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        丁香油對(duì)斑馬魚(yú)麻醉效果的研究

        2014-10-09 07:49:02燕偉山姜宏波盧煥云于業(yè)輝
        現(xiàn)代畜牧獸醫(yī) 2014年2期
        關(guān)鍵詞:丁香油麻醉劑斑馬魚(yú)

        包 杰,燕偉山,姜宏波,盧煥云,于業(yè)輝

        (沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院,遼寧 沈陽(yáng) 100866)

        關(guān)于麻醉劑對(duì)魚(yú)類麻醉效果的研究、麻醉劑對(duì)血液成分的影響以及對(duì)麻醉作用機(jī)制、代謝途徑、喝麻醉劑的安全范圍的研究國(guó)內(nèi)外已有很多報(bào)道。目前魚(yú)用麻醉劑有近30種,但有些麻醉劑的麻醉效果不甚理想,有些對(duì)魚(yú)體安全性不可靠或者價(jià)格昂貴。丁香油為淡黃或無(wú)色的澄明油狀液,不溶于水,易溶于醇、醚或冰醋酸。丁香油由于其成本低、高效性以及較高的安全性被廣泛地應(yīng)用于親魚(yú)采卵、活魚(yú)運(yùn)輸以及活體手術(shù)過(guò)程等養(yǎng)殖生產(chǎn)和科學(xué)研究操作中[1-5]。李春梅等[6]在丁香油對(duì)鯽魚(yú)、錦鯉麻醉的效果中發(fā)現(xiàn),隨著丁香油藥液濃度的升高,鯽魚(yú)、錦鯉麻醉所需時(shí)間不斷縮短,兩者呈負(fù)相關(guān)。黃雪芹等[7]用不同濃度的丁香油麻醉中國(guó)對(duì)蝦幼蝦發(fā)現(xiàn),在50~400 mg/L的濃度范圍內(nèi),隨著丁香油濃度的增加,對(duì)蝦麻醉所需的時(shí)間縮短,而復(fù)蘇所需的時(shí)間不斷增加;丁香油濃度低于200 mg/L時(shí),麻醉對(duì)蝦的復(fù)蘇率可達(dá)100%;而在400 mg/L的藥液麻醉時(shí),對(duì)蝦的復(fù)蘇率僅有66.67%。由于斑馬魚(yú)是目前科研應(yīng)用極其廣泛的模式生物,因此,本試驗(yàn)以斑馬魚(yú)為研究對(duì)象,研究不同水溫和不同濃度的丁香油對(duì)斑馬魚(yú)的麻醉效果,以期為丁香油應(yīng)用于斑馬魚(yú)麻醉研究提供參考依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 試驗(yàn)材料 斑馬魚(yú)(Danio rerio)購(gòu)于水族零售市場(chǎng),共150尾,體格健壯,全長(zhǎng)1.3~2.2 cm、體重0.12~0.29 g,用塑料袋運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行暫養(yǎng)5 d,暫養(yǎng)溫度為23℃,試驗(yàn)前1 d停食使其排空糞便并適應(yīng)環(huán)境后用于試驗(yàn)。

        1.1.2 丁香油 丁香油(上海齒科材料廠生產(chǎn)),其有效成分是丁香酚,為淡黃色的油狀液體,不易溶于水。使用時(shí)按質(zhì)量1:9比例溶于酒精中,將此比例溶解的丁香油作為母液,靜置10 min后配置不同的試驗(yàn)濃度。

        1.2 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)設(shè)置4個(gè)溫度處理組(23℃和27℃)和4個(gè)丁香油濃度處理組(20、40、60和80 mg/L)共8個(gè)溫度、丁香油濃度組合。每個(gè)處理組選取泥鰍10尾,分別放置在8個(gè)1 000 mL的燒杯中,記錄試驗(yàn)?zāi)圉q的麻醉時(shí)間和蘇醒時(shí)間。麻醉時(shí)間是指魚(yú)被放入麻醉劑溶液開(kāi)始到魚(yú)體側(cè)翻的時(shí)間。將被麻醉的魚(yú)從藥液中取出放回到清水中,從這一時(shí)間起到能看到魚(yú)開(kāi)始以正常姿勢(shì)游泳所需的時(shí)間為復(fù)蘇時(shí)間。

