申安華+王海龍+符世偉+丁登虎+李光華+李威+宋建宇+劉躍天

基金項(xiàng)目 國家科技支撐計(jì)劃“重大水電開發(fā)工程關(guān)鍵技術(shù)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)研究及集成示范”（2013BAB06B03）。

摘要對人工干法授精的后背鱸鯉（Percocypris pingi retrodorslis）胚胎發(fā)育進(jìn)行觀察，描述了從受精卵到卵黃囊期仔魚發(fā)育時(shí)期的時(shí)序和形態(tài)特征。后背鱸鯉的成熟卵近似于圓球形，呈金黃色，卵徑為2.3~2.5 mm;受精后13 min卵膜吸水膨脹，卵徑達(dá)3.3~3.8 mm。水溫在12.0~15.5 ℃的條件下，平均孵化時(shí)間為274 h。初孵仔魚全長為9.5~10.6 mm，8日齡仔魚初次攝食豐年蟲，進(jìn)入混合營養(yǎng)期。

關(guān)鍵詞后背鱸鯉；胚胎發(fā)育；初孵仔魚；觀察

中圖分類號Q959.46+8文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號 1007-5739（2014）11-0284-02

后背鱸鯉（Percocypris pingi retrodorslis）地方名為花魚，隸屬鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、鲃亞科（Ba-rbinae）、鱸鯉屬（Percocypris），分布于瀾滄江、怒江水系。后背鱸鯉體延長，略側(cè)扁，身體被較小鱗片，最大個(gè)體重達(dá)20 kg；后背鱸鯉為肉食性魚類，以捕食小型魚類為主，也食甲殼動(dòng)物、昆蟲及其幼蟲。由于過度捕撈等原因，自然水體中捕獲的后背鱸鯉數(shù)量已越來越少，現(xiàn)已成為瀕危珍稀魚類[1-3]。后背鱸鯉肉可入藥，有祛痰、止血、鎮(zhèn)靜的功效，主治急性與慢性支氣管炎、胃潰瘍出血、子宮出血、月經(jīng)過多。有關(guān)鱸鯉屬魚類的人工繁殖及其胚胎發(fā)育的研究已有一些報(bào)道[4-5]，但至今未見有關(guān)后背鱸鯉人工繁殖及胚胎發(fā)育方面的相關(guān)報(bào)道。通過對后背鱸鯉人工繁育，研究其胚胎發(fā)育情況，為進(jìn)一步開展其人工養(yǎng)殖和野生資源的保護(hù)提供基礎(chǔ)資料和理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)概況

供試魚種為后背鱸鯉，于2014年3月進(jìn)行人工繁殖親魚的試驗(yàn)，魚種取自于苗尾·功果橋水電站（華能瀾滄江水電公司）的魚類增殖站。于3月 15日進(jìn)行人工催產(chǎn)，♀∶♂＝4∶1，共催產(chǎn)4組。3月17日用人工干法授精獲卵42 904粒；取發(fā)育正常的受精卵為試驗(yàn)對象；受精卵或初孵仔魚在尤先科孵化器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。試驗(yàn)期間采用24 h微量滴水，控制水溫為12.0~15.5 ℃。器材為解剖鏡（Nikon，SMZ800）、顯微照相機(jī)。

1.2試驗(yàn)方法

根據(jù)胚胎發(fā)育的時(shí)期，對胚胎發(fā)育情況分次進(jìn)行觀察并進(jìn)行拍攝，胚胎發(fā)育時(shí)間以超過1/2的個(gè)體到各期的時(shí)間為準(zhǔn)，每次從孵化器內(nèi)隨機(jī)取樣20粒以上，使用解剖鏡觀察、拍攝和記錄胚胎發(fā)育全過程，相關(guān)數(shù)據(jù)測定利用Scope Photo軟件進(jìn)行。

2結(jié)果與分析

后背鱸鯉的胚胎發(fā)育各階段特征見表1，其圖序見圖1。后背鱸鯉的受精卵在受精后10~12 min之前（剛受精時(shí)）具有微黏性，其后黏性消失。成熟卵金黃色，卵黃豐富，為直徑2.3~2.5 mm的近圓球形，其胚胎發(fā)育過程包括8個(gè)階段，現(xiàn)將12.0~15.5 ℃水溫條件下各個(gè)階段特征分述如下。

