陳藍(lán) 劉冠男

高效液相色譜法是一種非常重要的化學(xué)分離分析手段，廣泛運(yùn)用于鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定、體內(nèi)分析等藥物分析測(cè)試與藥物質(zhì)量分析方法的建立。

高效液相色譜（HPLC）是20世紀(jì)60年代末70年代初出現(xiàn)并發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)分離分析技術(shù)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，色譜也不斷的被改進(jìn)與完善。由于其具有高分離速率，高分離效率，高檢測(cè)靈敏度等特點(diǎn)，高效液相成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。尤其是藥物，直接關(guān)系到人的生命健康，只有對(duì)藥品的研制、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)和使用各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行全面的動(dòng)態(tài)的藥物分析研究和監(jiān)測(cè)控制，才能確保藥品使用的安全、有效與合理。因此，高效液相色譜廣泛運(yùn)用于藥物分析的各個(gè)方面。

1高效液相色譜在藥物鑒別中的應(yīng)用

在H P L C法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)，可用于藥物的鑒別，中國(guó)藥典采用此法進(jìn)行藥物鑒別。由于西紅花價(jià)格昂貴，經(jīng)常出現(xiàn)假品偽品，常見(jiàn)偽品有紅花、菊花、玉米須、蓮須、紙漿等；其摻偽現(xiàn)象比較復(fù)雜，給真?zhèn)舞b別和優(yōu)劣評(píng)價(jià)帶來(lái)難度。安慧景采用高效液相色譜法對(duì)西紅花及其偽品的特征成分進(jìn)行鑒別，確定正品西紅花中沒(méi)有綠原酸和羥基紅花黃素A，并建立了HPLC-DAD含量測(cè)定方法，通過(guò)測(cè)定樣品中的綠原酸、HSYA，一次性鑒別西紅花、常見(jiàn)偽品菊花、紅花，并測(cè)定摻偽量。此方法不僅能鑒別藥材及提取物是否摻偽，而且能確定所摻偽品的種類并估測(cè)摻偽量，是對(duì)西紅花摻偽鑒別方法的有益探討和嘗試[1]。隨著高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展和在藥典中的重要性不斷提高，出現(xiàn)了一些采用高效液相色譜法鑒別藥物的新方法。例如，克拉霉素、利福平滴眼液、崗梅等七種冬青屬中草藥以及南北五味子的鑒別等[2-5]。這些新方法的發(fā)展無(wú)疑為進(jìn)一步完善、開(kāi)發(fā)藥物鑒別的方法提供了一種新的思路。

2高效液相色譜在藥物雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用

隨著H P L C 技術(shù)的不斷發(fā)展，有不少藥物分析工作者研究和探討了H P L C法在藥物的有關(guān)物質(zhì)檢查方面的應(yīng)用，并建立了一些新方法。例如，鹽酸噻吩諾啡、奧沙西泮原料藥及其片劑、鹽酸喹那普利原料藥、氟他胺中有關(guān)物質(zhì)的檢查等[6-9]。這些方法簡(jiǎn)便、可行且專屬性較強(qiáng)，是藥物雜質(zhì)檢測(cè)的新發(fā)展。程磊等通過(guò)合成胸腺法新雜質(zhì)對(duì)照品后確證其結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行雜質(zhì)測(cè)定的方法學(xué)研究測(cè)得各雜質(zhì)相對(duì)于胸腺法新的校正因子，從而建立一種高效液相色譜測(cè)定胸腺法新及其制劑中雜質(zhì)的方法，并可對(duì)含量超過(guò)0.1%的雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定[10]。胡政華等建立苯磺酸左旋氨氯地平片中右旋雜質(zhì)的HPLC檢查方法，該方法專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確，是手性藥物中雜質(zhì)分析方法的進(jìn)步[11]。

3高效液相色譜在藥物含量測(cè)定中的應(yīng)用

用高效液相色譜法測(cè)定合成藥及其制劑的含量，可以消除藥物中的雜質(zhì)、制劑中的附加劑及共存藥物的干擾。張美娟采用高效液相色譜法測(cè)定舒心糖漿中阿魏酸的含量，所建立的方法分離效果好、靈敏、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便[12]。此外，高效液相色譜在復(fù)方制劑中藥物含量測(cè)試中也有廣泛應(yīng)用，如月乃湯中甘草的鑒別和甘草酸含量測(cè)定[13]以及復(fù)方葛斛膠囊中葛根素含量的測(cè)定等[14]。

4高效液相色譜在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用

與氣相色譜法相比，高效液相色譜法不受樣品揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性及相對(duì)分子質(zhì)量的限制，只需把樣品制成溶液即可測(cè)定，非常適用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子量大的有機(jī)合成藥物。張莉等建立了一種快速、準(zhǔn)確測(cè)定大鼠血清中（E）-3-（3，5-二羥基-4-異丙基苯基）丙烯酸含量的反相HPLC分析方法，該方法準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可用于臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究中血藥濃度的測(cè)定[15]。付洪瑜等建立大鼠血漿中卡瓦內(nèi)酯麻醉椒苦素的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）定量分析方法，并用于大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究，該分析方法特異性好、分析速度快、靈敏度高，可用于臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究[16]。