        1.3 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 16.0軟件處理,采用ANOVA-LSD方法進(jìn)行差異性分析,以P<0.05作為差異顯著的標(biāo)志。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 斑馬魚(yú)在麻醉階段和恢復(fù)階段的行為特征 斑馬魚(yú)在丁香油麻醉作用下的麻醉行為:在高濃度丁香油中(80 mg/L)斑馬魚(yú)行為表現(xiàn)最為激烈,有狂游行為,但很快恢復(fù)平靜狀態(tài),鰓蓋停止張合;在低濃度丁香油中斑馬魚(yú)的行為表現(xiàn)相對(duì)平靜,其圍繞燒杯緩慢游動(dòng),而后逐漸減緩游動(dòng),身體失去平衡,側(cè)游或仰游,最后停止游動(dòng),鰓蓋仍有張合。斑馬魚(yú)在丁香油麻醉作用下蘇醒行為:麻醉的斑馬魚(yú)放入清水后初期表現(xiàn)為不動(dòng),后逐漸恢復(fù)知覺(jué),鰓蓋恢復(fù)張合,開(kāi)始倒游,身體逐漸恢復(fù)平衡。

        2.2 不同溫度和不同濃度丁香油對(duì)斑馬魚(yú)麻醉效果的影響 不同溫度和不同濃度丁香油對(duì)斑馬魚(yú)麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間的影響見(jiàn)表1。

        表1 溫度和不同濃度丁香油對(duì)斑馬魚(yú)的麻醉效果Tab le1 Effect oftemperatures and concentrations of clove oil on the anesthetic tim e and recovery tim e of Danio rerio

        研究結(jié)果表明,在23℃和27℃下,斑馬魚(yú)的麻醉時(shí)間均隨著丁香油濃度的增加而縮短,麻醉時(shí)間變化范圍分別為0.6~7.6 min和0.4~6.9 min;蘇醒時(shí)間則隨著丁香油濃度的增加而延長(zhǎng),蘇醒時(shí)間變化范圍分別為1.1~2.5 min和0.8~1.8 min。方差分析表明,在23℃和27℃溫度下,斑馬魚(yú)的麻醉時(shí)間在20 mg/L濃度處理組最長(zhǎng),顯著高于其他濃度處理組(P<0.05);復(fù)蘇時(shí)間在20 mg/L濃度處理組下最短,顯著低于其他濃度處理組(P<0.05)。同一濃度下,斑馬魚(yú)的麻醉時(shí)間和蘇醒時(shí)間均隨溫度的升高而縮短。

        3 討論

        3.1 不同濃度丁香油對(duì)斑馬魚(yú)麻醉效果的影響Dong-Won Seol1等[8]用丁香油(麻醉成分為丁香油)麻醉章魚(yú),認(rèn)為200 mg/L的丁香油能快速地麻醉章魚(yú)并能在較短的時(shí)間內(nèi)從麻醉狀態(tài)中恢復(fù)。張富林等[9]研究表明,20 mg/L、40 mg/L對(duì)鯉的麻醉效果最好,l0 mg/L、20 mg/L濃度丁香油對(duì)鯉的麻醉效果與50 mg/L、l00 mg/L MS-222的濃度大致相當(dāng),但是丁香油濃度超過(guò)160 mg/L對(duì)鯉進(jìn)行麻醉是不安全的。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在一定丁香油濃度范圍內(nèi)(20~80 mg/L),隨著丁香油藥液濃度的增加,麻醉斑馬魚(yú)所需的時(shí)間逐漸縮短,復(fù)蘇所需時(shí)間不斷增加。在80 mg/L下,有死亡現(xiàn)象發(fā)生,其他處理組復(fù)活率均為100%,因此,丁香油濃度超過(guò)80 mg/L對(duì)斑馬魚(yú)進(jìn)行麻醉具有不安全性。麻醉時(shí)間在20 mg/L時(shí)與其他處理組之間差異均極顯著,但其他組之間差異不顯著,這表明40 mg/L時(shí)為斑馬魚(yú)的最適濃度,高濃度對(duì)斑馬魚(yú)的麻醉效果不明顯。復(fù)蘇時(shí)間除在60 mg/L和80 mg/L下不顯著外其他各組之間差異顯著。丁香油濃度在40~60 mg/L時(shí)復(fù)蘇率達(dá)到100%且都較容易進(jìn)入深度麻醉,這與甘靜雯等[10]研究150~200 mg/L MS-222全體斑馬魚(yú)可短時(shí)間內(nèi)迅速進(jìn)入深度麻醉狀態(tài)的研究結(jié)果相識(shí),表明丁香油對(duì)斑馬魚(yú)具有很好的麻醉效果,麻醉的濃度較低,麻醉作用強(qiáng),且對(duì)比MS-222具有價(jià)格較低、使用方便、效果良好的優(yōu)點(diǎn),更適合用于斑馬魚(yú)的麻醉。

