陸兵等

摘要：在盆栽條件下，以狹葉浙貝母（Fritillaria thunbergii Miq.）為材料，研究了浙貝母花期高溫脅迫條件下表油菜素內(nèi)酯（EBR）對(duì)浙貝母耐熱性和光合特性的影響。結(jié)果表明，0.10、0.50 mg/L EBR能明顯提高葉片中可溶性蛋白含量、SOD、POD和CAT活性，降低MDA含量，增強(qiáng)其抗氧化能力，緩解高溫脅迫導(dǎo)致的膜質(zhì)過(guò)氧化傷害；同時(shí)，EBR提高了葉片葉綠素含量、Pn、Gs和Tr，從而提高了高溫脅迫下浙貝母植株的光合作用；然而EBR并不能提高其Pro及可溶性糖含量，對(duì)葉片中類(lèi)胡蘿卜素及胞間CO2濃度（Ci）影響差異不大。結(jié)果表明，EBR通過(guò)提高高溫脅迫下浙貝母葉片可溶性蛋白及葉綠素含量、抗氧化酶活性，來(lái)降低體內(nèi)活性氧水平，維持較高的光合速率，以0.50 mg/L EBR效果最好。

關(guān)鍵詞：高溫脅迫；2，4-表油菜素內(nèi)酯；浙貝母（Fritillaria thunbergii Miq.）；耐熱性；光合特性

中圖分類(lèi)號(hào)：S567.23+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）16-3845-04

Abstract：The effects of epibrassionlide on thermotolerance and photosynthesis in leaves of F. thunbergii（xiaye） grown in pots were investigated under high temperature. The results showed that the treatment of 0.10，0.50 mg/L-1 2.4-epibrassionlide could effectively enhance antioxidation ability and alleviate injury of membrane lipid peroxidation caused by high temperature through increasing content of soluble protein， activities of superoxide dismutase（SOD），peroxidase （POD） and catalase（CAT），and decreasing malondialdehyde（MDA） content. EBR pretreatment improved the photosynthesis in F. thunbergii（xiaye）leaves by increasing the chlorophyll content， net photosynthetic rate（Pn），stomatal conductance（Gs），ranspiration rate（Tr）. EBR pretreatment couldnt increase contents of proline and soluble sugar， and had little effect on carotenoid content and intercellular CO2 concentration（Ci） in leaves. It is indicated that EBR pretreatment could suppress reactive oxygen levels， keep higher photosynthetic rate by increasing contents of soluble protein and chlorophyll， activities of antioxidant enzymes. The better alleviating effect on high temperature damage was 0.50 mg/L EBR.

Key words：high temperature stress；2，4-Epibrassinolide； Fritillaria thunbergii Miq.；thermotolerance； photosynthesis

浙貝母（Fritillaria thunbergii Miq.）是中國(guó)五大類(lèi)貝母中最主要的貴重藥材，被列為“浙八味”之首，歷版《中國(guó)藥典》均有收載。浙貝母喜溫涼的氣候條件，平均氣溫在17 ℃左右時(shí)，地上部莖葉生長(zhǎng)迅速，氣溫高到30 ℃時(shí)，浙貝母生長(zhǎng)受到抑制，造成植株枯萎倒苗。在浙貝母大田生產(chǎn)中，初夏高溫（30 ℃）將嚴(yán)重影響浙貝母的生長(zhǎng)期長(zhǎng)短[1]。因此，提高浙貝母的耐熱性是生產(chǎn)中一個(gè)急需解決的問(wèn)題。

油菜素內(nèi)酯（Brassinolide，BR）是植物正常生長(zhǎng)和發(fā)育所必需的，在植物體內(nèi)含量極低，但生理活性極高，目前已被公認(rèn)為一類(lèi)新型的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，被稱(chēng)為第六大類(lèi)植物激素。人工合成的高活性油菜素內(nèi)酯類(lèi)似物為表油菜素內(nèi)酯（EBR）。研究表明，BR不僅能影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育，例如能增強(qiáng)細(xì)胞的分裂和伸長(zhǎng)、提高光合速率、促進(jìn)光合作用、促進(jìn)生長(zhǎng)等，而且也參與植物的逆境反應(yīng)[2]。張永平等[3]用1.0 mg/L的EBR溶液處理甜瓜幼苗，能明顯促進(jìn)高溫脅迫下甜瓜幼苗的生長(zhǎng)，提高保護(hù)酶活性，增強(qiáng)植株抗氧化能力，促進(jìn)脯氨酸和可溶性蛋白含量升高，丙二醛（MDA）含量下降，能有效緩解高溫脅迫引起的膜脂過(guò)氧化傷害；同時(shí)能減輕高溫脅迫對(duì)光合作用的抑制作用。本試驗(yàn)以浙貝母為材料，研究葉面噴施不同濃度的EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母抗熱性相關(guān)生理指標(biāo)及光合作用的影響，旨在為EBR在提高浙貝母耐熱性方面的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與處理