2.1受精卵

受精卵時(shí)期，受精后約13 min卵徑達(dá)3.3~3.8 mm，卵膜吸水膨脹，卵黃四周呈不規(guī)則凸凹狀，開始活動(dòng)。

2.2胚盤期

胚盤期歷時(shí)2.1 h左右（受精卵至形成胚盤），卵周隙出現(xiàn)，進(jìn)行兩極分化，并且細(xì)胞質(zhì)漸漸隆起，向動(dòng)物極集中，形成胚盤。

2.3卵裂期

第1次卵裂始于受精后3.45 h，細(xì)胞按2的指數(shù)成倍遞增，細(xì)胞體積變小。4細(xì)胞期、8細(xì)胞期、16細(xì)胞期、32細(xì)胞期分別形成于受精后4.33、7.43、8.93、10.52 h，多細(xì)胞期于受精后13.85 h形成。

2.4囊胚期

隨著細(xì)胞繼續(xù)分裂，其體積越來越小，數(shù)量成倍增多，胚盤細(xì)胞界限逐漸不清晰，囊胚早期一般為受精后15.75 h，囊胚層內(nèi)層稍凹下，外層凸出，卵黃上出現(xiàn)隆起的囊胚。受精后18.60 h，進(jìn)入囊胚中期，囊胚的高度隨著細(xì)胞的持續(xù)分裂而下降，囊胚層僅略凸出，變得扁而薄，卵黃囊原生質(zhì)網(wǎng)不明顯。受精后22.98 h為囊胚晚期，囊胚內(nèi)外層與卵黃面貼合，變得更為扁平，胚環(huán)形成。

2.5原腸胚期

受精后約36.37 h進(jìn)入原腸早期，囊胚細(xì)胞下包2/5，出現(xiàn)明顯胚環(huán)；受精后約43.03 h進(jìn)入原腸中期，胚層下包1/2；受精后50.25 h為原腸晚期，胚層下包2/3。

2.6神經(jīng)胚期

受精后52.45 h，胚層下包4/5，神經(jīng)板雛形出現(xiàn)，胚體轉(zhuǎn)為側(cè)臥，頭端隆起明顯，大卵黃栓外露。

2.7器官形成期

受精后58.43 h左右胚層進(jìn)一步下包，卵黃進(jìn)一步減少形成小卵黃栓。受精后60.25 h左右胚層細(xì)胞完全包圍卵黃，胚孔封閉，胚體圍繞卵黃1/2，胚胎發(fā)育至胚孔封閉期、受精后63.93 h左右胚體中部出現(xiàn)4對肌節(jié)，神經(jīng)板頭端隆起、受精后71.53 h左右視泡出現(xiàn)，肌節(jié)12對、受精后79.48 h左右眼囊呈長橢圓形，肌節(jié)17對，胚體圍繞卵黃約2/3、受精后83.63 h左右頭部更加膨大，后腦出現(xiàn)小泡狀耳囊，肌節(jié)21對，受精后85.25 h左右胚體尾部開始膨大，與卵黃囊分離形成尾芽，肌節(jié)23對，受精后87.85 h左右尾泡形成，肌節(jié)27對，受精后90.25 h左右尾芽逐漸游離，尾部鰭褶形成，肌節(jié)29對，受精后95.77 h左右尾泡逐漸變小直至消失，胚胎開始表現(xiàn)出微弱的肌肉收縮，肌節(jié)30對，受精后100.05 h左右在眼杯口出現(xiàn)橢圓的晶體，耳囊下方出現(xiàn)鰓板、受精后104.30 h左右在脊索前，卵黃囊的前上方心臟原基形成、受精后124.65 h左右耳囊內(nèi)2粒耳石明顯可見，身體擺動(dòng)加快，肌節(jié)38～39對，受精后127.78 h左右嗅囊形成，受精后141.72 h左右，位于頭部腹下方、卵黃囊的前左上方的心臟開始搏動(dòng)，搏動(dòng)次數(shù)為30～50次/min。胚體在卵膜內(nèi)擺動(dòng)10～16次/min。

