雷明德，黃學(xué)忠，徐辛夷，陳曉飛，胡思釬，劉 芳（解放軍第一一八醫(yī)院，浙江溫州 325000）

銅綠假單胞菌廣泛分布于自然界，尤其是水和潮濕地帶，該菌對抗菌藥物有自然的抵抗力，因此是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌之一［1］，也是本院細(xì)菌耐藥預(yù)警監(jiān)測系統(tǒng)中的重點(diǎn)監(jiān)測菌［2］。近年來，銅綠假單胞菌在本院的感染率逐年上升，陽性檢出率居高不下，各抗菌藥物敏感率參差不齊，給臨床治療帶來困難。為了解本院銅綠假單胞菌的分布及抗菌藥物耐藥特點(diǎn)，作者結(jié)合2010年1月至2012年12月臨床分離的263株銅綠假單胞菌進(jìn)行耐藥性分析，為臨床合理使用抗菌藥物提供可靠的參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源 選擇本院2010年1月至2012年12月臨床送檢標(biāo)本3 177 份為研究對象，分析銅綠假單胞菌標(biāo)本來源、科室分布及對抗菌藥物敏感性分析。

1.2 方法 參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》三版的規(guī)定分離病原菌。以痰標(biāo)本為例：采集標(biāo)本前應(yīng)用涼開水漱口，清潔口腔和牙齒。用力咳出呼吸道深部的痰，標(biāo)本量適中。標(biāo)本收集后立即通過本院物流人員送至檢驗(yàn)科標(biāo)本中心，簽收時(shí)看下性狀是否合格（疑似口水均退回臨床科室）。檢驗(yàn)科內(nèi)部傳遞至微生物實(shí)驗(yàn)室，放入生物安全柜，打開酒精燈讓接種環(huán)過火三次消毒滅菌。挑取標(biāo)本帶有黏液、膿液及避開血痰等性狀不好的區(qū)域。接種在血培養(yǎng)皿并劃四分區(qū)。放入37℃培養(yǎng)箱放置24h；24h后挑取單個(gè)可疑菌落進(jìn)行下一步純分培養(yǎng)，再次放入37℃培養(yǎng)箱放置24h；24h后采用法國生物梅里埃公司的ATB Expression細(xì)菌鑒定系統(tǒng)，進(jìn)行鑒定及藥敏測定。細(xì)菌鑒定試條及藥敏試條，均為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品，培養(yǎng)箱為上海一恒科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的隔水式培養(yǎng)箱。嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 在Excel上進(jìn)行數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所有組間比較采用U檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 銅綠假單胞菌標(biāo)本來源 本院住院患者送檢標(biāo)本3 177 份，共分離檢出各類致病菌1 339 株，其中銅綠假單胞菌263株，占總檢出菌19.64%，高出相關(guān)報(bào)道［4］。分離自痰液211株，占80.22%；分泌物25株，占9.51%；膿液10株，占3.80%；中段尿8株，占3.04%；留置針5株，占1.90%；血液4株，占1.52%?？剖曳植贾袃?nèi)科92株、外科37株、綜合科90株、骨科8株、燒傷科22株及康復(fù)科14株。

2.2 銅綠假單胞菌體外藥敏試驗(yàn)檢測結(jié)果 銅綠假單胞菌對多黏菌素E、阿米卡星及妥布霉素敏感率分別為95.06%、94.30%及93.16%；美洛培南和亞胺培南敏感率均在50%以下。復(fù)方磺胺甲噁唑和復(fù)方氨芐西林僅有1例同時(shí)抗菌藥物敏感，其余均在70%～90%之間。見表1。

表1 對15種抗菌藥物的敏感率（n＝263）

2.3 不同性別患者來源菌株藥物敏感試驗(yàn)檢測結(jié)果比較 復(fù)方磺胺甲噁唑和復(fù)方氨芐西林為同一男性標(biāo)本。男性其他13種抗菌藥物敏感性均低于女性標(biāo)本。男性抗菌藥物敏感率前3位與女性相同，為多黏菌素E、阿米卡星及妥布霉素。其中阿米卡星和妥布霉素男女之間敏感性比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U＝2.74，P＜0.01；U＝2.08，P＜0.05），而多黏菌素 E男女間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U＝0.597，P＞0.05）。見表2。