        3.2 不同溫度對(duì)斑馬魚(yú)麻醉效果的影響 水溫是影響麻醉劑麻醉效果的一個(gè)重要環(huán)境因素。趙艷麗等[11]用丁香油麻醉大黃魚(yú)發(fā)現(xiàn),水溫25~27℃時(shí),5 mg/L丁香油可在1 min內(nèi)使大黃魚(yú)魚(yú)種進(jìn)入麻醉狀態(tài),入水后3 min左右復(fù)蘇。杜浩等[12]發(fā)現(xiàn)MS-222在同一濃度下,溫度越高,美洲鰣達(dá)到麻醉狀態(tài)各階段的時(shí)間越短,完全復(fù)蘇則所需要的時(shí)間越長(zhǎng)。本試驗(yàn)中水溫對(duì)麻醉效果的影響表明,在相同濃度麻醉劑的作用下,隨水溫的升高(23~27℃),麻醉所需的時(shí)間和蘇醒時(shí)間均縮短,即隨水溫的升高同種劑量的丁香油的麻醉效果增強(qiáng),這可能是在高水溫時(shí),魚(yú)體代謝旺盛,心跳和呼吸頻率加快,麻醉藥液經(jīng)鰓絲滲透的速率亦加快,故隨著溫度的升高,在相同的麻醉劑含量下,魚(yú)體達(dá)到各麻醉階段的時(shí)間均縮短;在低水溫時(shí),魚(yú)體對(duì)麻醉藥物的吸收率降低,麻醉所需劑量高或者浸泡時(shí)間長(zhǎng)[13],因此,隨水溫的升高使其對(duì)斑馬魚(yú)的麻醉效果得以提高,即麻醉時(shí)間隨之縮短,與此同時(shí),當(dāng)水溫升高時(shí),作用于魚(yú)體的麻醉劑藥效減失加快,故將一經(jīng)麻醉的斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)入清水后,其蘇醒時(shí)間也就隨之縮短。

        4 結(jié)論

        丁香油濃度對(duì)斑馬魚(yú)具有很好的麻醉效果,丁香油濃度為40 mg/L下斑馬魚(yú)麻醉效果較好。斑馬魚(yú)的麻醉時(shí)間和蘇醒時(shí)間均隨溫度的升高而縮短。

        [1]李春梅,黃永.丁香油對(duì)鯽魚(yú)、錦鯉麻醉效果的研究[J].廣西輕工業(yè),2009,10(10):6-9.

        [2]黃雪芹,孔杰,張?zhí)鞎r(shí).丁香油對(duì)中國(guó)對(duì)蝦幼蝦麻醉效果的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(22):9572-9574.

        [3]鄔國(guó)民,何莉,何桂福.我國(guó)魚(yú)類麻醉運(yùn)輸?shù)默F(xiàn)狀及發(fā)展前景[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)論叢,1998,4:62-65.

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        [13]Coyle SD,Durborow RM,TidwellJH.Anesthetics in Aquaculture[M].SRAC Publication,2004:3900.

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