2.8孵出期

受精后190.10 h，個(gè)別胚體開始孵出。受精后274 h，1/2以上的胚體出膜，受精后290 h，全部胚體出膜。破膜前直至出膜，胚胎在膜內(nèi)不停轉(zhuǎn)動(dòng)和顫動(dòng)。初孵仔魚極少活動(dòng)，在孵化器底部靜臥，全長9.5~10.6 mm，身體除卵黃外呈透明，肛后長占全長的26%，卵黃囊后部為棒狀，前部橢圓形，心臟位于卵黃囊正前段，心律55~65次/min。

3結(jié)論與討論

試驗(yàn)觀察結(jié)果表明，后背鱸鯉魚卵具有如下特性：后背鱸鯉成熟卵為金黃色，沉性，含有大量的卵黃，與報(bào)道的其他鱸鯉屬魚類的卵相似，后背鱸鯉受精卵與其他鱸鯉受精卵一樣具有微黏性，但吸水10~12 min后，黏性可自行消失[6-7]。觀察后背鱸鯉胚胎發(fā)育情況，后背鱸鯉受精卵直徑2.3~2.5 mm，吸水后達(dá)3.3~3.8 mm。在12.0~15.5 ℃水溫的條件下，個(gè)別胚體出膜時(shí)間在受精后190.10 h，1/2以上胚體出膜時(shí)間為受精后274 h，全部胚體出膜為受精后290 h。整個(gè)孵化期耗時(shí)100 h。其胚胎發(fā)育的時(shí)間較長，說明后背鱸鯉的胚胎發(fā)育速度存在明顯的個(gè)體差異。

后背鱸鯉胚胎發(fā)育與初孵仔魚的結(jié)果表明，本批催產(chǎn)的后背鱸鯉親魚成熟較好，獲卵42 904粒，受精卵27 168粒，受精率達(dá)63.3%，孵出初孵仔魚24 557尾，孵化率達(dá)90.4%。受精卵在尤先科孵化器中進(jìn)行孵化和胚后發(fā)育，孵化率和仔魚的成活率都較高，取得了顯著的效果[8-10]。

4致謝

在試驗(yàn)研究與論文撰寫過程中，吳敬東 、李瓊麗 、熊燕 、艾莎、李梁、李穎睿、楊松麗、李國鋒、周睿等同志參與并提供幫助，在此一并致謝！

5參考文獻(xiàn)

[1] 樂佩綺.中國動(dòng)物志 硬骨魚綱 鯉形目（下卷）[M].北京：科學(xué)出版社，2000：50-51.

[2] 申安華，李光華，趙樹海，等.光唇裂腹魚胚胎發(fā)育與仔魚早期發(fā)育的研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2013，34（6）：76 -80.

[3] 王永明，岳興建.鱸鯉的胚胎發(fā)育[J].四川動(dòng)物，2013，32（4）：530-535.

[4] 張良松.異齒裂腹魚胚胎發(fā)育與仔魚早期發(fā)育的研究[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，26（3）：238-242.

[5] 冷云，徐偉毅，劉躍天，等.小裂腹魚胚胎發(fā)育的觀察[J].水利漁業(yè)，2006，26（1）：32-33.

[6] 吳青，王強(qiáng)，蔡禮明，等.齊口裂腹魚的胚胎發(fā)育和仔魚的發(fā)育[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，19（3）：218-221.

[7] 肖海，代應(yīng)貴.北盤江光唇裂腹魚個(gè)體繁殖力的研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2010，31（3）：64-70.

[8] 姚俊杰，何登菊，趙云龍，等.甌江彩鯉胚胎發(fā)育研究[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)，2012（2）：49-53，78.

[9] 賴見生，杜軍，何興恒，等.鱸鯉胚胎發(fā)育特征觀察[J].西昌學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2013（4）：15-17，31.

[10] 左鵬翔，李光華，冷云，等.鱸鯉胚胎發(fā)育研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2014（6）：273-274，283.

