郝鵬彬，馮玉康，楊琴，高晗，孫勝斌，劉鑫，姜國志，3

(1.神威藥業(yè)集團有限公司，河北 石家莊 051430； 2.神威藥業(yè)(四川)有限公司，四川 成都 611530； 3.中藥注射劑新藥開發(fā)技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

石菖蒲投料順序?qū)?fù)方麝香注射液的質(zhì)量影響

郝鵬彬1*，馮玉康1，楊琴1，高晗1，孫勝斌1，劉鑫2，姜國志1，3

(1.神威藥業(yè)集團有限公司，河北 石家莊 051430； 2.神威藥業(yè)(四川)有限公司，四川 成都 611530； 3.中藥注射劑新藥開發(fā)技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

目的：考察石菖蒲不同投料順序?qū)?fù)方麝香注射液的質(zhì)量影響。方法：采用不同的投料順序，分別將石菖蒲置于提取罐的最上層、中上層、中下層和底部，研究復(fù)方麝香注射液中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量變化。結(jié)果：不同的投料順序?qū)?fù)方麝香注射液中的α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量有很大的影響。結(jié)論：調(diào)整石菖蒲的投料順序，使其位于上部，以保證復(fù)方麝香注射液中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量穩(wěn)定。

石菖蒲；投料順序；α-細(xì)辛醚；β-細(xì)辛醚；復(fù)方麝香注射液

復(fù)方麝香注射液來源于古方“安宮牛黃丸”，其主要成分為人工麝香、郁金、石菖蒲、廣藿香、冰片、薄荷腦。復(fù)方麝香注射液對顱腦損傷、腦出血有治療作用，同時可以用于病毒性腦炎的輔助治療，在急性中毒和鎮(zhèn)痛方面也有很好的療效[1]。處方中的石菖蒲為天南星科植物石菖蒲AeorustatarinowiiSchott的干燥根莖，石菖蒲有開竅豁痰，醒神益智，化濕開胃的功能[2]。石菖蒲特征成分主要有甲基丁香酚、順式甲基異丁香酚、反式甲基異丁香酚、欖香素、細(xì)辛醚、α-細(xì)辛醚；現(xiàn)代藥理研究表明，其有效成分主要包括α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚等物質(zhì)[3-5]?，F(xiàn)行復(fù)方麝香注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只對麝香酮的含量作出規(guī)定[6]，為了提高產(chǎn)品質(zhì)量，安徽省藥品檢驗所提出了復(fù)方麝香注射液標(biāo)準(zhǔn)草案，并對方中石菖蒲的α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚的含量進行了限度要求。復(fù)方麝香注射液的原工藝中并未明確規(guī)定中藥投料順序，但是在實際生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)，處方中石菖蒲的投放順序?qū)τ谥苿┲械摩?細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量有很大影響。筆者主要探索研究石菖蒲不同投料順序?qū)?fù)方麝香注射液中α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚含量影響關(guān)系，明確最佳的投料順序。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Agilent 1260型液相色譜儀(安捷倫科技有限公司)；MH-5000可調(diào)式電熱套(北京科偉永興儀器有限公司)；CPA225D電子天平(德國賽多利斯)。

1.2 試藥

石菖蒲產(chǎn)自安徽，經(jīng)河北省藥品檢驗研究院孫寶惠老師鑒定為石菖蒲AeorustatarinowiiSchott的干燥根莖。β-細(xì)辛醚對照品(Sigma-Aldrich?，批號：S38558-429，純度：70%)，α-細(xì)辛醚對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100298-201203)，乙腈、甲醇(Fisher Scientific，色譜純)，其他化學(xué)試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚的含量測定方法[7]

2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.05%磷酸溶液(40∶ 60)為流動相，檢測波長：251 nm，柱溫：30 ℃，流速：1.0 mL·min-1。