試驗(yàn)于2012年9月至次年3月在南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院溫室大棚內(nèi)進(jìn)行。浙貝母采自于浙江省鄞州區(qū)。選擇完好的鱗莖進(jìn)行盆栽，盆高20 cm，直徑20 cm，基質(zhì)為均勻一致的輕黏壤土，每盆播種4個(gè)鱗莖，播種深度5～6 cm，置于溫室大棚內(nèi)，管理措施一致。從次年3月11日起于每天8：00分別噴施0.01、0.05、0.10、0.50、1.00 mg/L的表油菜素內(nèi)酯，以噴施清水為對(duì)照，葉片正反面均進(jìn)行噴施，至布滿液珠而不滴為度。連續(xù)噴施4 d后，將浙貝母苗移至光照培養(yǎng)箱（寧波江南儀器制造廠生產(chǎn)）內(nèi)，溫度為30 ℃/25 ℃（晝/夜）、光照度3 600 lx、光周期12 h/12 h （晝/夜），進(jìn)行高溫脅迫處理。處理3 d后，將浙貝母轉(zhuǎn)移至自然光照條件下取樣進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測(cè)定。為了避免水分脅迫，高溫處理期間保持土壤濕潤(rùn)，培養(yǎng)箱內(nèi)相對(duì)濕度保持在70%～80%。

1.2 測(cè)定項(xiàng)目與方法

葉綠素（Chl）含量采用浸提法[4]；采用LI-6400便攜式光合儀對(duì)葉片的凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、胞間CO2濃度（Ci）及蒸騰速率（Tr）進(jìn)行測(cè)定。

可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定；可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定；脯氨酸（Pro）含量測(cè)定采用酸性茚三酮比色法；超氧化物歧化酶（SOD）活性采用NBT光還原法測(cè)定；過(guò)氧化物酶（POD）活性采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定；過(guò)氧化氫酶（CAT）活性采用高錳酸鉀滴定法測(cè)定；丙二醛（MDA）含量用硫代巴比妥酸法[5]測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母光合特性的影響

2.1.1 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母光和色素含量的影響 由表1可知，EBR處理后，浙貝母在高溫脅迫后葉綠素a、葉綠素b和葉綠素總量均有明顯增加，在0.01～0.50 mg/L EBR范圍內(nèi)，三者與EBR濃度呈正相關(guān)。1.00 mg/L EBR下，葉綠素a、葉綠素b和葉綠素總量雖較對(duì)照增加了17.02%、24.73%和18.91%，差異顯著，但與0.50 mg/L相比，三者含量均有所下降。而各濃度EBR浙貝母在高溫脅迫后，其類(lèi)胡蘿卜素含量與對(duì)照均無(wú)顯著差異。

2.1.2 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母光和指標(biāo)的影響 由表2可知，EBR能顯著提高高溫脅迫后浙貝母葉片的Pn，隨著EBR濃度的增加Pn先升高后降低，在0.50 mg/L時(shí)，Pn達(dá)到最高，較對(duì)照增加了175.83%。EBR在增加Pn的同時(shí)，也提高了浙貝母葉片的Gs和Tr，在0.50 mg/L時(shí)，兩者同樣達(dá)到最高，較對(duì)照分別增加了179.41%和220.49%。在各濃度EBR下，浙貝母葉片Ci與對(duì)照相比均無(wú)顯著差異。

2.2 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母葉片滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

由表3可知，EBR對(duì)高溫脅迫后浙貝母葉片脯氨酸的含量有明顯影響。除EBR濃度為0.01 mg/L時(shí)，脯氨酸含量較對(duì)照高外，其他處理均低于對(duì)照，且隨著EBR濃度的升高，脯氨酸含量表現(xiàn)出先降后升的趨勢(shì)。在EBR濃度為0.10和0.50 mg/L時(shí)，葉片脯氨酸含量顯著低于對(duì)照，其他3個(gè)濃度處理較對(duì)照低，但并無(wú)顯著差異。

