORIUS公司);HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋 (金壇市富華儀器有限公司);3K30離心機(SIGMA公司);752N型紫外分光光度計 (上海精密科學儀器有限公司)。

2 方法

2.1 高脂乳劑配制 參照文獻［3］并加以改進:①稱取250 g豬油置2000 mL燒杯中，加熱到100℃左右使其溶解，緩慢加入100 g膽固醇，攪拌至完全溶解，再加入5 g丙硫氧嘧啶和250 mL吐溫-80，充分攪勻。②同時在另一燒杯中加入300 mL蒸餾水和1，2-丙二醇200 mL，放在電爐上加熱至60℃，然后加入20 g脫氧膽酸鈉，充分攪拌直到完全溶解。③然后將兩種溶液充分混勻，即制成脂肪乳劑。

2.2 實驗步驟［4］SPF級新西蘭兔42只，雌雄各半，隨機抽取6只 (雌雄各半)作為正常對照組，其余36只新西蘭兔均為高脂乳劑組。高脂乳劑組新西蘭兔每天上午9時左右灌胃給予高脂乳劑10 mL/kg，正常對照組新西蘭兔同法灌胃給予蒸餾水10 mL/kg，每天1次，連續(xù)2周。2周后42只家兔均禁食16 h再由耳緣靜脈采血2 mL，離心分離血清，按膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒說明書用752N型紫外分光光度計測定新西蘭兔血清中TC、TG水平。測定后高脂乳劑組新西蘭兔以TC水平分成6組，每組6只，分別為高脂乳劑組 (模型對照組)、高脂乳劑+非諾貝特組、高脂乳劑+血脂康組、高脂乳劑+銀藍高劑量組、高脂乳劑+銀藍中劑量組、高脂乳劑+銀藍低劑量組。非諾貝特、血脂康劑量分別為0.051 g/kg、0.112 g/kg，銀藍調(diào)脂膠囊高、中、低劑量分別為2.668 g生藥/kg(0.560 g/kg)、1.334 g生藥/kg(0.280 g/kg)、0.667 g生藥/kg(0.140 g/kg)。分組后除正常對照組新西蘭兔外其余各組新西蘭兔仍每天上午9時左右灌胃給予高脂乳劑10 mL/kg，4 h后各給藥組按劑量給予相應藥物，正常對照組、模型對照組給予蒸餾水，給藥體積均為10 mL/kg，每天1次，連續(xù)給藥4周。末次給藥前各組新西蘭兔均禁食不禁水16 h，末次給藥1 h后取血，離心分離血清，按試劑盒說明書用752 N型紫外分光光度計分別測定新西蘭兔血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoAI、ApoB、LPL、HL和FFA的量。

3 結果

3.1 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清TC、TG的影響 在造模2周后 (給藥前)各組造模新西蘭兔與正常對照組新西蘭兔相比，血清TC、TG的量均顯著升高 (P＜0.01)。給藥4周后，與正常對照組新西蘭兔相比，模型對照組新西蘭兔血清TC、TG的量仍顯著升高 (P＜0.01);與模型對照組相比，銀藍調(diào)脂膠囊 2.668、1.334、0.667 g生藥/kg 3個劑量均能顯著降低飲食性高脂血癥新西蘭兔血清TC、TG的量 (P＜0.01)。詳見表1。

表1 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清TC、TG的影響 (，n=6)

表1 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清TC、TG的影響 (，n=6)

注:①非諾貝特組、血脂康組劑量單位為g/kg，銀藍調(diào)脂膠囊劑量單位為g生藥/kg;②與正常對照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與模型對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。(下表同)

組別 劑量給藥后TC/(mmol·L －1) TG/(mmol·L － 1) TC/(mmol·L － 1) TG/(mmol·L － 1給藥前)正常對照組 — 1.159±0.293 0.779±0.116 1.040±0.247 1.026±0.283模型對照組 — 10.785±2.144＊＊ 3.684±0.928＊＊ 20.143±6.103＊＊ 3.232±0.839＊＊非諾貝特組 0.051 10.354±2.902＊＊ 4.141±0.760＊＊ 12.023±6.125## 2.038±1.145#血脂康組 0.112 10.719±1.984＊＊ 4.025±0.829＊＊ 10.253±6.099## 2.084±0.844#銀藍調(diào)脂膠囊組 2.668 10.952±2.540＊＊ 4.080±1.106＊＊ 9.153±4.238## 1.169±0.244##銀藍調(diào)脂膠囊組 1.334 10.752±2.690＊＊ 3.743±1.014＊＊ 10.804±2.434## 1.464±0.395##銀藍調(diào)脂膠囊組 0.667 10.847±2.430＊＊ 3.822±0.826＊＊ 9.577±3.365## 1.736±0.547##

