李 楊（解放軍第二五二醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北保定 071000）

酒精性肝硬化（AC）是酒精性肝病的終末階段［1］，發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜。AC的發(fā)生與飲酒者的飲酒方式、性別、遺傳因素、營(yíng)養(yǎng)狀況、肝細(xì)胞反復(fù)損傷、肝組織再生及進(jìn)行性纖維化等因素密切相關(guān)。其病情進(jìn)展快，預(yù)后差，病死率較高，嚴(yán)重威脅人們的生命健康。近年來(lái)，多種生化指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在AC診斷中的作用引起了廣大醫(yī)務(wù)工作者的重視［2］。本研究通過(guò)對(duì)AC患者血清膽堿酯酶（CHE）、腺苷脫氨酶（ADA）和同型半胱氨酸（Hcy）水平動(dòng)態(tài)追蹤的聯(lián)合檢測(cè)，根據(jù)Child－Turcotte－Pugh（CTP）分級(jí)法將不同肝功能患者進(jìn)行分組比較，最后對(duì)其結(jié)果的變化進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。旨在探討血清CHE、ADA和Hcy聯(lián)合檢測(cè)在AC患者肝臟損害情況、疾病嚴(yán)重程度以及診斷等方面的臨床應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2014年1月本院傳染科及消化內(nèi)科經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，病理學(xué)、影像學(xué)或B超檢查確診的76例AC患者為試驗(yàn)組，其中男71例，女5例，年齡31～78，平均年齡（48.0±7.2）歲，以上病例診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合2010年美國(guó)肝病學(xué)會(huì)酒精性肝病指南解讀［3］標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。76例AC患者CTP分級(jí)依據(jù)肝性腦病、腹腔積液、血清膽紅素、凝血酶原時(shí)間和清蛋白檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行，其中A級(jí)29例，B級(jí)22例，C級(jí)25例，所有病例均排除膽管梗阻、急性肝損害、肝癌等情況。對(duì)照組為同期健康體檢者81例，其中男74例，女7例，年齡29～76歲，平均年齡（46.0±6.8）歲，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物、抗HCV均為陰性，無(wú)長(zhǎng)期飲酒史，并排除心腦血管病、糖尿病、肝、腎、內(nèi)分泌、腫瘤疾病或其他對(duì)肝臟損害有關(guān)的疾病。兩組受試者的年齡、性別等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 兩組受試者均于第2天晨起空腹采集靜脈血5 mL，室溫靜置30min后，3 500 r／min離心10min，分離血清標(biāo)本，置－20℃冰箱5d內(nèi)用于CHE、ADA和Hcy檢測(cè)，檢測(cè)標(biāo)本均排除溶血和脂血。CHE采用DGKC推薦法，ADA采用黃嘌呤氧化酶法，Hcy采用循環(huán)酶法。

1.3 試劑及儀器 檢測(cè)試劑盒、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均為四川省新成生物科技有限責(zé)任公司產(chǎn)品，試劑參數(shù)設(shè)置均嚴(yán)格遵照試劑盒說(shuō)明書(shū)規(guī)定進(jìn)行。儀器操作嚴(yán)格按照日立7600－020全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序以及醫(yī)院檢驗(yàn)科標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序受控文件進(jìn)行。標(biāo)本測(cè)定前血清CHE、ADA和Hcy的質(zhì)控測(cè)定結(jié)果均在控制范圍內(nèi)，所有校準(zhǔn)及檢測(cè)由日立7600－020全自動(dòng)生化分析儀完成。CHE低于3 500 U／L或超過(guò)11 000 U／L為陽(yáng)性。ADA正常值為小于25U／L，Hcy正常值為小于25.0 μmmol／L，檢測(cè)結(jié)果超過(guò)參考值上限為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；以α＝0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

試驗(yàn)組患者CHE水平明顯低于對(duì)照組；ADA、Hcy水平明顯高于對(duì)照組，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。隨著臨床CTP分級(jí)的級(jí)別增加，血清CHE水平逐漸降低，血清ADA、Hcy水平逐漸升高。見(jiàn)表2。

表1 兩組血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

表1 兩組血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.01；b P＜0.05。

組別 n CHE（U／L） ADA（U／L） Hcy（μmol／L）對(duì)照組81 8 243.1±1 241 .2 14 .21±5.19 10.23±4.21試驗(yàn)組 76 2 984.3±963.5a 36.91±9.64b 34.19±10.52b

表2 不同CTP分級(jí)血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

表2 不同CTP分級(jí)血清CHE、ADA和Hcy結(jié)果比較（）

注：與A級(jí)比較，aP＜0.05；與B級(jí)比較，b P＜0.01。

CTP分級(jí) n CHE（U／L） ADA（U／L） Hcy（μmol／L）29 3 985.2±824.0 21.31±6.12 18.54±3.74 B級(jí) 22 2 356.9±964.2b 29.34±8.11a 26.38±10.23a C級(jí) 25 1 652.1±1 141 .2b 45.36±11.21a 39.47±16.52 A級(jí)a

