（1.柳州市惠農(nóng)化工有限公司，廣西 柳州 545616；2.廣西柑桔研究所，廣西 桂林 541004)

（1.柳州市惠農(nóng)化工有限公司，廣西 柳州 545616；2.廣西柑桔研究所，廣西 桂林 541004)

采用高效液相色譜法，以甲醇+水為流動(dòng)相，使用紫外檢測(cè)器、C18不銹鋼柱分離測(cè)定15%阿維·毒死蜱乳油中的有效成分阿維菌素和毒死蜱。結(jié)果表明，阿維菌素和毒死蜱的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.0016和0.0305；變異系數(shù)分別為0.91%和0.20%；平均回收率為99.27%和99.85%；線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9996和0.9994。

阿維菌素；毒死蜱；高效液相色譜法；分析

阿維菌素是一種大環(huán)內(nèi)酯雙糖類化合物，是從土壤微生物中分離的天然產(chǎn)物，對(duì)昆蟲(chóng)和螨類具有觸殺和胃毒作用并有微弱的熏蒸作用，無(wú)內(nèi)吸作用。但它對(duì)葉片有很強(qiáng)的滲透作用，可殺死表皮下的害蟲(chóng)，且殘效期長(zhǎng)，在柑橘上主要用于防治潛葉蛾、銹壁虱、紅蜘蛛[1]。毒死蜱為廣譜性有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑，具有觸殺、胃毒和熏蒸作用，在葉片上殘留期不長(zhǎng)，但在土壤中的殘留期較長(zhǎng)，因此對(duì)地下害蟲(chóng)的防治效果較好，在柑橘上主要用于防治矢尖蚧、柑橘木虱等害蟲(chóng)[2]。2種殺蟲(chóng)劑按照合理含量復(fù)配，既減少了單劑用量，擴(kuò)大了防治對(duì)象，又延緩抗藥性的發(fā)展，實(shí)現(xiàn)對(duì)多種害蟲(chóng)長(zhǎng)期、有效控制的目標(biāo)。

夏紅英等[3]報(bào)道了15%阿維菌素·毒死蜱水乳劑高效液相色譜分析方法，劉志勇等[4]報(bào)道了20%阿維·毒死蜱水乳劑的高效液相色譜定量分析方法，其均以甲醇+水作為流動(dòng)相，同時(shí)定量分析了阿維·毒死蜱水乳劑中阿維菌素和毒死蜱的含 量。翟立紅等[5]報(bào)道了6%阿維·毒死蜱乳油高效液相色譜分析方法，以乙腈+水+冰乙酸為流動(dòng)相，對(duì)6%阿維·毒死蜱乳油進(jìn)行了定量分析。但對(duì)于15%阿維·毒死蜱乳油的高效液相色譜分析卻沒(méi)有提及。本文采用高效液相色譜法，以甲醇+水為流動(dòng)相，使用C18反相柱和可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器，對(duì)15%阿維·毒死蜱乳油中阿維菌素和毒死蜱的含量同時(shí)進(jìn)行定量分析，其準(zhǔn)確度和精確度均能達(dá)到定量分析要求。該方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，分離效果好,可以作為企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)質(zhì)量檢測(cè)的參考方法。

1 試驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

試劑：甲醇(色譜級(jí))，水(新蒸二次蒸餾水)，阿維菌素(B1b+B1a標(biāo)樣，99.1%），毒死蜱標(biāo)樣(99.5%)，15%阿維·毒死蜱乳油。

儀器：島津LC-10AT高效液相色譜儀(帶可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器)，Thermo ODSC18(150mm×4.6mm，5μm)不銹鋼色譜柱，過(guò)濾器(濾膜孔徑約0.45μm)。

1.2 色譜操作條件

柱溫：室溫；流動(dòng)相：V(甲醇)︰V(水)=80︰20；流速：1.2mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm；進(jìn)樣體積：20μL。在上述色譜操作條件下，毒死蜱的保留時(shí)間約為5.3min，阿維菌素B1b的保留時(shí)間約為8.3min，阿維菌素B1a的保留時(shí)間約為10.7min（圖1、圖2）。

該操作條件是典型的色譜條件，可根據(jù)不同的儀器和色譜柱做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以獲得最佳效果。

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取0.01g阿維菌素(B1b+B1a)和0.10g毒死蜱標(biāo)樣(精確至 0.0002g)，置于100mL容量瓶中，加入甲醇溶解，定容，搖勻備用。

圖2 樣品液相色譜圖

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取1.0g(精確至0.0002g) 15%阿維·毒死蜱乳油試樣，置于100m L容量瓶中，加入甲醇溶解，定容，搖勻待測(cè)。

1.3.3 測(cè)定

在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液峰面積相對(duì)變化＜1.5%時(shí)，按下列順序進(jìn)行分析：標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液。

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中阿維菌素(B1b+B1a)、毒死蜱的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中阿維菌素、毒死蜱的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w(%)按下式計(jì)算：

式中：A1為試樣溶液中阿維菌素（或毒死蜱）峰面積的平均值；A2為標(biāo)樣溶液中阿維菌素（或毒死蜱）峰面積的平均值；m1為試樣的質(zhì)量，g；m2為標(biāo)樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中阿維菌素（或毒死蜱）的質(zhì)量百分含量，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