2.4 不同疾病菌株藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果比較 腦出血等腦部疾病藥物敏感率前3位為阿米卡星（97.20%）、多黏菌素E（95.80%）及妥布霉素（95.10%），均高于其他外傷及感染的敏感率。同時(shí)敏感率高于其他外傷及感染的抗菌藥物還有慶大霉素及哌拉西林／他唑巴坦。阿米卡星、多黏菌素E（及妥布霉素三者間兩兩比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U＝1.18，P＞0.05；U＝1.897，P＞0.05；U＝1.327，P＞0.05）。見表3。

表2 不同性別患者來源菌株藥物敏感率分析

3 討 論

近年來，隨著抗菌藥物的使用，銅綠假單胞菌感染得到有效的控制，但同時(shí)各種抗菌藥物的耐藥率也居高不下［3］。本文中復(fù)方磺胺甲噁唑和復(fù)方氨芐西林的耐藥率已連續(xù)3年保持在97.6%以上，與有關(guān)報(bào)道一致［4－5］。在本文中出現(xiàn)1例敏感患者，77歲男性，兩次均以肺部感染入院。通過回顧性分析，發(fā)現(xiàn)兩次入院的藥敏結(jié)果由敏感轉(zhuǎn)變耐藥的有妥布霉素、阿米卡星、慶大霉素、頭孢吡肟、哌拉西林－他唑巴坦、替卡西林－克拉維酸及哌拉西林等7種，說明該患者在第一次住院期間大量使用這7種抗菌藥物。而復(fù)方磺胺甲噁唑和復(fù)方氨芐西林由耐藥轉(zhuǎn)為敏感卻值得進(jìn)一步探討。從本文中可以看出，當(dāng)前復(fù)方磺胺甲噁唑和復(fù)方氨芐西林已不適合本院銅綠假單胞菌感染的抗菌治療。

本研究結(jié)果顯示，亞胺培南和美洛培南在不同疾病及男女間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U＝1.53，P＞0.05；U＝1.76，P＞0.05。U＝0.30，P＞0.05；U＝0.17，P＞0.05）。說明近年來這兩種抗菌藥物的敏感率不斷下降，耐藥變得更加嚴(yán)峻［6］。本研究結(jié)果還顯示，阿米卡星在男性中敏感率為92.75%，而在女性中為100.00%，兩者比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（U＝2.74，P＜0.01）。說明不同感染菌及不同性別中的抗菌藥物應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果對癥下藥，切勿盲目用藥及經(jīng)驗(yàn)用藥［7］，這也再次驗(yàn)證本科建立細(xì)菌耐藥預(yù)警系統(tǒng)的重要性和必要性。本研究中內(nèi)科和綜合科占有全院69.20%的銅綠假單胞菌，多為腦出血等腦部疾病的老年患者，高齡、合并其他疾病、免疫功能下降、長期使用抗菌藥物等各種原因，導(dǎo)致這類患者感染機(jī)會增加［8－10］。

綜上所述，本院銅綠假單胞菌的耐藥性已十分嚴(yán)重，應(yīng)引起臨床醫(yī)生高度關(guān)注。結(jié)合本院細(xì)菌耐藥預(yù)警監(jiān)測系統(tǒng)，并根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物，避免濫用抗菌藥物，對于臨床治療和減少耐藥菌株的發(fā)生具有重要意義。

［1］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006.

［2］黃學(xué)忠，金彬彬，林佩佩，等.細(xì)菌耐藥監(jiān)測預(yù)警系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與應(yīng)用［J］.東南國防醫(yī)藥，2012，14（4）：301－304.

［3］黃學(xué)忠，劉瑾，林初希.利用Excel操作平臺創(chuàng)建檢驗(yàn)危急值報(bào)告檢索系統(tǒng)［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（19）：2288－2290.

［4］張鴻，申建維，孫秀琴，等.醫(yī)院感染銅綠假單胞菌的耐藥性變遷分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013，23（2）：449－451.

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