3 討 論

肝臟為機(jī)體合成代謝血清CHE、ADA和Hcy等物質(zhì)的主要器官之一，也是乙醇解毒代謝的主要器官，對(duì)全身物質(zhì)代謝及生物轉(zhuǎn)化具有十分重要的作用。目前AC的發(fā)病機(jī)制仍不清楚，大量研究資料表明［4－5］，乙醇代謝產(chǎn)物乙醛是造成肝臟和其他臟器損害的主要因素。乙醛與機(jī)體蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，進(jìn)一步導(dǎo)致肝細(xì)胞毒性，引起肝細(xì)胞變性、壞死及結(jié)締組織增生，從而為假小葉及肝細(xì)胞的再生結(jié)節(jié)替代，使肝內(nèi)的血液循環(huán)受到嚴(yán)重障礙，最后使肝臟質(zhì)地變硬。檢測(cè)血清酶學(xué)能反映肝細(xì)胞受損、壞死、細(xì)胞膜的通透性等肝臟功能狀況。因此，對(duì)患者進(jìn)行血清酶學(xué)水平檢測(cè)可評(píng)估肝細(xì)胞受損狀況［6－7］。血清CHE是一類(lèi)糖蛋白和水解各種不同的膽堿酯生成膽堿與羧酸的非特異性酯酶，絕大部分由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成后進(jìn)入血液，體內(nèi)以多種形式的同工酶存在。當(dāng)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞受損時(shí)，肝細(xì)胞壞死變性、纖維和結(jié)締組織增生。引起CHE合成減少，導(dǎo)致血清CHE水平降低［8］。本研究結(jié)果顯示，AC患者血清CHE水平顯著下降；同時(shí)在CTP分級(jí)中，C級(jí)AC患者血清CHE水平明顯低于A級(jí)和B級(jí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。說(shuō)明血清CHE水平降低的程度與肝細(xì)胞受損程度一致，其水平隨肝功能的下降而降低。可見(jiàn)檢測(cè)CHE水平，在AC診斷、肝功能評(píng)定及病情判斷等方面具有十分重要的指導(dǎo)意義。與余書(shū)武［9］的報(bào)道一致。

ADA是肝細(xì)胞的胞漿酶，參與機(jī)體免疫功能以及嘌呤核苷酸代謝，其相對(duì)分子質(zhì)量比相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)?。?0］。廣泛存在于機(jī)體各組織中，盲腸和小腸黏膜中水平最高，肝、腎和心臟水平較低。肝臟水平僅為小腸的8%左右，肝臟內(nèi)90.0%的ADA存在于肝細(xì)胞漿的水溶性部分。因此，其活性變化能夠準(zhǔn)確反映肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞損傷情況。當(dāng)肝細(xì)胞受損、壞死或通透性發(fā)生改變，使細(xì)胞膜的通透性增強(qiáng)，胞內(nèi)ADA迅速透過(guò)組織血液屏障釋放入血，導(dǎo)致血清中ADA水平升高。長(zhǎng)期飲酒可導(dǎo)致肝細(xì)胞葉酸缺乏，從而影響Hcy的代謝［11］。有研究表明，乙醇直接抑制肝細(xì)胞中蛋氨酸合成酶活性，導(dǎo)致Hcy甲基轉(zhuǎn)移酶活性和Hcy水平增加。血清Hcy可誘導(dǎo)肝細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞Ⅰ型前膠原和組織抑制劑金屬蛋白酶－1基因的表達(dá)［12］，引起肝臟纖維化的嚴(yán)重后果。本研究結(jié)果顯示，AC患者血清ADA和Hcy明顯升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。同時(shí)在CTP分級(jí)中，C級(jí)AC患者血清ADA和Hcy明顯高于A級(jí)和B級(jí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說(shuō)明血清ADA和Hcy水平在AC患者體內(nèi)有較明顯的改變，其水平改變能為AC患者疾病診斷、治療、肝細(xì)胞受損程度、肝臟纖維化程度、肝臟儲(chǔ)備功能以及病情判定提供可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

綜上所述，對(duì)AC患者進(jìn)行血清CHE、ADA和Hcy的聯(lián)合檢測(cè)，有助于準(zhǔn)確評(píng)估AC患者肝臟的損傷情況，可作為AC的病情了解、診斷和預(yù)后判斷的檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)判斷AC患者疾病嚴(yán)重程度和進(jìn)展具有重要的臨床指導(dǎo)意義。但由于本研究的患者數(shù)量有限，上述一些推測(cè)仍需要進(jìn)一步大量的實(shí)驗(yàn)及臨床工作來(lái)證實(shí)。

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