3.2 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清HDL-c、LDL-c的影響 給藥4周后，與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清LDL-c的量顯著升高 (P＜0.01);與模型對照組相比，銀藍調(diào)脂膠囊2.668、1.334、0.667 g生藥/kg 3個劑量能顯著降低實驗性高脂血癥新西蘭兔血清LDL-c的量 (P＜0.01)，并在一定程度上提高HDL-c的量。詳見表2。

3.3 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清ApoA1、ApoB的影響 給藥4周后，與正常對照組相比，模型對照組新西蘭兔血清 ApoA1、ApoB含有量明顯升高 (P＜0.01)、ApoA1/ApoB比值顯著下降 (P＜0.01);與模型對照組相比，銀藍調(diào)脂膠囊2.668、1.334、0.667 g生藥/kg 3個劑量組新西蘭兔血清ApoA1、ApoB的量明顯降低 (P＜0.01)，ApoA1/ApoB比值顯著升高 (P＜0.01)。詳見表3。

表2 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清HDL-c、LDL-c的影響(，n=6)

表2 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清HDL-c、LDL-c的影響(，n=6)

組別 劑量 HDL-c/(mmol·L －1)LDL-c/(mmol·L －1)正常對照組 —0.959±0.354 1.506±0.902模型對照組 — 1.811±0.722 21.297±5.346＊＊非諾貝特組 0.051 2.418±0.545 6.918±2.322##血脂康組 0.112 2.505±1.254 4.746±1.531##銀藍調(diào)脂膠囊組 2.668 2.052±0.603 8.115±2.674##銀藍調(diào)脂膠囊組 1.334 2.105±0.723 6.504±5.182##銀藍調(diào)脂膠囊組 0.667 2.155±0.782 8.146±3.224##

表3 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清ApoA1、ApoB的影響 (，n=6)

表3 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清ApoA1、ApoB的影響 (，n=6)

ApoA1/ApoB正常對照組 —組別 劑量 ApoA1/(g·L－1) ApoB/(g·L－1)0.549±0.056 0.092±0.037 6.672±2.366模型對照組 — 1.188±0.355＊＊ 1.462±0.479＊＊ 0.881±0.331＊＊非諾貝特組 0.051 0.807±0.148## 0.684±0.289## 1.331±0.438##血脂康組 0.112 0.743±0.168## 0.453±0.209## 1.980±1.072##銀藍調(diào)脂膠囊組 2.668 0.851±0.201## 0.434±0.217## 2.411±1.450##銀藍調(diào)脂膠囊組 1.334 0.756±0.165## 0.365±0.221## 2.670±1.310##銀藍調(diào)脂膠囊組 0.667 0.758±0.119## 0.508±0.319## 1.929±0.864##

3.4 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清LPL、HL、總酯酶活性的影響 給藥4周后，與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清LPL、HL和總酯酶活性無顯著性差異 (P＞0.05);與模型對照組相比，銀藍調(diào)脂膠囊2.668 g生藥/kg劑量明顯升高實驗性高脂血癥新西蘭兔血清LPL、總酯酶活性 (P＜0.01)。見表4。

表4 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清LPL、HL、總酯酶活性的影響 (，n=6)

表4 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清LPL、HL、總酯酶活性的影響 (，n=6)

組別 劑量 LPL/(U·mL－1) HL/(U·mL－1) 總酯酶/(U·mL－1)正常對照組 —3.447±0.875 3.144±1.166 6.591±1.682模型對照組 — 4.004±1.208 3.477±1.152 7.481±2.142非諾貝特組 0.051 5.648±0.987 4.716±1.300 10.364±1.755血脂康組 0.112 3.394±0.872 6.216±3.043# 9.610±2.535銀藍調(diào)脂膠囊組 2.668 6.477±1.350## 5.496±0.918 11.973±1.776##銀藍調(diào)脂膠囊組 1.334 4.648±1.279 3.489±1.213 8.136±2.167銀藍調(diào)脂膠囊組0.667 4.254±1.110 3.197±1.658 7.451±2.363

