邵金華 李軍艷 劉 歡 鄧 佳

（湖南科技學(xué)院 生命科學(xué)與化學(xué)工程系，湖南 永州 425199）

梓樹是紫葳科梓屬植物，樹皮習(xí)稱梓白皮，果實(shí)稱梓實(shí)，均供藥用，具有清熱、解毒、殺蟲和利尿的功能[1]。梓樹是一種多功能綜合利用的樹種，具有廣泛的應(yīng)用開發(fā)價值[2]。我市梓樹野生資源豐富，積極開展梓屬植物的科學(xué)研究與開發(fā)應(yīng)用，具有重要的意義和廣泛的應(yīng)用前景[3]。國內(nèi)外對其在醫(yī)藥臨床方面的研究報告很多[4]，而對其根皮部的研究未見報道，本文以梓樹根皮為實(shí)驗材料，對其有效成分進(jìn)行了系統(tǒng)的定性分析實(shí)驗，為梓樹根皮的進(jìn)一步開發(fā)和提取奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

梓樹根皮采自于湖南省永州市西山上，晾干，植物粉碎機(jī)粉碎，備用。

1.2 儀器

R201D-II-旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；SHB-111-循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長盛實(shí)驗設(shè)備有限公司；ZF-1-三用紫外分析儀，上海精科實(shí)業(yè)有限公司；DF-101S-集熱恒溫加熱磁力攪拌器，鄭州長盛實(shí)驗設(shè)備有限公司等。

1.3 試劑

乙醇、石油醚、明膠、氫氧化鉀、醋酸鉛、茚三酮、氯化鐵、α-萘酚、間二硝基苯、氯仿、濃硫酸、鎂粉、氫氧化鈉 、鹽酸、苦味酸、濃鹽酸、冰醋酸等均為分析試劑。

1.4 方法

1.4.1 梓樹根皮水提取液的制備

取梓樹跟皮粉末5g，加50ml蒸餾水，浸泡24h，濾取部分濾液，供試檢氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)。剩余濾渣在50～60℃的水溶液中水浴加熱10min-1小時后過濾。濾液供檢試單糖、多糖、苷類、皂苷、酚類、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、生物堿鹽等。

1.4.2 梓樹根皮95%乙醇提取液的制備

取梓樹根皮粉末10g，加95%乙醇100ml加熱回流1小時，冷卻，濾過，得濾液。取1/2濾液作黃酮體、蒽醌、酚類、香豆素、內(nèi)酯、有機(jī)酸、鞣質(zhì)、萜類、強(qiáng)心苷、甾體類等檢查。

1.4.3 梓樹根皮酸水提取液的制備

將95%乙醇提取液剩余1/2濾液置水浴上濃縮成膏狀（至無醇味），加入5%鹽酸溶液搖之溶解，濾過，取濾液即得酸水提取液，作生物堿檢查。

1.4.4 梓樹根皮乙醚提取液的制備

取梓樹根皮粉末1g，加入石油醚 10ml，60℃～90℃水浴加熱 2～3個小時，過濾，濾液放在表面皿上，讓石油醚揮發(fā)，殘留物加95%的乙醇后進(jìn)行萜類、甾類、脂肪等項的檢查。

1.5 操作要點(diǎn)

操作要點(diǎn)實(shí)驗[5-6]

1.5.1 明膠試驗

取檢測液，加1%明膠溶液2～3滴，如變渾濁或有沉淀為鞣質(zhì)的正反應(yīng)。

1.5.2 堿性試驗

取檢測液，加 10% KOH液1～2滴，呈深紅色為蒽醌類正反應(yīng)。

1.5.3 堿性苦味酸反應(yīng)

取檢測液，加堿性苦味酸試劑1～3滴，觀察現(xiàn)象。

1.5.4 開環(huán)閉環(huán)試驗

取檢測液，加1% NaOH 1ml，于沸水浴上加熱10min后加10%鹽酸后，如溶液變渾濁，再加20%NaOH溶液堿化，則又轉(zhuǎn)為澄明，為內(nèi)酯、香豆素類的正反應(yīng)。

1.5.5 硅鎢酸試驗

取檢測液，加入硅鎢酸試劑，如有淡黃色或灰白色沉淀，則表明含有生物堿。

1.5.6 間二硝基苯試驗

取檢測液，加間二硝基苯試劑，出現(xiàn)黃褐色或紫色為甾體類正反應(yīng)。

1.5.7 氯仿-濃硫酸反應(yīng)