基金項(xiàng)目 國家科技支撐計(jì)劃“重大水電開發(fā)工程關(guān)鍵技術(shù)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)研究及集成示范”（2013BAB06B03）。

摘要對人工干法授精的后背鱸鯉（Percocypris pingi retrodorslis）胚胎發(fā)育進(jìn)行觀察，描述了從受精卵到卵黃囊期仔魚發(fā)育時(shí)期的時(shí)序和形態(tài)特征。后背鱸鯉的成熟卵近似于圓球形，呈金黃色，卵徑為2.3~2.5 mm;受精后13 min卵膜吸水膨脹，卵徑達(dá)3.3~3.8 mm。水溫在12.0~15.5 ℃的條件下，平均孵化時(shí)間為274 h。初孵仔魚全長為9.5~10.6 mm，8日齡仔魚初次攝食豐年蟲，進(jìn)入混合營養(yǎng)期。

關(guān)鍵詞后背鱸鯉；胚胎發(fā)育；初孵仔魚；觀察

中圖分類號Q959.46+8文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號 1007-5739（2014）11-0284-02

后背鱸鯉（Percocypris pingi retrodorslis）地方名為花魚，隸屬鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、鲃亞科（Ba-rbinae）、鱸鯉屬（Percocypris），分布于瀾滄江、怒江水系。后背鱸鯉體延長，略側(cè)扁，身體被較小鱗片，最大個(gè)體重達(dá)20 kg；后背鱸鯉為肉食性魚類，以捕食小型魚類為主，也食甲殼動(dòng)物、昆蟲及其幼蟲。由于過度捕撈等原因，自然水體中捕獲的后背鱸鯉數(shù)量已越來越少，現(xiàn)已成為瀕危珍稀魚類[1-3]。后背鱸鯉肉可入藥，有祛痰、止血、鎮(zhèn)靜的功效，主治急性與慢性支氣管炎、胃潰瘍出血、子宮出血、月經(jīng)過多。有關(guān)鱸鯉屬魚類的人工繁殖及其胚胎發(fā)育的研究已有一些報(bào)道[4-5]，但至今未見有關(guān)后背鱸鯉人工繁殖及胚胎發(fā)育方面的相關(guān)報(bào)道。通過對后背鱸鯉人工繁育，研究其胚胎發(fā)育情況，為進(jìn)一步開展其人工養(yǎng)殖和野生資源的保護(hù)提供基礎(chǔ)資料和理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)概況

供試魚種為后背鱸鯉，于2014年3月進(jìn)行人工繁殖親魚的試驗(yàn)，魚種取自于苗尾·功果橋水電站（華能瀾滄江水電公司）的魚類增殖站。于3月 15日進(jìn)行人工催產(chǎn)，♀∶♂＝4∶1，共催產(chǎn)4組。3月17日用人工干法授精獲卵42 904粒；取發(fā)育正常的受精卵為試驗(yàn)對象；受精卵或初孵仔魚在尤先科孵化器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。試驗(yàn)期間采用24 h微量滴水，控制水溫為12.0~15.5 ℃。器材為解剖鏡（Nikon，SMZ800）、顯微照相機(jī)。

1.2試驗(yàn)方法

根據(jù)胚胎發(fā)育的時(shí)期，對胚胎發(fā)育情況分次進(jìn)行觀察并進(jìn)行拍攝，胚胎發(fā)育時(shí)間以超過1/2的個(gè)體到各期的時(shí)間為準(zhǔn)，每次從孵化器內(nèi)隨機(jī)取樣20粒以上，使用解剖鏡觀察、拍攝和記錄胚胎發(fā)育全過程，相關(guān)數(shù)據(jù)測定利用Scope Photo軟件進(jìn)行。

2結(jié)果與分析

后背鱸鯉的胚胎發(fā)育各階段特征見表1，其圖序見圖1。后背鱸鯉的受精卵在受精后10~12 min之前（剛受精時(shí)）具有微黏性，其后黏性消失。成熟卵金黃色，卵黃豐富，為直徑2.3~2.5 mm的近圓球形，其胚胎發(fā)育過程包括8個(gè)階段，現(xiàn)將12.0~15.5 ℃水溫條件下各個(gè)階段特征分述如下。

2.1受精卵

受精卵時(shí)期，受精后約13 min卵徑達(dá)3.3~3.8 mm，卵膜吸水膨脹，卵黃四周呈不規(guī)則凸凹狀，開始活動(dòng)。

2.2胚盤期

胚盤期歷時(shí)2.1 h左右（受精卵至形成胚盤），卵周隙出現(xiàn)，進(jìn)行兩極分化，并且細(xì)胞質(zhì)漸漸隆起，向動(dòng)物極集中，形成胚盤。