綜上所述，高效液相色譜法分析速度快、分離效率高、檢測(cè)靈敏度高、檢測(cè)自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理簡(jiǎn)單。高效液相色譜法還可以在檢查雜質(zhì)的同時(shí)進(jìn)行含量測(cè)定， 為分析工作節(jié)約了時(shí)間，同時(shí)也降低了分析成本。因此在藥物分析的各個(gè)方面都有優(yōu)勢(shì)。該文原載于中國(guó)社會(huì)科學(xué)院文獻(xiàn)信息中心主辦的《環(huán)球市場(chǎng)信息導(dǎo)報(bào)》雜志http：//www.ems86.com總第547期2014年第15期-----轉(zhuǎn)載須注名來(lái)源近年來(lái)， HPLC 法在儀器、檢測(cè)器、固定相等方面都有很大的發(fā)展，與其他分析技術(shù)的聯(lián)用也越來(lái)越成熟。如高效液相色譜儀和電感耦合等離子體質(zhì)譜儀聯(lián)用、高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用以及高效液相色譜-傅立葉變換紅外吸收光譜聯(lián)用等多種技術(shù)。高效液相色譜與其他技術(shù)的聯(lián)用是高效液相色譜今后的主要發(fā)展方向，也將是今后質(zhì)量規(guī)范化、國(guó)際化的重要途徑。

參考文獻(xiàn)

[1]安慧景.西紅花常見(jiàn)偽品的鑒別及摻偽量測(cè)定[J].世界科學(xué)技術(shù)（中醫(yī)藥現(xiàn)代化），[D]2012-06-01（4）：155-161.

[2]楊娜，張雷.用高效液相色譜法鑒別克拉霉素[J].山東醫(yī)藥工業(yè)，2002，21（4）：21-22.

[3]王梅娟.利福平滴眼液的高效液相色譜法鑒別[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究，2005，13（1）：70-71.

[4]羅集鵬，畢培曦.七種冬青屬中草藥的高效液相色譜法鑒別[N].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)， 1997，13（4）： 211-214.

[5]周瑩，程海燕.高效液相色譜法鑒別南北五味子[N].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2005，4（10）：951-952.

[6]閻平，謝劍煒.高效液相色譜法測(cè)定鹽酸噻吩諾啡藥物有關(guān)物質(zhì)的方法研究[J].分析實(shí)驗(yàn)室，2006，12（25）：8-10.

[7]黃東.高效液相色譜法測(cè)定氟他胺中有關(guān)物質(zhì)[J].藥學(xué)與臨床研究，2007，15（6）：453-455.

[8]程?hào)|升，陳蕾等.奧沙西泮原料及其片劑中有關(guān)物質(zhì)的檢查[J].藥物分析雜志，2 0 0 8 ，2 8（4）：562-566.

[9]沈曉峰，高達(dá)敏.鹽酸喹那普利有關(guān)物質(zhì)的檢查[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2000，31（11）：497-499.

[10]程磊；唐洋明； 殷果；畢開(kāi)順；陳曉輝；王鐵杰.HPLC法對(duì)胸腺法新及其制劑中雜質(zhì)檢查[J].藥物分析雜志，2013-11-30（11）：1942-1947.

[11]胡政華；陳靜.苯磺酸左旋氨氯地平片中右旋雜質(zhì)的檢查[J].西北藥學(xué)雜志，2011-04-01（2）：98-100.

[12]張美娟.HPLC法測(cè)定舒心糖漿中阿魏酸的含量[J].科技創(chuàng)新與應(yīng)用，2014-02-28（6）：19-21.

[13]劉國(guó)洪；鐘宇富.月乃湯中甘草的鑒別及甘草酸含量測(cè)定[J]食品工業(yè)，2014-02-20（2）：243-245.

[14]楊麗.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方葛斛膠囊中葛根素含量[J]內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2014-02-20（5）：53-54.

[15] 張莉；李東；肖正華；張夢(mèng)軍；郭嘉偉；周娟；李濱；張惠靜；RP-HPLC法測(cè)定大鼠血清中NI221的含量[J].中國(guó)測(cè)試，2013-11-30（6）：53-56.

[16]付洪瑜；楊建香；邱聲祥；吳惠勤；黃曉蘭；胡英杰；HPLC-MS/MS法測(cè)定大鼠血漿中麻醉椒苦素的濃度及其藥動(dòng)學(xué)研究[J].藥物分析雜志，2013-09-30（9）：1480-1485.

（作者單位：中國(guó)計(jì)量學(xué)院）