陳 敏,譚 璇,郭桂玲(廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院檢驗科,武漢 430070)
尿液中有形成分的檢測是診斷泌尿系統(tǒng)疾病,特別是腎臟疾病的重要實驗指標之一。UF-1000i全自動分析儀因其快速、操作方便以及敏感性好等特點,是目前用于檢測尿液有形成分最先進的儀器之一[1]。但由于尿液有形成分的多樣性、復雜性、干擾因素多以及儀器本身的局限性,常導致紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、管型檢測的假陽性或假陰性[2]。此時尿有形成分數(shù)并非真實數(shù)值,給臨床診斷、用藥造成一定的困擾。加上臨床醫(yī)生和檢驗人員仍習慣于干化學加顯微鏡鏡檢的報告模式(即鏡檢細胞數(shù)以最低數(shù)~最高數(shù)/HP報告),對于干化學加顯微鏡鏡檢檢測結(jié)果與顯微鏡鏡檢結(jié)果之間如何換算還存在著疑惑,有的甚至質(zhì)疑尿液分析儀結(jié)果的可靠性。為了提高尿液有形成分結(jié)果的準確性和真實性,找到兩種方法之間的內(nèi)在聯(lián)系,為臨床醫(yī)生提供有力的科學依據(jù)。本研究收集干化學中RBC、WBC陽性尿標本進行初篩,顯微鏡鏡檢將標本中無WBC干擾的標本挑出來,離心取尿液有形成分進行人工鏡檢,分析鏡檢細胞數(shù)與儀器測定細胞數(shù)之間的關(guān)系。
1.1 材料來源 2013年2月22日至4月23日門診及住院部干化學中RBC、WBC陽性標本各560例,其中男300例,女260例。
1.2 儀器與試劑 選用日本Sysmex公司的UF-1000i全自動分析儀,AX-4280尿干化學儀、Olympus顯微鏡以及所有原裝試劑、質(zhì)控液。
1.3 方法
1.3.1 UF-1000i全自動分析儀檢測 儀器使用之前用 UF-1000i、AX-4280原裝質(zhì)控液進行檢測,挑選門診及住院部干化學結(jié)果為RBC、WBC陽性尿標本,按照操作說明對尿標本進行檢測。
1.3.2 離心尿液直接涂片法檢測 儀器檢測完后將挑選出來的尿液標本10mL置于水平離心機中以1 500 r/min(離心半徑19cm)離心5min后,棄上清液留沉淀物0.2mL,混勻后取約20μL沉淀物于載玻片上,用18mm×18mm蓋玻片覆蓋后顯微鏡檢查。先用低倍鏡(×10)觀察全片,再用高倍鏡×40鏡頭觀察鑒定細胞成分。檢查10個高倍視野細胞,結(jié)果報平均值/HP[3],鏡檢結(jié)果均以平均值報告。若 UF-1000i全自動分析儀出現(xiàn)異常報告,而顯微鏡鏡檢呈現(xiàn)陰性,則重復充池進行第2次顯微鏡鏡檢,最終確定檢測結(jié)果。為了減少不同鏡檢者的變異性,所有標本的顯微鏡下檢測均由同一人完成,所有測試在2h之內(nèi)完成。
1.3.3 不同攜帶污染率計算 分別對RBC、WBC高值和低值尿標本進行試驗,高值連續(xù)檢測3次,結(jié)果為H1、H2、H3;低值連續(xù)檢測3次,結(jié)果為L1、L2、L3,按公式(L1-L3)/(H3-L3)×100%求攜帶污染率[4]。
1.4 統(tǒng)計學處理 利用Excel 2003對UF-1000i全自動分析儀RBC、WBC尿有形成分、鏡檢結(jié)果進行記錄,并使用SPSS17.0做相關(guān)分析、回歸方程計算。相關(guān)系數(shù)r=1.0~0.8為相關(guān)性好,0.8~0.6為相關(guān)性一般。
2.1 攜帶污染率檢測 3個水平RBC、WBC的攜帶污染率均<0.1%,符合本實驗室要求。見表1,表2。
表1 UF-1000i全自動分析儀檢測RBC的攜帶污染率(%)
表2 UF-1000i全自動分析儀檢測WBC的攜帶污染率(%)
