劉開慶， 向 誠(chéng)， 李 鵬， 李寶才△

(1.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院， 云南 昆明 650500； 2.澳門大學(xué)中華醫(yī)藥研究院中藥質(zhì)量研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 澳門 000856)

癲癇(Epilepsy)是一種以大腦局部病灶突發(fā)性的異常高頻放電并向周圍組織擴(kuò)散為特征的大腦功能障礙，可伴有明顯腦電圖改變，及可能伴隨著短暫性的運(yùn)動(dòng)、感覺、意識(shí)及自主神經(jīng)功能異常。其突出的臨床特點(diǎn)是具有反復(fù)發(fā)作性和每次發(fā)作的不可預(yù)知性，危害人們健康，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。但因其病因復(fù)雜，發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，目前比較公認(rèn)的機(jī)制包括GABA、c-fos，c-jun、Ca2+通道等3個(gè)機(jī)制。

中藥治療癲癇有悠久的歷史。然而，機(jī)制不明是當(dāng)前中藥抗癲癇研究的一大特點(diǎn)。目前對(duì)中藥治療癲癇的機(jī)制研究不成系統(tǒng)，模型散亂，不利于深入的研究。所以，本文總結(jié)近年來6味常用的抗癲癇中藥研究的成果，涉及GABA、c-fos，c-jun、Ca2+通道等3個(gè)機(jī)制，戊四氮、匹羅卡品、杏仁核、毛果蕓香堿、青霉素等5種抗癲癇模型，為抗癲癇中藥的深入研究提供參考。

1 癲癇機(jī)制

1.1 GABA機(jī)制 GABA是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)內(nèi)最具有代表性的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。一般認(rèn)為CNS中GABA含量降低是神經(jīng)細(xì)胞過度興奮，誘發(fā)同步放電，產(chǎn)生癲癇發(fā)作的重要原因之一[1，2]。GABA通過GABA受體發(fā)揮抑制性作用，GABAA受體與癲癇關(guān)系最為密切，興奮GABAA受體能抑制癲癇發(fā)作，抑制 GABAA受體則會(huì)誘發(fā)癲癇[3，4]。

1.2 c-fos，c-jun機(jī)制 Jensen等[5]研究顯示c-fos，c-jun表達(dá)的差異與癲癇發(fā)作的強(qiáng)度和致癇劑有關(guān)。在點(diǎn)燃動(dòng)物模型，c-fos，c-jun表達(dá)可以涉及雙側(cè)海馬、皮質(zhì)和杏仁體[6]。由于Fos和Jun蛋白可以參與信號(hào)傳遞系統(tǒng)各效應(yīng)酶的轉(zhuǎn)錄過程，調(diào)控其它多種基因的表達(dá)和靶蛋白合成[7]，在引起神經(jīng)元功能改變特別是在遠(yuǎn)期效應(yīng)方面具有重要作用[8]。因此，可以利用癲癇模型以c-fos，c-jun基因?yàn)橹笜?biāo)，來研究抗癲癇藥物的作用機(jī)制和藥理學(xué)特性。

1.3 Ca2+通道機(jī)制 癲癇發(fā)作Ca2+假說認(rèn)為胞內(nèi)Ca2+濃度的改變?cè)诎d癇發(fā)病過程中起著至關(guān)重要的作用。癲癇發(fā)作中電壓激活鈣通道可能在胞內(nèi)Ca2+濃度增加中起主要作用[9]，包括發(fā)作的起始和傳播。以海馬為例，Ca2+電流密度在癲癇發(fā)作中呈正調(diào)節(jié)狀態(tài)，將電壓激活鈣通道阻斷后癲癇發(fā)作也減輕。Szabo等[10]證實(shí)由紅藻酸誘發(fā)的癲癇模型中，海馬神經(jīng)元放電在很大程度上依賴胞內(nèi)Ca2+濃度。一些抗癲癇藥物可通過抑制Ca2+引起的興奮毒性，而對(duì)癲癇動(dòng)物起到神經(jīng)保護(hù)作用。

2 抗癲癇常用模型和機(jī)制

2.1 戊四氮(PTZ)模型 點(diǎn)燃癲癇模型對(duì)研究癲癇的發(fā)病機(jī)制及藥物治療機(jī)理是最為理想的模型[11]。戊四氮PTZ是GABA受體的拮抗劑，可以用于制造癲癇模型，因其作用于GABA受體，所以作用于GABA受體的藥物對(duì)PTZ模型比較敏感。