2.1.2 對照品溶液的制備 分別精密稱取α-細(xì)辛醚對照品51.21 mg和β-細(xì)辛醚對照品61.13 mg，置250 mL、100 mL容量瓶中，加甲醇定容，分別制成質(zhì)量濃度為0.204 8 mg·mL-1的α-細(xì)辛醚對照品儲備液和質(zhì)量濃度為0.611 3 mg·mL-1的β-細(xì)辛醚對照品儲備液。

精密吸取6 mLα-細(xì)辛醚對照品儲備液與20 mLβ-細(xì)辛醚對照品儲備液，加甲醇定容至250 mL容量瓶中，得含α-細(xì)辛醚4.92 μg·mL-1、β-細(xì)辛醚34.23 μg·mL-1的混合對照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 精密量取復(fù)方麝香注射液樣品2 mL，置5 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.4 方法學(xué)考察

2.1.4.1 線性關(guān)系考察 分別精密吸取0.25，1，2，5，10 mLα-細(xì)辛醚對照品儲備液，再分別精密吸取0.5，2，5，10，25 mLβ-細(xì)辛醚對照品儲備液，對應(yīng)加入100 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，制成濃度梯度的對照品混合溶液。分別吸取濃度梯度的α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚對照品混合溶液各10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以進樣量X(μg)為橫坐標(biāo)，峰面積均值(Y)為縱坐標(biāo)，得α-細(xì)辛醚回歸方程：Y=3.41×106X+3 586.6，r=0.999 4(n=5)；β-細(xì)辛醚回歸方程：Y=5.04×106X-34 561，r=0.999 9(n=5)。

2.1.4.2 精密度試驗 精密吸取α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚混合對照品溶液，重復(fù)進樣測定6次，分別計算α-細(xì)辛醚與β-細(xì)辛醚峰面積，計算RSD分別為0.11%，0.14%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.1.4.3 重復(fù)性試驗 取同一批復(fù)方麝香注射液樣品(批號：1306211)6份，按2.1.3制備供試品溶液，取10 μL進樣，測定并計算供試品中α-細(xì)辛醚與β-細(xì)辛醚的平均質(zhì)量濃度分別為10.29，0.13 μg·mL-1，RSD分別為0.98%和1.21%，結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.1.4.4 加樣回收率試驗 精密稱取復(fù)方麝香注射液樣品(批號：1306211)6份，每份1 mL，精密加入α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚混合對照品溶液2 mL，定容至5 mL，按2.1.1項下操作，得α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚平均回收率分別為99.8%(RSD=1.3%)、100.5%(RSD=1.1%)。

2.2 石菖蒲不同投料順序時復(fù)方麝香注射液的制備

復(fù)方麝香注射液生產(chǎn)中各中藥投料順序見表1。

表1 復(fù)方麝香注射液生產(chǎn)中各中藥投料順序

稱取處方量的各味中藥，分別按照表1的順序進行投料，按照復(fù)方麝香注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[6]中制法項進行相應(yīng)提取，并制成相應(yīng)的制劑，實驗重復(fù)3次，高效液相色譜法檢測制劑中的α-細(xì)辛醚、β-細(xì)辛醚含量。

2.3 不同投料順序復(fù)方麝香注射液中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的測定

筆者共制備了18批復(fù)方麝香注射液，每份樣品測定3次，計算α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的平均含量，結(jié)果見表2。

表2 復(fù)方麝香注射液樣品中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的測定 μg·mL-1

3 討論

含量測定結(jié)果顯示，投料順序?qū)Ζ?細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量有顯著影響。石菖蒲投料的順序越晚，即石菖蒲位置越接近提取罐頂部，α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量越高；投料順序越早，即石菖蒲位置越接近提取罐底部，α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量越低，并且低于標(biāo)準(zhǔn)的限度要求。投料順序A和B的含量差別不大，可能與郁金呈致密的塊狀有關(guān)，無法吸收從石菖蒲中蒸餾出的揮發(fā)油；投料順序C和D的含量差別也不大，可能與人工麝香的加入量較其他中藥小有關(guān)，不足以影響α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚含量。但是A、B和C、D的含量差別較大，分析原因有可能是廣藿香為干燥地上部分，屬莖葉類中藥，密度小，體積大，位于廣藿香下的石菖蒲提取的揮發(fā)油要