經(jīng)EBR處理，高溫脅迫后浙貝母葉片可溶性蛋白的含量與脯氨酸相比表現(xiàn)出相反的趨勢(shì)，即可溶性蛋白含量隨著EBR濃度的升高先上升后下降，且均高于對(duì)照。0.50 mg/L EBR處理的浙貝母葉片可溶性蛋白含量最高，比對(duì)照高出41.55%，之后下降。

在高溫脅迫后，經(jīng)EBR處理的浙貝母葉片可溶性糖含量均低于對(duì)照，0.01、0.05、0.10、0.50、1.00 mg/L EBR處理分別比對(duì)照下降了29.59%、9.59%、22.99%、1.52%和14.77%，其中0.05、0.50 mg/L EBR處理與對(duì)照無(wú)顯著差異，其他處理則顯著低于對(duì)照。

2.3 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母抗氧化代謝的影響

由表4可知，EBR處理對(duì)浙貝母葉片SOD、POD及CAT的活性和MDA的含量具有顯著影響，隨著EBR濃度的升高，3種酶活性均呈先升高后下降的趨勢(shì)，而MDA含量表現(xiàn)出相反的趨勢(shì)，表明EBR對(duì)浙貝母幼苗上述3種酶活性及MDA含量的影響具有劑量效應(yīng)。

與對(duì)照相比，EBR在0.01～1.00 mg/L的濃度范圍內(nèi)，均能提高浙貝母葉片SOD活性，其中EBR濃度為0.01 mg/L時(shí)SOD活性差異不顯著，其余處理差異顯著，且在0.50 mg/L時(shí)達(dá)到最大值，較對(duì)照上升了164.25%，隨之EBR處理對(duì)SOD活性的提高作用減弱。

與對(duì)照相比，0.01～0.50 mg/L的EBR處理均能提高浙貝母葉片POD活性，其中以0.50 mg/L處理活性最高，且差異顯著；當(dāng)EBR處理濃度為1.00 mg/L時(shí)，POD活性反而較對(duì)照下降了5.48%。

不同濃度EBR顯著提高了浙貝母葉片CAT活性，在EBR濃度為0.50 mg/L時(shí)達(dá)到最大值，各處理下CAT活性較對(duì)照分別升高了40.88%、74.91%、101.05%、144.44%和24.66%，差異顯著。

經(jīng)過(guò)EBR處理的浙貝母在高溫脅迫3 d后葉片MDA含量較對(duì)照均有不同程度的下降，且具有顯著差異，隨EBR濃度的增加，其含量表現(xiàn)出先降低后升高的趨勢(shì)。0.50 mg/L EBR處理下的MDA含量達(dá)到最低，與對(duì)照相比下降了36.33%，EBR濃度為1.00 mg/L時(shí)，MDA含量上升，但仍較對(duì)照低。

3 討論

正常環(huán)境下生長(zhǎng)的植物體內(nèi)，活性氧產(chǎn)生與淬滅處于動(dòng)態(tài)平衡，而高溫脅迫嚴(yán)重影響植物生物膜系統(tǒng)的穩(wěn)定性，導(dǎo)致活性氧代謝失衡，細(xì)胞內(nèi)活性氧大量積累而使細(xì)胞受到了氧脅迫，同時(shí)，高溫脅迫下光合作用普遍受到抑制[6]。浙貝母生長(zhǎng)期較短，高溫脅迫是其主要限制因素之一。

許多研究證明，BR能通過(guò)提高細(xì)胞保護(hù)酶活性和光合作用、促進(jìn)脯氨酸累積及改善細(xì)胞膜透性等方面來(lái)提高植物的抗逆性（抗旱性、抗冷抗寒性、抗熱性、抗鹽性、抗藥性、抗毒性）[7]。

3.1 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母光合特性的影響

光合作用是植物對(duì)于高溫脅迫最為敏感的生理反應(yīng)之一，往往在其他的高溫誘導(dǎo)傷害癥狀出現(xiàn)之前就已因高溫受到抑制[8]。高溫抑制植物的光合作用，導(dǎo)致光合速率下降可能是氣孔因素，也可能是非氣孔因素引起的。Farquhar等[9]認(rèn)為，如果Gs下降，而Ci維持不變甚至上升，則光合速率的下降應(yīng)是由葉肉細(xì)胞同化能力降低等非氣孔因素所致；只有Ci和Gs同時(shí)下降，才能表明光合速率的下降主要是由氣孔因素引起的。區(qū)分影響光合作用的氣孔和非氣孔因素有利于理解EBR促進(jìn)光合作用的作用位點(diǎn)。