2.2 UF-1000i全自動分析儀檢測與人工鏡檢之間的相關(guān)性及倍數(shù)關(guān)系 以RBC、WBC UF-1000i全自動分析儀檢測值為縱坐標,對應的鏡檢細胞數(shù)為橫坐標,得出回歸方程為:Y=10.3 X+6.1,斜率為10.3,Y 軸上截距為6.1,即 UF-1000i全自動分析儀的檢測出的細胞數(shù)是離心鏡檢細胞數(shù)的10.3倍,其相關(guān)系數(shù)r=0.849。見圖1。
圖1 UF-1000i全自動分析儀檢測與人工鏡檢之間的相關(guān)性
尿液有形成分檢查是診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要方法之一,可分為顯微鏡檢查法和尿液有形成分分析儀法[5]。UF-1000i全自動分析儀利用流式細胞術(shù)、電阻抗、熒光染色以及雙檢測通道技術(shù),采用紅色半導體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流標本,通過對從各粒子產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光信號轉(zhuǎn)換成的光電信號進行分析,對各種有形成分進行識別,同時提供RBC、WBC、結(jié)晶等成分的定量檢測數(shù)據(jù),快速篩選正常和異常的標本。UF-1000i全自動分析儀可部分取代顯微鏡檢查的同時,也受其他因素的影響,如:(1)RBC僅細胞膜被染色,所產(chǎn)生的熒光強度弱,草酸鈣結(jié)晶、類酵母細胞及其他細菌、精子等染色后熒光強度和散射光強度與RBC類似,當這些有型成分在尿中大量存在時,易被誤認為尿RBC[6];(2)只能對尿中完整細胞有形成分進行檢測,對破損的細胞不能檢測,存在漏診的情況;(3)尿液中的上皮細胞會被誤認為WBC。此時儀器所檢測出的RBC、WBC數(shù)并非真實值,直接報告會對臨床用藥或診斷造成一定的誤導,因此儀器得出的異常結(jié)果往往靠顯微鏡來驗證、校準和補充[7]。手工鏡檢依然是尿液分析的“金標準”[8]。
尿液有形成分分析儀單位為個/μL,屬于全定量方法;離心尿液直接涂片法單位為個/HP,屬于半定量方法。尿液有形成分定量對于任意一份標本,所含RBC、WBC的實際數(shù)量都是固有的,不管用什么方法檢測,都應該接近或等于這個固有值,而不應有明顯的差別,使不同方法具有可比性[9]。尿液分析儀是定量的方法,離心尿液直接涂片法是半定量的方法,對于同一份尿液標本而言,它們之間必然存在一定的內(nèi)在聯(lián)系。本研究對儀器測試RBC、WBC數(shù)的攜帶污染率進行了驗證,均符合本實驗室質(zhì)量手冊的要求[10]。且UF-1000i全自動分析儀與離心后人工鏡檢的尿液有形成分數(shù)值間的回歸方程為Y=10.3 X+6.1,斜率為10.3,Y 軸上截距為6.1,r=0.849,即UF-1000i全自動分析儀檢測出的細胞數(shù)是離心鏡檢細胞數(shù)的10.3倍;當鏡檢結(jié)果為0/HP時,UF-1000i全自動分析儀檢測結(jié)果應在0.0~6.1/μL范圍內(nèi)。當儀器有提示或干化學與尿液有形成分結(jié)果有出入時,需要標本離心進行人工鏡檢,得出的細胞數(shù)經(jīng)10.3的倍數(shù)關(guān)系進行轉(zhuǎn)換,可以為臨床提供較為準確的UF-1000i全自動分析儀尿有形成分結(jié)果,使臨床醫(yī)生對檢驗結(jié)果有更直觀的了解。對于圖1出現(xiàn)的部分離散值,可能是因為離心因素影響了細胞數(shù),這與其他報道一致[11]。不管哪一種方法,都必須依據(jù)各種檢驗法的優(yōu)缺點來使用[12-13],使之更好適應檢驗工作的需要。
綜上所述,有效地結(jié)合UF-1000i全自動分析儀與人工鏡檢尿液有型成分檢測,可提高檢測結(jié)果的有效性,對正確指導臨床治療有積極的作用。
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