經(jīng)廣藿香層才能揮發(fā)出來，大量的揮發(fā)油損失于廣藿香中，導(dǎo)致α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚含量較低。研究表明，調(diào)整石菖蒲的投料順序，使其位于上部，以保證復(fù)方麝香注射液中α-細(xì)辛醚和β-細(xì)辛醚的含量穩(wěn)定。

中藥制劑與化學(xué)藥有很大區(qū)別，藥材的不同產(chǎn)地、不同批次、不同提取體積和不同的投料順序都會對中藥制劑的質(zhì)量產(chǎn)生很大的影響。陳保華[8]在對投料問題的闡述中指出，要保證中藥制劑的質(zhì)量可控與穩(wěn)定就需要注重工藝的標(biāo)準(zhǔn)化。但是現(xiàn)在中藥制劑的生產(chǎn)過程中還有很多地方需要我們?nèi)ネ晟?，?xì)化工藝流程任重道遠(yuǎn)。

[1] 姚文冰.復(fù)方麝香注射液的臨床應(yīng)用[J].中國實用醫(yī)藥，2011，6(18)：245-246.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：85.

[3] 吳啟端，吳清和.石菖蒲的藥理研究進展[J].中藥新藥與臨床藥理，2006，17(6)：477-480.

[4] 杜毅，陳瑞軍，趙麗蓉，等.石菖蒲的化學(xué)與藥理研究新進展[J].山西中醫(yī)，2000，16(1)：53-54.

[5] 魏剛，方永奇，吳啟端，等.GC-MS建立醒神滴鼻液中間產(chǎn)物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中成藥，2001，23(9)：638-641.

[6] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編·中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分：經(jīng)絡(luò)肢體系·腦系分冊[S].2002：240-243.

[7] 湯佳佳，徐國兵，桂雙英.HPLC法測定復(fù)方麝香注射液中細(xì)辛醚[J].中成藥，2012，34(2)：289-292.

[8] 陳保華.中藥生產(chǎn)的變革——從提取物投料開始[J].中成藥，2008，30(6)：781-783.

InfluenceofAeorustatarinowiiSchottFeedingSequenceontheQualityofFufangShexiangInjection

HAO Pengbin1*，F(xiàn)ENG Yukang1，YANG Qin1，GAO Han1，SUN Shengbin1，LIU Xin2，JIANG Guozhi1，3

(1.ShinewayPharmaceuticalGroupCo.，Ltd.Shijiazhuang051430，China； 2.ShinewayPharmaceutical(Sichuan)Co.，Ltd.Chengdu611530，China； 3.NationalandProvincialJointEngineeringLaboratoryforNewDrugDevelopmentTechnologyofTCMInjection.Shijiazhuang051430，China)

Objective：Study on the influence ofAeorustatarinowiiSchott feeding sequence on the quality of Fufang Shexiang injection.Methods：A.tatarinowiiwere placed on the top，upper middle，lower middle and bottom of the extraction tank，respectively.The concentration ofα-asarone andβ-asarone in Fufang Shexiang injection were analysized.Results：Different feeding sequence had a great influence on the concentration ofα-asarone andβ-asarone in Fufang Shexiang injection.Conclusion：In order to ensure the concentration stability ofβ-asarone andα-asarone in Fufang Shexiang injection，A.tatarinowiishould be fed in the upper part of the extraction tank.

AeorustatarinowiiSchott；Feeding sequence；α-asarone；β-asarone；Fufang Shexiang injection

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.11.013

2014-03-14)

*

郝鵬彬，男，助理工程師，研究方向：中藥注射劑工藝與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；Tel：(0311)88030066，E-mail：haofei45a@gmail.com