于廣威，柏連陽，羅 坤

（湖南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)藥研究所，湖南長沙410128）

中藥前胡，是一種多年生草本植物，味苦、辛，性微寒，中醫(yī)上常用于散風清熱，降氣化痰[1-2]。在課題組前期的研究中，發(fā)現(xiàn)前胡可有效地誘導水稻對稻瘟病的抗性，提高對稻瘟病的免疫能力，從而減少因稻瘟病造成的水稻減產(chǎn)[3-4]。篩選20%前胡微粉水懸浮劑的最佳配方和田間稻瘟病防治效果，旨在為稻瘟病的防治提供新的思路和途徑。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試藥劑為前胡（PeucedanumpraeruptorumDunn.），購自養(yǎng)天和連鎖藥房，經(jīng)湖南農(nóng)業(yè)大學羅寬教授鑒定。相應試劑為農(nóng)乳1601、分散劑NNO、FS3 000、TSP-33#、聚乙烯醇（PVA）、羥丙基甲基纖維素（HPMC）、黃原酸膠（XG）、羧甲基纖維素鈉（CMC）、乙醇、乙二醇、丙三醇、wgwin902#、白炭黑、有機膨脹土、硅藻土。操作儀器為敞口式砂磨機、NDJ-1 旋轉粘度計、SA-CP3 激光粒度分析儀、FW-80 高速萬能粉碎機、PHB2 000pH 計等。

1.2 試驗方法

1.2.1 潤濕分散劑的選擇 選擇農(nóng)乳1601、分散劑NNO、FS3000、TSP-33#等4種潤濕分散劑作為研究對象，考察不同潤濕分散劑對前胡微粉水懸浮劑體系懸浮穩(wěn)定性的影響。

1.2.2 增稠劑的選擇 選擇聚乙烯醇（PVA）、羥丙基甲基纖維素（HPMC）、黃原酸膠（XG）、羧甲基纖維素鈉（CMC）等4種增稠劑作為研究對象，考察不同增稠劑對前胡微粉水懸浮劑粘度及穩(wěn)定性的影響[5]。

1.2.3 抗凍劑的選擇 選擇乙二醇、丙三醇、乙醇和水溶性酰胺等作為研究對象，比較不同抗凍劑對前胡微粉水懸浮劑冷貯穩(wěn)定性的影響[6]。

1.2.4 穩(wěn)定劑的選擇 選擇wgwin902#、白炭黑、有機膨脹土、硅藻土等作為研究對象，比較不同穩(wěn)定劑添加對前胡微粉水懸浮劑體系穩(wěn)定性的影響[7]。

1.2.5 20%前胡微粉水懸浮劑加工方法 先用萬能粉碎機將干燥的前胡粉碎，過篩。按照配方將原藥、潤濕分散劑、增稠劑、防凍劑、穩(wěn)定劑、水等原料加入敞口砂磨機，經(jīng)過充分混合研磨后，過400 目篩分析20%前胡微粉水懸浮劑的細度，以99%原料通過400 目篩為準，停止研磨，將研磨好的原料裝瓶，分別測試20%前胡微粉水懸浮劑的各種性能[8]。

1.2.6 20%前胡微粉水懸浮劑的質量控制 熱貯穩(wěn)定性：參照農(nóng)藥懸浮劑國家標準規(guī)定，分別對20%前胡微粉水懸浮劑的熱貯穩(wěn)定性、低溫穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性、稀釋穩(wěn)定性、傾倒性等質量指標進行了檢測[9-10]。

1.2.7 盆栽試驗 在室內將水稻種子催芽，待水稻長至3 葉一心時接種稻瘟病菌。分別將20%前胡微粉水懸浮劑100 倍液、200 倍液、400 倍液、800 倍液，接種前3d 施藥，施藥后噴淋清水，防止秧苗嫩葉沾附藥劑而產(chǎn)生藥害，試驗設清水對照（CK），3 次重復。將生長至3 葉一心的水稻秧苗置于塑料方盒內（80cm×50cm×50cm），用噴霧塔機將上述孢子懸浮液均勻噴霧于葉片表面，每盒50～60ml，接種完畢加蓋塑料薄膜以利保濕，后移入溫室，調節(jié)溫度至25～28℃、相對濕度95%以上。黑暗28 h后，采用12 h 黑暗、12 h 光照交替培養(yǎng)，5～7 d 后調查。葉瘟調查參照國際水稻所稻瘟病葉瘟分級標準。藥效按式（1）、式（2）計算：

式中：CK1 為空白對照區(qū)施藥后病情指數(shù)；PT1 為藥劑處理區(qū)施藥后病情指數(shù)。

1.2.8 田間小區(qū)試驗 田間小區(qū)試驗在益陽市桃江縣高橋鄉(xiāng)進行，分別將20%前胡微粉水懸浮劑100 倍液、200 倍液、400 倍液、800 倍液，待水稻長至快3 葉一心時施藥一次，7 d 后再施藥一次；藥液量為50 L/667m2。于第2 次藥后7 d、14 d、21 d 各調查一次，共調查3 次。調查方法見上述盆栽試驗所用方法。

2 結果與分析

2.1 潤濕分散劑的選擇

本試驗采用流點法對多種潤濕分散劑進行了篩選，供試10種助劑前胡微粉的流點值均較小，并最終確定以“NNO+FS3000”為最適潤濕分散劑，該潤濕分散劑在5%用量條件下對前胡微粉的分散性能優(yōu)良，懸浮率達到98%（詳見表1）。

