陳興智，許建榮，吳敬林，李聚林，覃柳燕，周仲民△，雷 煒，趙安生（.廣西壯族自治區(qū)血液中心，廣西柳州 545005；.來賓市中心血站，廣西來賓 54600；.河池市中心血站，廣西河池 547000）

集中檢測是采供血機構(gòu)及醫(yī)療機構(gòu)血液標(biāo)本檢測的發(fā)展趨勢，對于采供血機構(gòu)而言，其優(yōu)點是可以將血液中心或較大型中心血站的優(yōu)勢惠及其他中心血站或分站，提高血液集中檢測區(qū)域的血液檢測技術(shù)水平，確保血液制品質(zhì)量。集中檢測部門充分發(fā)揮場地、設(shè)備、管理的優(yōu)勢，使檢測過程得到更好的控制?，F(xiàn)將桂中地區(qū)來賓中心血站與河池中心血站的血液標(biāo)本集中到廣西壯族自治區(qū)血液中心實驗室進行集中檢測的情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 來賓中心血站、河池中心血站及廣西壯族自治區(qū)血液中心采集的獻血者血液標(biāo)本；血液標(biāo)本當(dāng)天采集后2～8℃保存，于次日上午以冷鏈運輸?shù)姆绞竭\送至血液中心實驗室。標(biāo)本采集及運送的要求參照文獻［1］。

1.2 儀器與試劑 FAME20／30全自動酶免分析儀（瑞士HAMILTON），F(xiàn)reedom EVO前處理加樣系統(tǒng)（瑞士 TECAN），TIGRIS核酸分析系統(tǒng)及配套試劑（美國諾華）。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）檢測試劑（廈門新創(chuàng)、美國雅培），丙型肝炎病毒（HCV）抗體（抗－HCV）ELISA檢測試劑（珠海麗珠、北京萬泰），人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體（抗－HIV）ELISA檢測試劑（上?？迫A、美國BIO－RAD），梅毒螺旋體（TP）抗體（抗－TP）ELISA檢測試劑（廈門新創(chuàng)、珠海麗珠）。

1.3 方法

1.3.1 廣西壯族自治區(qū)血液中心實驗室檢測質(zhì)量評價 分析實行集中檢測后，廣西壯族自治區(qū)血液中心連續(xù)數(shù)年參加省級、國家級及國際級室間質(zhì)評活動的結(jié)果。

1.3.2 檢測流程 采用兩種不同廠家試劑進行標(biāo)本檢測，兩種試劑檢測結(jié)果均為陽性者，判為不合格；僅一種試劑檢測結(jié)果為陽性者，采用同種試劑復(fù)檢雙孔，雙孔均為陰性者，判為合格，雙孔均為陽性者，判為不合格，單孔陽性者，判為可疑。反判為不合格或可疑的標(biāo)本，對其相應(yīng)的血液制品進行報廢處理。在實行集中檢測前，所有檢測試劑由政府統(tǒng)一招標(biāo)，來賓及河池中心血站均選擇經(jīng)政府采購的兩種不同廠家試劑用于標(biāo)本檢測。實行集中檢測后，由廣西壯族自治區(qū)血液中心建立完善的質(zhì)量管理體系，除必須從通過政府招標(biāo)的中標(biāo)單位中選擇檢測試劑外，還同時對不同試劑進行血清盤考核，根據(jù)試劑包被片段情況，選擇具有不同互補片段的試劑進行組合，采用具有不同互補片段的不同試劑組合與隨機選擇的試劑組合對12 456例標(biāo)本進行抗－HIV檢測，對10 353例標(biāo)本進行HB－sAg檢測，對檢測陽性率進行比較，評價互補片段試劑組合的檢測有效性。

1.3.3 ELISA與核酸檢測結(jié)果比較 對2013年1～4月共計15 015例血液標(biāo)本ELISA及核酸檢測結(jié)果進行比較，并對ELISA檢測陰性、核酸檢測陽性標(biāo)本進行分類分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用卡方檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 參加各級室間質(zhì)評活動結(jié)果分析 2010～2013年廣西壯族自治區(qū)血液中心參加廣西壯族自治區(qū)室間質(zhì)評、衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評及中國國際輸血感染預(yù)防和控制（CITTC）室間質(zhì)評活動的結(jié)果見表1。

表1 集中檢測后廣西壯族自治區(qū)血液中心參加各級室間質(zhì)評活動結(jié)果（分）

2.2 片段互補試劑組合與隨機試劑組合檢測結(jié)果比較 將12 456例標(biāo)本隨機分為兩組，每組6 228例，分別采用片段互補試劑組合及隨機試劑組合進行抗－HIV檢測，兩種方法檢測陽性率比較差異統(tǒng)計學(xué)意義（χ2＝7.83，P＜0.05）。將10 353例標(biāo)本隨機分為兩組用于HBsAg檢測，片段互補試劑組合檢測5 184例，隨機試劑組合檢測5 169例，兩種方法檢測陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2＝9.15，P＜0.05）。見表2。

2.3 ELISA與核酸檢測結(jié)果比較 2013年1～4月共計15 015例標(biāo)本單獨ELISA檢測陽性率為1.04%（156／15 015），聯(lián)合核酸檢測陽性率為1.40%（210／15 015），兩種方法檢測陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2＝9.28，P＜0.05）。14 859例ELISA檢測陰性標(biāo)本中，核酸檢測陽性54例，其中HBV陽性15例，在所有ELISA檢測陰性、核酸檢測陽性標(biāo)本中占27.78%（15／54），見表3。