本研究結(jié)果表明，高溫脅迫后，各EBR處理下的浙貝母葉片Gs均較對(duì)照高，但Ci并無(wú)顯著差異，因此，EBR并不是通過(guò)降低氣孔限制來(lái)提高Pn，這與張永平等[10]用EBR處理提高高溫脅迫后甜瓜葉片凈光合速率的結(jié)果一致。而Tr的升高說(shuō)明EBR能通過(guò)提高浙貝母高溫脅迫下的蒸騰速率來(lái)調(diào)節(jié)體溫和礦質(zhì)鹽的運(yùn)轉(zhuǎn)，從而減輕高溫傷害。葉綠素含量是影響光合作用光能吸收的重要因子，0.05～1.0 mg/L EBR均能顯著提高浙貝母葉綠素含量，這與阮英慧[11]的研究結(jié)果類(lèi)似。據(jù)此推測(cè)，EBR可能通過(guò)促進(jìn)光合機(jī)構(gòu)對(duì)CO2的利用能力及提高高溫脅迫后浙貝母葉片的葉綠素含量來(lái)提高光合作用。

3.2 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母葉片滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

滲透調(diào)節(jié)是抵抗逆境脅迫的一種重要方式，游離Pro、可溶性糖和可溶性蛋白是植物體內(nèi)3種主要的有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，在高溫環(huán)境下，植物主動(dòng)積累滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，抵抗熱脅迫的傷害[12]。植物體中高的Pro含量具有較強(qiáng)的滲透調(diào)節(jié)能力及保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用，與細(xì)胞內(nèi)的一些化合物形成類(lèi)似親水膠體的聚合物，有一定的保水作用[13]?？扇苄缘鞍缀康奶岣呖梢栽黾蛹?xì)胞的滲透勢(shì)和功能蛋白（如熱激蛋白）的數(shù)量，有助于維持細(xì)胞正常的代謝，提高植物的抗逆性[14]。逆境脅迫下，植物細(xì)胞中積累的可溶性糖參與滲透保護(hù)、滲透調(diào)節(jié)、碳的儲(chǔ)藏以及活性氧的清除[15]。研究表明，用EBR分別處理高溫脅迫下的黃瓜（48 ℃）和甜瓜（42 ℃）幼苗，能顯著增加幼苗體內(nèi)的可溶性蛋白和脯氨酸含量[10，16]。

本研究結(jié)果表明，高溫脅迫后，經(jīng)0.50 mg/L EBR處理的浙貝母葉片的可溶性蛋白含量顯著高于對(duì)照，但各濃度EBR并不能顯著提高其脯氨酸和可溶性糖的含量，與對(duì)照相比，其含量甚至較低，這與王炳奎[17]關(guān)于表油菜素內(nèi)酯對(duì)水稻幼苗抗冷性的影響研究中脯氨酸的變化類(lèi)似。因此，本研究認(rèn)為EBR并不能通過(guò)增加浙貝母葉片滲透性物質(zhì)的積累來(lái)提高其滲透調(diào)節(jié)能力，進(jìn)而提高其耐熱性。另外研究表明，植物耐熱性的產(chǎn)生與熱激蛋白的合成有關(guān)[18]。本研究中浙貝母可溶性蛋白含量增加的原因可能是由于高溫脅迫下EBR能促進(jìn)浙貝母合成更多的熱激蛋白，使植物耐熱性增強(qiáng)，但也不排除EBR降低了蛋白質(zhì)降解速率及難溶性蛋白變成可溶的可能。