取氯仿液于干燥小試管內(nèi)，沿管壁小心加濃硫酸，如氯仿層呈紅色，濃硫酸層有綠色熒光，為植物甾醇的正反應(yīng)。

1.5.8 茚三酮試驗

取檢測液，滴于濾紙上，噴灑0.2%茚三酮后于110℃加熱后，觀察現(xiàn)象，如出現(xiàn)藍(lán)紫色或黃色斑點(diǎn)為氨基酸、多肽的正反應(yīng)。

1.5.9 加熱沉淀試驗

取檢測液，，加熱至沸，如出現(xiàn)渾濁或沉淀時，表明有蛋白質(zhì)。

1.5.10 α-萘酚試驗(Molish 反應(yīng))

取檢測液，，加10%α-萘酚乙醇溶液2～3滴，搖勻，沿試管壁緩緩加入1ml濃硫酸，界面出現(xiàn)紫色環(huán)，為糖、多糖、及苷類的正反應(yīng)。

1.5.11 堿性酒石酸銅試驗(Fehling反應(yīng))

取檢測液，，加新配制的堿性酒石酸銅試劑，在沸水浴上加熱10min。如產(chǎn)生磚紅色沉淀為還原糖的正反應(yīng)。

1.5.12 三氯化鐵試驗

取檢測液，，加1%三氯化鐵溶液1～2滴，呈藍(lán)色或綠色為酚類的正反應(yīng)。

1.5.13 泡沫試驗

取檢測液，在試管中，用力振搖2min，如產(chǎn)生的泡沫持續(xù)10min以上不消失，為皂苷的正反應(yīng)。

1.5.14 pH試紙檢測

取檢測液，滴于濾紙上，用0.05%溴酚藍(lán)乙醇溶液噴霧，在藍(lán)色背景上有黃色帶為有機(jī)酸的正反應(yīng)。

1.5.15 紫外燈下照射

取檢測液，滴于濾紙上，在紫外燈下觀察，發(fā)有天藍(lán)色、藍(lán)綠色或黃綠色熒光帶為香豆素類的正反應(yīng)。

1.5.16 雙縮脲實(shí)驗

取檢測液，加10%氫氧化鈉溶液兩滴，搖勻，再滴加0.5%硫酸銅溶液兩滴，搖勻，如呈紫色、紅色為蛋白質(zhì)或多肽的正反應(yīng)。

1.5.17 堿式醋酸鉛反應(yīng)

取檢測液，加飽和堿式醋酸鉛試劑，如有黃色沉淀，為黃酮類正反應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 水提取液成分定性檢測實(shí)驗的結(jié)果

表1 水提取液定性檢測實(shí)驗結(jié)果Table 1 Results of qualitative determination about water extract

2.2 95%乙醇、5%鹽酸提取液成分定性檢測的實(shí)驗結(jié)果

表2 95%乙醇、5%鹽酸提取液定性檢測實(shí)驗結(jié)果Table 2 Results of qualitative determination about ethanol extract

注：“++”表示反應(yīng)顯著，“+”表示有此反應(yīng)，“-”表示無此反應(yīng)

2.3 石油醚提取液成分定性檢測的實(shí)驗結(jié)果

表3 石油醚提取液定性檢測實(shí)驗結(jié)果Table3 Results of qualitative determination about Petroleum ether extract

結(jié) 論

通過對梓樹皮化學(xué)成分的初步研究，梓樹根皮中可能含有蛋白質(zhì)、氨基酸、多肽、皂苷、糖苷類、黃酮、有機(jī)酸類、生物堿、蒽醌類、內(nèi)酯、香豆素類等化學(xué)成分。

本文首次對梓樹根皮進(jìn)行化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗，初步確定了其可能含有多種有效成分，為進(jìn)一步對該植物的生物活性成分的確定、提取、分離、純化研究提供了試驗基礎(chǔ)。

[1]趙永昕,帕提古麗﹒馬合木提.新疆天山花楸不同部位總黃酮的提取及其含量測定[J].食品科學(xué),2005,26 (9)：414-415.

[2]王奇志,梁敬鈺.梓實(shí)化學(xué)成分研究[J].中草藥,2005,36(1)： 15-17.

[3]李朝虹,古代梓.楸考異[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2007, 6(4)： 20-24.

[4]王奇志,梁敬鈺.梓屬植物化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中草藥, 2003, 34(7)：2-4.

[5]王潤梅,岳志勁,張永芳.北芪菇化學(xué)成分的初步研究[J].山西大同大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版,2012,28( 4)： 32-34.

[6]任杰,劉洪位,郭莉,等.紫莖澤蘭化學(xué)成分初步研究[J].廣州化工,2011,39(15)：123 -124.