劉暉群，劉敏知，熊林楷

江西省腫瘤醫(yī)院 內(nèi)二科，江西 南昌 330029

非小細(xì)胞肺癌（non small cell lung cancer，NSCLC）是目前臨床上最常見的肺癌類型。諸多研究表面，分子生物學(xué)因素如癌基因、抑癌基因、腫瘤細(xì)胞DNA含量、腫瘤黏附分子、腫瘤血管生成等，對(duì)NSCLC的生物學(xué)行為可以產(chǎn)生巨大的影響，從而決定著NSCLC的形態(tài)特征、生長(zhǎng)方式、惡性程度、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等，并進(jìn)一步影響著患者的預(yù)后[1-3]。本研究即旨在探討NSCLC患者K-ras基因突變與預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

2006年3月～2008年7月江西省腫瘤醫(yī)院收治的92例患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理檢查確診為NSCLC；②臨床資料完整，相關(guān)檢查得到完善。排除標(biāo)準(zhǔn)：①隨訪丟失的患者；②治療方案不規(guī)范的患者。包括男性61例、女性31例；年齡42～75歲，平均（59.9±8.1）歲；病理分型腺癌79例、鱗癌8例、其他類型5例；有吸煙史患者62例，從未有過吸煙史患者30例。

1.2 治療方案

嚴(yán)格按照美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（NCCN）提供的NSCLC治療指南給予研究對(duì)象綜合治療。92例患者中，34例采用以手術(shù)為主的綜合治療，余58例因喪失手術(shù)機(jī)會(huì)而采用以化療為主的綜合治療。

1.3 K-ras基因突變檢測(cè)

采用蝎形探針擴(kuò)增阻遏突變系統(tǒng)（amplifica?tion refractory mutation system，ARMS）法對(duì)研究對(duì)象組織學(xué)標(biāo)本行K-ras基因突變檢測(cè)，試劑盒由英國(guó)Delivering Pharmacogenomics公司生產(chǎn)，檢測(cè)K-ras基因第12、13位密碼子的7種突變，包括Gly12Cys（GGT＞TGT）突 變 、Gly12Val（GGT＞GTT）突 變 、Gly12Ala（GGT＞GCT）突變、Gly12Arg（GGT＞CGT）突變 、Gly12Asp（GGT＞GAT）突 變 、Gly12Ser（GGT＞AGT）突變、Gly13Asp（GGC＞GAC）突變。

1.4 隨訪方式

對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行隨訪，隨訪方式包括門診就診、電話、電子郵件等方式，記錄每個(gè)患者的生存情況。本研究中末次隨訪時(shí)間為2014年2月，所有研究對(duì)象均得到有效隨訪。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料用x±s表示，計(jì)量資料比較采用成組設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料百分率比較采用四格表χ2檢驗(yàn)，生存分析采用Log rank檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NSCLC患者K-ras基因突變率及其突變類型

92例NSCLC患者中有11例K-ras基因突變陽(yáng)性，陽(yáng)性率為11.96%。突變類型包括Gly12Cys（GGT＞TGT）突變 3例、Gly12Val（GGT＞GTT）突變 2例、Gly12Ala（GGT＞GCT）突變 2例、Gly12Arg（GGT＞CGT）突 變 2 例 、Gly12Cys（GGT＞TGT）突 變 與Gly12Val（GGT＞GTT）突變并存1例、Gly12Cys（GGT＞TGT）突變與Gly12Ala（GGT＞GCT）突變并存1例。

2.2 K-ras基因突變陽(yáng)性組與陰性組之間臨床病理特征的比較

K-ras基因突變陽(yáng)性組與陰性組之間的患者性別、年齡、病理類型、吸煙史相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

2.3 K-ras基因突變陽(yáng)性組與陰性組之間中位生存期的比較

K-ras基因突變陽(yáng)性組包括Ⅰa～Ⅱb期患者2例，總生存時(shí)間17～24個(gè)月；Ⅲa～Ⅳ期患者9例，總生存時(shí)間6～35個(gè)月，中位生存期10個(gè)月。K-ras基因突變陰性組包括Ⅰa～Ⅱb期患者22例，總生存時(shí)間15～67個(gè)月，中位生存期25個(gè)月；Ⅲa～Ⅳ期患者59例，總生存時(shí)間7～28個(gè)月，中位生存期19個(gè)月。Log rank檢驗(yàn)顯示K-ras基因突變陽(yáng)性組Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期顯著低于K-ras基因突變陰性組Ⅲa～Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

20世紀(jì)80年代以來，諸多研究者對(duì)肺癌，尤其是NSCLC的病因、診斷、治療、預(yù)后進(jìn)行了大量分子生物學(xué)研究，從而認(rèn)識(shí)到NSCLC的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、侵襲、多藥耐藥等生物學(xué)行為與機(jī)體內(nèi)細(xì)胞基因功能或結(jié)構(gòu)異常有關(guān)，如抑癌基因的突變與失活、原癌基因的突變與失活、端粒酶相關(guān)的細(xì)胞永生性激活、宿主抗腫瘤免疫基因的破壞、基因不穩(wěn)定性、轉(zhuǎn)移抑制相關(guān)基因異常、旁分泌與自分泌生長(zhǎng)因子的激活、腫瘤血管生長(zhǎng)因子的激活等[4-5]。隨著研究的深入，目前已初步形成了NSCLC分子診斷、分子分期、分子治療、分子預(yù)后等新的理論[6]，各種NSCLC分子生物學(xué)標(biāo)志物逐步應(yīng)用于臨床。