3.3 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母抗氧化代謝的影響

高溫脅迫會(huì)使植株活性氧生成增加，膜質(zhì)過(guò)氧化，產(chǎn)生MDA，損傷生物膜系統(tǒng)，使細(xì)胞受到氧化脅迫?？寡趸富钚耘c植物活性氧代謝直接相關(guān)，其活性水平間接地反映了植物抗高溫脅迫的能力[6]。SOD、CAT、POD是植物體內(nèi)酶促防御系統(tǒng)的3個(gè)重要保護(hù)酶，SOD能催化植株體內(nèi)的歧化反應(yīng)，使■轉(zhuǎn)化為H2O2和O2，H2O2再通過(guò)CAT和POD分解成沒(méi)有毒害的H2O和O2，它們對(duì)植物體內(nèi)活性氧的清除起重要作用[19]。萬(wàn)正林等[20]報(bào)道0.50 mg/L EBR誘導(dǎo)番茄幼苗耐熱性的作用機(jī)理在于噴施處理EBR后，在高溫脅迫條件下能夠維持番茄幼苗較高的抗氧化酶活性，減少膜質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)生，從而保護(hù)細(xì)胞膜的熱穩(wěn)定性，提高其抗高溫能力。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.5 mg/L EBR下，高溫脅迫后浙貝母葉片SOD、POD和CAT活性較對(duì)照顯著增加，MDA含量顯著減少，這說(shuō)明EBR可以明顯提高浙貝母的耐熱性。

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3.2 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母葉片滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

滲透調(diào)節(jié)是抵抗逆境脅迫的一種重要方式，游離Pro、可溶性糖和可溶性蛋白是植物體內(nèi)3種主要的有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，在高溫環(huán)境下，植物主動(dòng)積累滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，抵抗熱脅迫的傷害[12]。植物體中高的Pro含量具有較強(qiáng)的滲透調(diào)節(jié)能力及保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用，與細(xì)胞內(nèi)的一些化合物形成類(lèi)似親水膠體的聚合物，有一定的保水作用[13]?？扇苄缘鞍缀康奶岣呖梢栽黾蛹?xì)胞的滲透勢(shì)和功能蛋白（如熱激蛋白）的數(shù)量，有助于維持細(xì)胞正常的代謝，提高植物的抗逆性[14]。逆境脅迫下，植物細(xì)胞中積累的可溶性糖參與滲透保護(hù)、滲透調(diào)節(jié)、碳的儲(chǔ)藏以及活性氧的清除[15]。研究表明，用EBR分別處理高溫脅迫下的黃瓜（48 ℃）和甜瓜（42 ℃）幼苗，能顯著增加幼苗體內(nèi)的可溶性蛋白和脯氨酸含量[10，16]。

本研究結(jié)果表明，高溫脅迫后，經(jīng)0.50 mg/L EBR處理的浙貝母葉片的可溶性蛋白含量顯著高于對(duì)照，但各濃度EBR并不能顯著提高其脯氨酸和可溶性糖的含量，與對(duì)照相比，其含量甚至較低，這與王炳奎[17]關(guān)于表油菜素內(nèi)酯對(duì)水稻幼苗抗冷性的影響研究中脯氨酸的變化類(lèi)似。因此，本研究認(rèn)為EBR并不能通過(guò)增加浙貝母葉片滲透性物質(zhì)的積累來(lái)提高其滲透調(diào)節(jié)能力，進(jìn)而提高其耐熱性。另外研究表明，植物耐熱性的產(chǎn)生與熱激蛋白的合成有關(guān)[18]。本研究中浙貝母可溶性蛋白含量增加的原因可能是由于高溫脅迫下EBR能促進(jìn)浙貝母合成更多的熱激蛋白，使植物耐熱性增強(qiáng)，但也不排除EBR降低了蛋白質(zhì)降解速率及難溶性蛋白變成可溶的可能。

3.3 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母抗氧化代謝的影響

高溫脅迫會(huì)使植株活性氧生成增加，膜質(zhì)過(guò)氧化，產(chǎn)生MDA，損傷生物膜系統(tǒng)，使細(xì)胞受到氧化脅迫?？寡趸富钚耘c植物活性氧代謝直接相關(guān)，其活性水平間接地反映了植物抗高溫脅迫的能力[6]。SOD、CAT、POD是植物體內(nèi)酶促防御系統(tǒng)的3個(gè)重要保護(hù)酶，SOD能催化植株體內(nèi)的歧化反應(yīng)，使■轉(zhuǎn)化為H2O2和O2，H2O2再通過(guò)CAT和POD分解成沒(méi)有毒害的H2O和O2，它們對(duì)植物體內(nèi)活性氧的清除起重要作用[19]。萬(wàn)正林等[20]報(bào)道0.50 mg/L EBR誘導(dǎo)番茄幼苗耐熱性的作用機(jī)理在于噴施處理EBR后，在高溫脅迫條件下能夠維持番茄幼苗較高的抗氧化酶活性，減少膜質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)生，從而保護(hù)細(xì)胞膜的熱穩(wěn)定性，提高其抗高溫能力。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.5 mg/L EBR下，高溫脅迫后浙貝母葉片SOD、POD和CAT活性較對(duì)照顯著增加，MDA含量顯著減少，這說(shuō)明EBR可以明顯提高浙貝母的耐熱性。