2.2 匹羅卡品模型 匹羅卡品模型是目前應(yīng)用最多的癲癇模型之一，該模型大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)所導(dǎo)致的海馬神經(jīng)元丟失、苔蘚纖維絲狀芽生，以及突觸重建正是癲癇自發(fā)性發(fā)作的組織病理學(xué)基礎(chǔ)[12]。實(shí)驗(yàn)大鼠行為學(xué)改變與腦電圖異常放電同步，模型建立后能維持較長(zhǎng)時(shí)間的反復(fù)癲癇發(fā)作，因而被認(rèn)為是當(dāng)前研究癲癇較實(shí)用的一種動(dòng)物模型[13]。

2.3 電點(diǎn)燃(Kindling)模型 電點(diǎn)燃模型是目前國(guó)際公認(rèn)的研究人類慢性癲癇較理想的動(dòng)物模型。在國(guó)外，因?yàn)殡婞c(diǎn)燃引起的自發(fā)性邊緣系統(tǒng)癲癇與人類顳葉癲癇在癥狀學(xué)、神經(jīng)病理學(xué)和行為學(xué)缺陷等方面均很相似而廣泛應(yīng)用。其中杏仁核所需刺激次數(shù)最少，在發(fā)作癥狀、腦電圖及對(duì)藥物的反應(yīng)性等方面都與人類復(fù)雜部分性癲癇相似，已經(jīng)成為研究人類復(fù)雜部分性癲癇最為理想的模型之一。

2.4 毛果蕓香堿模型 毛果蕓香堿能加強(qiáng)興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸的釋放，抑制GABA能的抑制性中間神經(jīng)元。胞內(nèi)鈣濃度和胞膜鈣流的增加在癲癇發(fā)作上起重要作用。在毛果蕓香堿局灶癲癇動(dòng)物模型的大腦皮層中，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外Ca2+下降與癲癇性發(fā)放相關(guān)，濃度下降始于癇性發(fā)放之前，提示過量Ca2+內(nèi)流在癇性活動(dòng)中的起始作用[14]，所以該模型可以用于探討癲癇的Ca2+機(jī)制。

2.5 青霉素模型 青霉素是經(jīng)典的致癇劑，其誘發(fā)的腦電圖(EEG)癲癇樣電活動(dòng)與人類失神性癲癇相似，而中樞運(yùn)動(dòng)皮層定位注射青霉素誘發(fā)驚厥則與人類部分運(yùn)動(dòng)性發(fā)作相似，其機(jī)制為青霉素可以引起抑制性突觸活動(dòng)減弱或興奮性突觸活動(dòng)增強(qiáng)，從而導(dǎo)致神經(jīng)元興奮性增高。青霉素致大鼠癲癇模型是一種極為有效的、操作簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物癲癇模型，其癲癇放電持久穩(wěn)定，可以用作抗癲癇藥物療效及癲癇發(fā)病機(jī)制的研究[15]。

3 中藥抗癲癇的機(jī)制和模型

3.1 GABA 靈芝(PTZ)，靈芝孢子粉可顯著提高癲癇大鼠皮質(zhì)和海馬部位抑制性氨基酸GABA免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞的含量，降低興奮性氨基酸谷氨酸的含量，同時(shí)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)明顯好轉(zhuǎn)。說明靈芝孢子粉可能通過對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)及其受體水平的調(diào)節(jié)、改善皮質(zhì)及海馬區(qū)的神經(jīng)電生理功能，抑制神經(jīng)元的高頻放電，降低神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性，減輕對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷，從而保護(hù)神經(jīng)元[16]。

石菖蒲(匹羅卡品)，石菖蒲的有效成分α-細(xì)辛醚抗驚厥、抗癲癇的作用機(jī)制主要是作用于GABA能系統(tǒng)，通過抑制GABA-T活性以降低GABA分解代謝，上調(diào)GAD67表達(dá)使GABA合成增加，上調(diào)GABAA受體表達(dá)以增強(qiáng) GABA介導(dǎo)的抑制功能[17]，維持大腦中興奮-抑制系統(tǒng)的平衡，并通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的離子轉(zhuǎn)運(yùn)，減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用，從而減少癲癇的發(fā)作。

3.2 c-fos，c-jun 青陽參(電點(diǎn)燃)，陳陽美等[18]用大鼠杏仁核點(diǎn)燃癲癇模型、免疫組化技術(shù)觀察青陽參皂苷對(duì)點(diǎn)燃癲癇大鼠腦內(nèi)c-fos，c-jun基因表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)青陽參能使點(diǎn)燃癲癇鼠皮層與海馬的c-fos，c-jun表達(dá)減弱，陽性細(xì)胞數(shù)減少，可見青陽參抗癲癇機(jī)制與降低腦內(nèi)c-fos，c-jun基因表達(dá)有關(guān)。因此，推測(cè)青陽參抗癇機(jī)制可能與降低c-fos，c-jun基因的表達(dá)，阻斷LRG的表達(dá)杜絕癲癇病灶的形成有關(guān)。