K-ras基因?qū)儆谠┗?，定位于人染色體12p12.1，編碼一種定位于細(xì)胞膜上的p21-ras偶聯(lián)蛋白，其功能主要是將細(xì)胞生長(zhǎng)、分化信號(hào)從激活受體傳導(dǎo)至蛋白激酶。K-ras基因突變后，其編碼的蛋白會(huì)喪失滅活的功能，從而刺激細(xì)胞自發(fā)性生長(zhǎng)、分化，在各種惡性腫瘤如NSCLC、胰腺癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等的發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[7]。目前國(guó)內(nèi)外有關(guān)K-ras基因突變與NSCLC的研究報(bào)道較多。Meng等[1]報(bào)道，20%～30%的NSCLC患者K-ras基因突變陽(yáng)性，其中以腺癌最為常見，K-ras基因突變可以縮短N(yùn)SCLC患者尤其是早期腺癌患者的總生存期。Garassino等[8]報(bào)道，NSCLC患者的藥物敏感性、腫瘤生物學(xué)行為受K-ras基因突變類型的影響。

表1 K-ras基因突變陽(yáng)性組與陰性組之間臨床病理特征的比較

在本研究中，我們對(duì)92例NSCLC患者進(jìn)行了K-ras基因突變檢測(cè)，有11例患者K-ras基因突變陽(yáng)性，其中9例為單位點(diǎn)突變，2例為多位點(diǎn)突變，K-ras基因突變陽(yáng)性率為11.96%，略低于前述20%～30%的比例，這可能是由于地域差異、抽樣誤差等因素所致。其次，通過分析K-ras基因突變與NSCLC患者臨床病理特征的關(guān)系可知，K-ras基因突變與NSCLC患者的性別、年齡、病理類型、吸煙史等臨床資料無關(guān)，這與Baykara等[9]報(bào)道一致，說明K-ras基因突變不受NSCLC患者的一般臨床病理特征所影響。最后，我們還分析了K-ras基因突變對(duì)NSCLC患者中位生存期的影響，由于K-ras基因突變陽(yáng)性組Ⅰa～Ⅱb期患者病例數(shù)過少，無法求出中位生存期，因此僅對(duì)K-ras基因突變陽(yáng)性組Ⅲa～Ⅳ期患者與K-ras基因突變陰性組Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期做了比較，結(jié)果顯示前者中位生存期顯著低于后者，說明K-ras基因突變對(duì)NSCLC患者預(yù)后可以產(chǎn)生負(fù)性影響。綜上所述，在NSCLC患者的臨床診治過程中，K-ras基因突變檢測(cè)具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1]Meng D,Yuan M,Li X,et al.Prognostic value of K-RAS mutations in patients with non-small cell lung cancer:a sys?tematic review with meta-analysis[J].Lung Cancer,2013,81(1):1-10.

[2]Li H,Xie L,Lai R S.Association of EGFR mutations with low BRCA1 gene expression in non-small cell lung cancer[J].Mol Clin Oncol,2013,1(1):195-199.

[3]Bi Jian-Wei,Mao Yi-Min,Sun Yu-Xia,et al.Expression lev?els of ERCC1 and RRM1 mRNA and clinical outcome of ad?vanced non-small cell lung cancer[J].Pak J Med Sci,2013,29(5):1158-1161.

[4]Oak C H,Wilson D,Lee H J,et al.Potential molecular ap?proaches for the early diagnosis of lung cancer(review)[J].Mol Med Rep,2012,6(5):931-936.

[5]Perlikos F,Harrington K J,Syrigos K N.Key molecular mech?anisms in lung cancer invasion and metastasis:a comprehen?sive review[J].Crit Rev Oncol Hematol,2013,87(1):1-11.

[6]Pendharkar D,Ausekar B V,Gupta S.Molecular biology of lung cancer-a review[J].Indian J Surg Oncol,2013,4(2):120-124.

[7]Ishida M,Igarashi T,Teramoto K,et al.Mucinous bronchio?loalveolar carcinoma with K-ras mutation arising in type 1 congenitalcystic adenomatoid malformation:a case report with review of the literature[J].Int J Clin Exp Pathol,2013,6(11):2597-2602.

[8]GarassinoM C,MarabeseM,RusconiP,etal.Different types of K-Ras mutations could affect drug sensitivity and tu?mour behaviour in non-small-cell lung cancer[J].Ann Oncol,2011,22(1):235-237.

[9]Baykara O,Tansarikaya M,Demirkaya A,et al.Association ofepidermalgrowth factorreceptorand K-Rasmutations with smoking history in non-small cell lung cancer patients[J].Exp Ther Med,2013,5(2):495-498.