表1 潤濕分散劑的選擇

2.2 增稠劑的選擇

從篩選結果可知，以黃原酸膠并以用量0.2%、0.15%時制劑熱貯穩(wěn)定劑最好，但加0.2%黃原酸膠時制劑粘度較高，不易流動且易粘壁，加0.15%黃原酸膠時制劑流動性較好，故最終確定黃原酸膠為20%前胡水懸浮劑的增稠、懸浮穩(wěn)定劑，用量0.15%（詳見表2）。

表2 增稠劑的選擇

2.3 抗凍劑的選擇

對乙醇、乙二醇、丙三醇、水溶性酰胺作了對比試驗，試驗發(fā)現(xiàn)乙二醇和丙三醇的抗凍效果均較好，但是以丙三醇作防凍劑時，冷貯時雖然懸浮劑外觀無變化，但流動性明顯下降，而乙二醇則不存在這種情況。因此，選擇乙二醇作防凍劑較為恰當，考慮成本因素，選擇其用量為2%（詳見表3）。

表3 抗凍劑的選擇

2.4 穩(wěn)定劑的選擇

經(jīng)篩選發(fā)現(xiàn)，所選擇的4種穩(wěn)定劑中，有機膨潤土在0.5%和1.0%的用量下，熱貯穩(wěn)定性、低溫穩(wěn)定性和凍融穩(wěn)定性都較好，綜合考慮，選擇0.5%有機膨潤土作為20%前胡微粉水懸浮劑的穩(wěn)定劑。確認前胡微粉水懸浮劑的配方為：前胡微粉20%；NNO+FS3000 3%、XG0.15%、乙二醇2%、有機膨潤土0.5%、水（詳見表4）。

2.5 20%前胡微粉水懸浮劑各質量指標的測定

按照配方配制不同批次樣品，分6 批次檢測不同批次樣品的各項產(chǎn)品質量技術指標，懸浮率達94.26%以上、持久起泡性（1 min 后泡沫量）均小于15 ml，經(jīng)過熱貯、低溫、凍融等試驗后，懸浮性都良好（見表5）。對20%前胡微粉水懸浮劑的各項質量指標進行檢測，結果表明，20%前胡微粉水懸浮劑符合懸浮劑各項技術指標的所有要求。

表4 穩(wěn)定劑的選擇

2.7 盆栽試驗

20%前胡微粉水懸浮劑對水稻稻瘟病具有較好的誘抗效果，對稻瘟病的防治效果最高可達84.99%，隨著稀釋倍數(shù)的增加，20%前胡微粉水懸浮劑對稻瘟病的防治效果逐漸下降，當稀釋至800 倍液使用時，對稻瘟病的防治效果僅為57.30%。因此，初步確定20%前胡微粉水懸浮劑的使用劑量為100～400 倍液（詳見表6）。

2.8 田間小區(qū)試驗

表5 20%前胡微粉水懸浮劑質量技術指標的測定

表6 不同處理對水稻葉瘟的防治效果（盆栽）

20%前胡微粉水懸浮劑稀釋100 倍、200 倍、400倍、800 倍處理7 d 后對稻瘟病的防治效果分別為76.66%、76.88%、64.09%、57.71%，而對照藥劑三環(huán)唑在推薦劑量下對稻瘟病的防治效果為78.80%[3]，結果顯示20%前胡微粉水懸浮劑在100～200 倍液稀釋的劑量下對稻瘟病的防治效果與對照藥劑相當。20%前胡微粉水懸浮劑稀釋100 倍、200 倍、400 倍、800 倍處理14 d 后對稻瘟病的防治效果分別為76.92%、77.16%、64.99%、56.04%，處理21 d 后對稻瘟病的防治效果分別為76.06%、77.97%、63.40%、56.86%，20%前胡微粉水懸浮劑對稻瘟病的持續(xù)防治效果較好，可以起到對稻瘟病的長期有效控制(見圖1)。

3 結論與討論

圖1 20%前胡微粉水懸浮劑對稻瘟病的防治效果

通過對不同配方進行篩選比較，最終確定了20%前胡微粉水懸浮劑的優(yōu)化配方為：前胡微粉20%，潤濕分散劑（NNO+FS3000）5%，增稠劑黃原酸膠0.15%、抗凍劑乙二醇1%，穩(wěn)定劑有機膨潤土0.5%，水按照體積補足至100%。

盆栽試驗和田間小區(qū)試驗的結果均表明，20%前胡微粉水懸浮劑在100～200 倍液的劑量下對水稻稻瘟病的控制效果可達75%以上，基本上與稻瘟病常規(guī)化學防治藥劑三環(huán)唑的防效相當。

在稻瘟病的防治中，最普遍的方法是采用化學藥劑進行防治，三環(huán)唑是其中應用最普遍的藥劑。隨著化學藥劑的長期使用以及稻瘟病菌生理小種致病力的變異，導致化學藥劑對稻瘟病的防治效果逐年下降，因此，尋求新的防治稻瘟病的方法就成為必然。而本研究中開發(fā)的20%前胡微粉水懸浮劑是一種新型的植物源誘抗劑，對稻瘟病的作用機理和化學防治藥劑存在本質上的不同，它是通過誘導作物本身產(chǎn)生對稻瘟病的抗性，增強作物的免疫能力，從而最終達到防治稻瘟病的效果。在下一步研究中，可對20%前胡微粉水懸浮劑的配方進行優(yōu)化，從分子水平來研究20%前胡微粉水懸浮劑誘導水稻抗稻瘟病的機理，從而為其將來的田間推廣應用提供理論基礎。

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