利用帶可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器的液相色譜儀在不同波長(zhǎng)下對(duì)試樣進(jìn)行分析，得到不同的色譜圖，經(jīng)過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，15%阿維·毒死蜱乳油中的有效成分阿維菌素和毒死蜱在235 nm波長(zhǎng)下均有較好的吸收，吸收比例與產(chǎn)品中2個(gè)有效成分的復(fù)配比例相適應(yīng)，且受雜質(zhì)影響較小，因此，選擇235 nm作為本方法的最佳吸收波長(zhǎng)。

2.1.2 色譜柱和流動(dòng)相的選擇

分離柱采用常用的C18柱，從分離時(shí)間和效果考慮，選擇150 mm×4.6 mm（i.d.）不銹鋼色譜柱，內(nèi)裝Thermo ODS-2 HYPERSIL C18填料。分別選用甲醇和水配成不同體積比的流動(dòng)相，反復(fù)篩選進(jìn)樣，得到不同的分離效果圖。經(jīng)多種分離情況對(duì)比，當(dāng)流動(dòng)相為V(甲醇)∶V(水)=80∶20時(shí)，樣品中阿維菌素和毒死蜱得到較理想的分離，且基線平穩(wěn)，峰形對(duì)稱。因此，選擇V(甲醇)∶V(水)=80∶20為流動(dòng)相。

2.2 分析方法線性相關(guān)性試驗(yàn)

分別稱取不同質(zhì)量的阿維菌素和毒死蜱標(biāo)樣，置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。按上述色譜操作條件分別進(jìn)樣。以阿維菌素（或毒死蜱）的稱樣量為橫坐標(biāo)，阿維菌素（或毒死蜱）的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制線性相關(guān)曲線如圖3、圖4。

圖3 阿維菌素線性關(guān)系圖

圖4 毒死蜱線性關(guān)系圖

2.3 分析方法精密度試驗(yàn)

采用上述方法對(duì)同一個(gè)15%阿維·毒死蜱乳油的樣品平行測(cè)定5次，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 分析方法精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 分析方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)

在已知含量的樣品中分別加入不同量的阿維菌素和毒死蜱標(biāo)樣，在上述操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)定添加回收率，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 分析方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

上述試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法可同時(shí)檢測(cè)15%阿維·毒死蜱乳油中的阿維菌素和毒死蜱含量，有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確及分離效果好的優(yōu)點(diǎn)，能滿足生產(chǎn)過(guò)程中的質(zhì)量控制要求。

[1] 中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng).www.chinapesticide.gov.cn/service/aspx/CPMX.ASPX?ID=3363AC24380E3C4A2553D0DE6FCDE 5C0.

[2] 中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng). http://www.chinapesticide.gov.cn/service/aspx/CPMX.ASPX?ID=7BE72A4EC2F2E693D570C931621 FB525.

[3] 夏紅英，壽青毅，等.15%阿維菌素·毒死蜱水乳劑高效液相色譜分析方法的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37(33)：16195-16196.

[4] 劉志勇，姚杰，等.20%阿維·毒死蜱水乳劑的高效液相色譜定量分析方法[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2010(5)：38-40.

[5] 翟立紅，畢富春，盧亮亮.阿維·毒死蜱乳油高效液相色譜分析方法研究[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2010,31(4)：36-39.

15%阿維·毒死蜱乳油高效液相色譜分析

梁永星1，鄧欣毅1，譚仁景1，韋慶書(shū)1，藍(lán)宏彥1，鄧明學(xué)2

Analysis of Abam ectin and Chlorpyrifos 15% EC by HPLC

LIANG Yong-xing1, DENG Xin-yi, TAN Renjing, WEI Qing-shu, LAN Hong-yan, DENG Ming-xue2
(1. Liuzhou Huinong Chemical Co. Ltd., Liuzhou 545616, China; 2.Guangxi Citrus Research Institute, Guilin 541004, China)

The quantitative analysis of abamectin and chlorpyrifos 15% EC by reversed phase HPLC using methanol + water as mobile phase, C18 column and UV detector was described. The results showed that the standard deviations of abamectin and chlorpyr ifos were 0.0016 and 0.0305, the variation coef f cients were 0.91% and 0.20%, the average recoveries were 99.27% and 99.85%, and the linear correlations were 0.9996 and 0.9994.

abamectin; chlorpyrifos; HPLC; analysis

O 657.7+2

A

1671-9905(2014)07-0048-03

廣西壯族自治區(qū)科技攻關(guān)項(xiàng)目(桂科攻1123003-2B)

梁永星(1980-)，男，廣西柳州市人，工程師，主要從事農(nóng)藥分析工作。Tel：0772-6668089，E-mail：503768450@qq.com

鄧明學(xué)(1964-)，男，廣西全州人，副研究員，主要從事柑橘病蟲(chóng)害防治和農(nóng)藥應(yīng)用技術(shù)研究。Tel：0773-5835506，E-mail：dengmxgl@163.com

2014-05-13