3.5 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清游離脂肪酸 (FFA)的影響 給藥4周后，與正常對照組相比，模型對照組大鼠血清FFA的量明顯升高 (P＜0.05);與模型對照組相比，銀藍調(diào)脂膠囊2.668 g生藥/kg劑量明顯降低實驗性高脂血癥新西蘭兔血清FFA量 (P＜0.05)。詳見表5。

表5 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清游離脂肪酸FFA的影響(，n=6)

表5 對實驗性高脂血癥新西蘭兔血清游離脂肪酸FFA的影響(，n=6)

組別 劑量 FFA/(μmol·L－1)正常對照組 —336.283±150.806模型對照組 — 952.802±266.420*非諾貝特組 0.051 703.540±305.316#血脂康組 0.112 805.310±510.888銀藍調(diào)脂膠囊組 2.668 547.198±350.979#銀藍調(diào)脂膠囊組 1.334 775.811±640.739銀藍調(diào)脂膠囊組0.667 949.853±795.962

4 討論

高脂血癥是指血液中一種或多種脂質(zhì)成分異常增高，并由此引發(fā)一系列臨床病理表現(xiàn)的病癥［5］。2004年全國通過體檢發(fā)現(xiàn)患高脂血癥的人數(shù)達到1.6億，中國每十個人中就有一人患有血脂異常，隨著生活水平提高，血脂異常對我國國人的危險上升到原來的3～5倍，不僅如此，我國12個大城市、25家三甲醫(yī)院對2136例高膽固醇血癥患者的調(diào)查顯示，血脂控制達標率僅為26.5%［6］，我國血脂異常的防治狀況異常嚴峻。

西醫(yī)對高脂血癥的研究和治療取得了較大的成果，臨床常用的調(diào)血脂西藥主要有［7-8］:①貝特類，該類藥物通過激動PPARα，增加LPL酶活性，降低甘油三酯和膽固醇，但常有惡心、腹脹、腹瀉、白細胞減少等不良反應;②他汀類，作用靶標為HMG-COA，主要降低膽固醇，降脂作用強，起效快，但有頭痛、失眠、惡心等不良反應;③煙酸類，降低血清甘油三酯的作用較強，但易產(chǎn)生皮膚紅斑、熱感、瘙癢;④多烯不飽和脂肪酸類，該類藥物與膽固醇結合成酯，促進其降解為膽汁酸，使血漿膽固醇濃度下降，該類藥物具有抗血小板凝集作用，故需謹慎使用;⑤膽固醇吸收抑制劑，代表藥物Ezetimibe，該藥通過與膽汁酸結合，阻斷膽汁酸重吸收，促進膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸，從而降低體內(nèi)膽固醇，常見不良反應有腹脹、惡心、便秘，不適合患有胃腸道疾病病人使用。此外，近年來他汀類、貝特類與他汀類合用引起的橫紋肌溶解這一副作用受到了越來越多的關注，這嚴重影響了當前兩大降血脂藥物在臨床上長期應用的安全性［9］。高脂血癥臨床需長期用藥，西藥長期用藥所引起的肝腎功能、肌肉損害及停藥后血脂反跳一直是西醫(yī)治療本病的難題［10］。

當前，降血脂藥物研究策略及靶標主要有影響膽固醇合成、干擾脂質(zhì)代謝和轉(zhuǎn)運過程、促進高密度脂蛋白的形成、抑制低密度脂蛋白的形成以及抑制膽固醇的吸收等［11-12］。高脂血癥病因病機較為復雜，由多因素引起并呈現(xiàn)多器官、多靶點同時病變的趨勢，與西藥單組分、單靶標的作用模式相比，中藥的多組分、多靶點、毒副作用小、整體調(diào)節(jié)的作用特點更具優(yōu)勢。充分發(fā)揮中醫(yī)藥的特色和優(yōu)勢治療高脂血癥具有廣闊的應用前景［13］。