參考文獻(xiàn)：

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3.2 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母葉片滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

滲透調(diào)節(jié)是抵抗逆境脅迫的一種重要方式，游離Pro、可溶性糖和可溶性蛋白是植物體內(nèi)3種主要的有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，在高溫環(huán)境下，植物主動(dòng)積累滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，抵抗熱脅迫的傷害[12]。植物體中高的Pro含量具有較強(qiáng)的滲透調(diào)節(jié)能力及保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用，與細(xì)胞內(nèi)的一些化合物形成類(lèi)似親水膠體的聚合物，有一定的保水作用[13]。可溶性蛋白含量的提高可以增加細(xì)胞的滲透勢(shì)和功能蛋白（如熱激蛋白）的數(shù)量，有助于維持細(xì)胞正常的代謝，提高植物的抗逆性[14]。逆境脅迫下，植物細(xì)胞中積累的可溶性糖參與滲透保護(hù)、滲透調(diào)節(jié)、碳的儲(chǔ)藏以及活性氧的清除[15]。研究表明，用EBR分別處理高溫脅迫下的黃瓜（48 ℃）和甜瓜（42 ℃）幼苗，能顯著增加幼苗體內(nèi)的可溶性蛋白和脯氨酸含量[10，16]。

本研究結(jié)果表明，高溫脅迫后，經(jīng)0.50 mg/L EBR處理的浙貝母葉片的可溶性蛋白含量顯著高于對(duì)照，但各濃度EBR并不能顯著提高其脯氨酸和可溶性糖的含量，與對(duì)照相比，其含量甚至較低，這與王炳奎[17]關(guān)于表油菜素內(nèi)酯對(duì)水稻幼苗抗冷性的影響研究中脯氨酸的變化類(lèi)似。因此，本研究認(rèn)為EBR并不能通過(guò)增加浙貝母葉片滲透性物質(zhì)的積累來(lái)提高其滲透調(diào)節(jié)能力，進(jìn)而提高其耐熱性。另外研究表明，植物耐熱性的產(chǎn)生與熱激蛋白的合成有關(guān)[18]。本研究中浙貝母可溶性蛋白含量增加的原因可能是由于高溫脅迫下EBR能促進(jìn)浙貝母合成更多的熱激蛋白，使植物耐熱性增強(qiáng)，但也不排除EBR降低了蛋白質(zhì)降解速率及難溶性蛋白變成可溶的可能。

3.3 EBR對(duì)高溫脅迫下浙貝母抗氧化代謝的影響

高溫脅迫會(huì)使植株活性氧生成增加，膜質(zhì)過(guò)氧化，產(chǎn)生MDA，損傷生物膜系統(tǒng)，使細(xì)胞受到氧化脅迫?？寡趸富钚耘c植物活性氧代謝直接相關(guān)，其活性水平間接地反映了植物抗高溫脅迫的能力[6]。SOD、CAT、POD是植物體內(nèi)酶促防御系統(tǒng)的3個(gè)重要保護(hù)酶，SOD能催化植株體內(nèi)的歧化反應(yīng)，使■轉(zhuǎn)化為H2O2和O2，H2O2再通過(guò)CAT和POD分解成沒(méi)有毒害的H2O和O2，它們對(duì)植物體內(nèi)活性氧的清除起重要作用[19]。萬(wàn)正林等[20]報(bào)道0.50 mg/L EBR誘導(dǎo)番茄幼苗耐熱性的作用機(jī)理在于噴施處理EBR后，在高溫脅迫條件下能夠維持番茄幼苗較高的抗氧化酶活性，減少膜質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)生，從而保護(hù)細(xì)胞膜的熱穩(wěn)定性，提高其抗高溫能力。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.5 mg/L EBR下，高溫脅迫后浙貝母葉片SOD、POD和CAT活性較對(duì)照顯著增加，MDA含量顯著減少，這說(shuō)明EBR可以明顯提高浙貝母的耐熱性。

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