寬葉纈草(PTZ)，海馬內(nèi)苔蘚纖維發(fā)芽(MFS)所導(dǎo)致的突觸重組是癲癇病理生理過程中一個(gè)非常重要的變化，苔蘚纖維末梢上有大量的高親合性的海人酸受體及富含谷氨酸，可以引起興奮性突觸后電位，并且由于突觸重組打破了齒狀回內(nèi)分子層興奮-抑制平衡，引起癲癇發(fā)作[19]。近年研究顯示寬葉纈草可以抑制腦缺血后c-fos，c-jun的表達(dá)[20]，而在多種藥物、電刺激誘發(fā)的癲癇模型中，驚厥發(fā)作均可誘發(fā)腦內(nèi)c-fos。c-jun基因表達(dá)[21，22]。c-fos，c-jun和BDNF的高表達(dá)可能參與了MFS[21]。

3.3 Ca2+通道 鉤藤(毛果蕓香堿)，鉤藤的主要成分鉤藤堿能阻滯外Ca2+內(nèi)流和內(nèi)Ca2+釋放，能明顯縮短大鼠大腦皮層神經(jīng)元L-型鈣通道的平均開放時(shí)間，延長(zhǎng)其平均關(guān)閉時(shí)間，并降低其開放概率，表明鉤藤堿對(duì)大鼠大腦皮層神經(jīng)元L-型鈣通道有阻滯作用[23]，鉤藤堿和異鉤藤堿對(duì)電位依賴性鈣通道具有阻滯作用[24]，并對(duì)大鼠腦缺血損傷皮層神經(jīng)元內(nèi)鈣超載有抑制作用。

茯苓(青霉素)，茯苓總?cè)瓶裳娱L(zhǎng)青霉素誘發(fā)大鼠癇性放電潛伏期，減少癇波發(fā)放頻率、降低放電最高波幅，明顯抑制陣發(fā)性去極化飄移(paroxymal depolarization shifts，PDS)形成。PDS的產(chǎn)生過程與Ca2+密切相關(guān)[25]。細(xì)胞外Ca2+減少對(duì)癇性放電的同步化擴(kuò)散及發(fā)作具有重要作用，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高一方面可以引起細(xì)胞的去極化產(chǎn)生異常放電從而導(dǎo)致癲癇的產(chǎn)生及迅速傳播；另一方面細(xì)胞內(nèi)Ca2+可大量增加谷氨酸的釋放從而加劇發(fā)作的惡性循環(huán)[26]。

4 展望

中藥抗癲癇作用經(jīng)過臨床檢驗(yàn)有效，然而目前的實(shí)驗(yàn)室研究大多停留在提取物對(duì)動(dòng)物模型有效的層面上，而對(duì)中藥物質(zhì)基礎(chǔ)、抗癲癇的生物標(biāo)志物等機(jī)制研究還不深入，不系統(tǒng)。隨著對(duì)中藥藥物化學(xué)和癲癇病理生理的分子機(jī)制的深化研究，更多的常用抗癲癇中藥的機(jī)制可能可以闡明。癲癇對(duì)患者的大腦造成損害，長(zhǎng)期的癲癇病程可引起患者性格改變，出現(xiàn)怪異的行為，影響患者壽命，個(gè)別癲癇發(fā)作還可能危及生命。這些對(duì)于患者及其家人帶來的負(fù)擔(dān)是巨大和長(zhǎng)期的。迄今，對(duì)癲癇的發(fā)作的具體機(jī)制與規(guī)律還缺少全面的、本質(zhì)的理解，因而對(duì)癲癇不能做出客觀的、有效而完善的診斷、治療和預(yù)防。在目前的認(rèn)識(shí)程度上還僅停留在行為、細(xì)胞或分子水平的混雜表現(xiàn)中。但隨著神經(jīng)化學(xué)、分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等眾多新興生物科學(xué)及各種新技術(shù)、新方法的出現(xiàn)與發(fā)展，對(duì)于癲癇發(fā)作的認(rèn)識(shí)必將不斷的深入，對(duì)于癲癇的預(yù)防與治療也將能更有效的實(shí)施。隨著新理論與新技術(shù)的出現(xiàn)，癲癇發(fā)病機(jī)制的研究一定將會(huì)取得更大的發(fā)展。

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