表2 不同組合試劑檢測抗－HIV和HBsAg陽性率［%（n／n）］

表3 ELISA檢測陰性標(biāo)本核酸檢測結(jié)果［n或n（%）］

3 討 論

隨著輸血醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，輸血療法已成為臨床不可替代的重要治療手段，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的重要組成部分，科學(xué)合理的輸血可以緩解患者病情、挽救患者生命［2］。然而，輸血存在一定的風(fēng)險，主要包括感染性風(fēng)險與非感染性風(fēng)險，感染性風(fēng)險又包括輸血過程中出現(xiàn)的感染及血源性感染等風(fēng)險。輸血安全涉及從獻血者靜脈采血到受血者靜脈輸注期間的每個環(huán)節(jié)，因此，必須采取綜合措施進行嚴格管理和監(jiān)控［3］。采供血過程中，招募低危獻血者是保證輸血安全的前提和基礎(chǔ)［4］。另一方面，血液標(biāo)本檢測以及方法學(xué)和試劑選擇也是保證血液制品安全性的重要措施。由于病原體感染后一定的“窗口期”，導(dǎo)致多數(shù)檢測方法存在一定的漏檢情況。例如，血清HIV標(biāo)志物篩檢陰性的血液制品仍有可能導(dǎo)致HIV傳播。據(jù)估計，美國每5例因輸血而導(dǎo)致HIV感染的患者中，有1例因輸注抗－HIV陰性血液制品所致［5］。為確保血液制品安全性及質(zhì)量，廣西壯族自治區(qū)血液中心積極參加廣西地區(qū)采供血機構(gòu)室間質(zhì)評活動、全國臨檢中心室間質(zhì)評活動，并同時參加了只有血液中心才能參與的CITTC室間質(zhì)評活動。表1結(jié)果顯示，廣西壯族自治區(qū)血液中心歷年參評成績優(yōu)秀，說明在試劑選擇、質(zhì)量管理、設(shè)備性能及操作技術(shù)方面是符合要求的。

受血液標(biāo)本檢測成本的影響，不同地區(qū)有可能采用不同的檢測試劑，尤其是部分中小型血站，資金來源緊張，技術(shù)人員技術(shù)水平和理念存在一定的局限性，一般采用在滿足政府招標(biāo)要求的試劑中隨機選擇兩種ELISA試劑進行檢測的工作模式。與隨機選擇兩種ELISA試劑進行檢測相比，集中檢測中采用的聯(lián)合使用兩種具有不同包被片段的試劑進行檢測，可形成有效的互補。表2結(jié)果顯示，采用兩種不同模式進行標(biāo)本檢測，在抗－HIV和HBsAg檢測陽性率方面，二者間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明集中檢測更有利于保證的血液制品的安全性。本研究中，15 015例標(biāo)本經(jīng)ELISA試劑檢測，共檢出不合格標(biāo)本156例，增加核酸檢測后，共檢出不合格標(biāo)本210例，兩種不同方法的檢測陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。ELISA技術(shù)檢測抗－HIV的“窗口期”為22d，檢測P24抗原可縮短至16d；檢測HBsAg的“窗口期”為56d，檢測抗－HCV的“窗口期”為71d。使用核酸檢測技術(shù)，HIV、HBV、HCV檢測“窗口期”分別縮短至11、20、21d［6］，采用單人份檢測時，“窗口期”更短。然而，核酸檢測設(shè)備較貴，中小血站很難普遍開展，集中檢測則可以合理配置資源，使參與集中檢測的中小血站利用血液中心的優(yōu)勢開展核酸檢測，從而有效縮短病原體檢測的“窗口期”，確保臨床輸血的安全性。為更好地評估血液集中檢測的優(yōu)勢，本研究對14 859例ELISA雙試劑檢測陰性的標(biāo)本進行核酸檢測，結(jié)果共檢出HBV陽性15例，比例達1.01‰（15／14 859），高于黃健國等［7］的報道。由于HBV極易發(fā)生變異，存在隱匿性HBV感染現(xiàn)象，導(dǎo)致0.3%～1.7%的ELISA檢測陰性血液仍有可能導(dǎo)致受血者感染HBV［8］。由此可見，在集中檢測工作中引入核酸檢測技術(shù)十分必要，能夠為血液制品安全性提供有效的保障。資料顯示：對獻血者標(biāo)本進行病原體核酸檢測，HBV殘留風(fēng)險降至200萬分之一，HCV殘留風(fēng)險降至114.9萬分之一，HIV殘留風(fēng)險降至146.7萬分之一，部分地區(qū)甚至可降至（5～7）百萬分之一［6］。另有報道：集中檢測前后，抗－HCV、HBsAg等指標(biāo)陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），估計與集中檢測采用互補片段試劑組合，檢測特異性升高，全自動酶免分析儀的使用避免了手工操作誤差等因素有關(guān)；集中檢測優(yōu)化了檢測試劑，使用先進的儀器設(shè)備，最大限度地降低了輸血感染性疾病的傳播［9］。以上資料說明：在適當(dāng)?shù)牡貐^(qū)建立集中檢測工作模式，有利于避免因中小血站工作條件有限導(dǎo)致的血液制品安全性問題，有效提高血液制品的質(zhì)量和臨床輸血的安全性。有研究顯示，通過從低危獻血者中采集血液，結(jié)合使用靈敏度較高的檢測技術(shù)，可以逐步減少和消除HCV經(jīng)輸血途徑感染［10］。通過參加各類室間質(zhì)評活動，加強日常室內(nèi)質(zhì)控工作的管理，嚴格按要求規(guī)范各項技術(shù)操作，強化技術(shù)人員的業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)和技術(shù)培訓(xùn)，系統(tǒng)地開展實驗室質(zhì)量管理，按要求對檢測設(shè)備進行定期維護、校準以確保設(shè)備穩(wěn)定性和準確性，有利于保證血液制品的質(zhì)量，進一步保障血液制品及臨床輸血的安全性。

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