中醫(yī)認為，脂質(zhì)代謝紊亂乃由臟氣虧虛、氣化功能失調(diào)所致。因血脂為水谷精微物質(zhì)所化，參與機體的營養(yǎng)與代謝。若臟氣虧虛，氣化功能失調(diào)，不能運化輸布水谷精微至全身，多余之脂質(zhì)則會滯留沉淀于血脈肌肉之中形成脂濁，進而影響血脈津液之運行以致痰濁、瘀血內(nèi)著，終成臟氣虧虛，痰瘀互結之錯綜復雜之病理變化［14］。故痰濁瘀血阻滯是高脂血癥的重要的病理基礎，高脂血癥的發(fā)生主要歸結于脾、腎，脾腎虛弱為本，痰瘀互結為標［15］。

銀藍調(diào)脂膠囊由銀杏葉、絞股藍等中藥組成，既可健脾益氣，又可消痰濕，去瘀血，標本兼治，適用于氣虛痰瘀阻痹型高脂血癥的治療。本實驗研究證實，銀藍調(diào)脂膠囊能夠顯著降低外源性飲食性高脂血癥新西蘭兔TC、TG水平，升高HDL-c水平，降低LDL-c水平。其作用機理是通過降低ApoB水平減少了LDL-c的合成;通過升高LPL和總酯酶活性促進TG的水解代謝;通過降低FFA水平促進了TG的代謝活動等。

本實驗初步研究了銀藍調(diào)脂膠囊對新西蘭兔的調(diào)脂作用，研究結果令人期待，值得進一步深入研究其作用機理。

［1］張慶軍，劉德培，梁植權.動脈粥樣硬化的基礎研究［J］.中華醫(yī)學雜志，2005，85(6):428-431.

［2］孫 芳，尚文斌.中醫(yī)藥治療高脂血癥的研究進展［J］.中醫(yī)藥信息，2011，28(2):120-123.

［3］唐春萍，郭 姣，楊超燕.調(diào)脂靈對高脂血癥大鼠脂代謝酶及載脂蛋白的影響［J］.廣東藥學院學報，2007，23(2):175-177.

［4］邱賽紅，李福元，高 雁，等.降脂消斑片對兔高脂血癥合并動脈粥樣硬化血脂的影響［J］.湖南中醫(yī)藥大學學報，2009，29(3):21-23.

［5］蘇 蓉，于德水.高脂血癥的危害及防治［J］.中國當代醫(yī)藥，2009，16(8):128.

［6］《心血管病防治知識》編輯部.高度關注高血脂的危害——衛(wèi)生部心血管病防治研究中心全國專家委員會全體會議［J］.心血管病防治知識，2007(9):14-17.

［7］Hodel C.Myopathy and rhabdomyolysis with lipid-lowering drugs［J］.Toxicol Lett，2002，128(1-3):159-68.

［8］林肖惠，王玉麗，徐為人.治療高血脂癥藥物的研究進展［J］.心血管病學進展，2008，29(z1):91-96.

［9］Jamal S M，Eisenberg M J，Christopoulos S.Rhabdomyolysis associated with hydroxymethylglutaryl-coenzyme A reductase inhibitors［J］.Am Heart J，2004，147(6):956-965.

［10］寇 芳.中醫(yī)藥治療高脂血癥研究進展［J］.中醫(yī)文獻雜志，2010，16(2):55-57.

［11］Rau O，Zettl H，Popescu L，et al.The treatment of dyslipidemia—What’s left in the pipeline?［J］.Chem Med Chem，2008，3(2):206-21.

［12］Jain K S，Kathiravan M K，Somani R S，et al.The biology and chemistry of hyperlipidemia［J］.Bioorg Med Chem，2007，15(14):4674-99.

［13］肖世鳳，楊 英.中醫(yī)藥治療高脂血癥的研究進展［J］.疾病監(jiān)測與控制雜志，2009，3(6):380-382.

［14］方顯明，秦小慧，李蘭芳，等.安心顆粒對實驗性高脂血癥大鼠血脂及血液流變學指標的影響［J］.中國實驗方劑學雜志，2007，13(5):21-23.

［15］李玉蘭.從中醫(yī)學角度探討高脂血癥的病因病機［J］.四川中醫(yī)，2010，28(3):17-18.