2.3卵裂期

第1次卵裂始于受精后3.45 h，細(xì)胞按2的指數(shù)成倍遞增，細(xì)胞體積變小。4細(xì)胞期、8細(xì)胞期、16細(xì)胞期、32細(xì)胞期分別形成于受精后4.33、7.43、8.93、10.52 h，多細(xì)胞期于受精后13.85 h形成。

2.4囊胚期

隨著細(xì)胞繼續(xù)分裂，其體積越來越小，數(shù)量成倍增多，胚盤細(xì)胞界限逐漸不清晰，囊胚早期一般為受精后15.75 h，囊胚層內(nèi)層稍凹下，外層凸出，卵黃上出現(xiàn)隆起的囊胚。受精后18.60 h，進(jìn)入囊胚中期，囊胚的高度隨著細(xì)胞的持續(xù)分裂而下降，囊胚層僅略凸出，變得扁而薄，卵黃囊原生質(zhì)網(wǎng)不明顯。受精后22.98 h為囊胚晚期，囊胚內(nèi)外層與卵黃面貼合，變得更為扁平，胚環(huán)形成。

2.5原腸胚期

受精后約36.37 h進(jìn)入原腸早期，囊胚細(xì)胞下包2/5，出現(xiàn)明顯胚環(huán)；受精后約43.03 h進(jìn)入原腸中期，胚層下包1/2；受精后50.25 h為原腸晚期，胚層下包2/3。

2.6神經(jīng)胚期

受精后52.45 h，胚層下包4/5，神經(jīng)板雛形出現(xiàn)，胚體轉(zhuǎn)為側(cè)臥，頭端隆起明顯，大卵黃栓外露。

2.7器官形成期

受精后58.43 h左右胚層進(jìn)一步下包，卵黃進(jìn)一步減少形成小卵黃栓。受精后60.25 h左右胚層細(xì)胞完全包圍卵黃，胚孔封閉，胚體圍繞卵黃1/2，胚胎發(fā)育至胚孔封閉期、受精后63.93 h左右胚體中部出現(xiàn)4對肌節(jié)，神經(jīng)板頭端隆起、受精后71.53 h左右視泡出現(xiàn)，肌節(jié)12對、受精后79.48 h左右眼囊呈長橢圓形，肌節(jié)17對，胚體圍繞卵黃約2/3、受精后83.63 h左右頭部更加膨大，后腦出現(xiàn)小泡狀耳囊，肌節(jié)21對，受精后85.25 h左右胚體尾部開始膨大，與卵黃囊分離形成尾芽，肌節(jié)23對，受精后87.85 h左右尾泡形成，肌節(jié)27對，受精后90.25 h左右尾芽逐漸游離，尾部鰭褶形成，肌節(jié)29對，受精后95.77 h左右尾泡逐漸變小直至消失，胚胎開始表現(xiàn)出微弱的肌肉收縮，肌節(jié)30對，受精后100.05 h左右在眼杯口出現(xiàn)橢圓的晶體，耳囊下方出現(xiàn)鰓板、受精后104.30 h左右在脊索前，卵黃囊的前上方心臟原基形成、受精后124.65 h左右耳囊內(nèi)2粒耳石明顯可見，身體擺動(dòng)加快，肌節(jié)38～39對，受精后127.78 h左右嗅囊形成，受精后141.72 h左右，位于頭部腹下方、卵黃囊的前左上方的心臟開始搏動(dòng)，搏動(dòng)次數(shù)為30～50次/min。胚體在卵膜內(nèi)擺動(dòng)10～16次/min。

2.8孵出期

受精后190.10 h，個(gè)別胚體開始孵出。受精后274 h，1/2以上的胚體出膜，受精后290 h，全部胚體出膜。破膜前直至出膜，胚胎在膜內(nèi)不停轉(zhuǎn)動(dòng)和顫動(dòng)。初孵仔魚極少活動(dòng)，在孵化器底部靜臥，全長9.5~10.6 mm，身體除卵黃外呈透明，肛后長占全長的26%，卵黃囊后部為棒狀，前部橢圓形，心臟位于卵黃囊正前段，心律55~65次/min。

3結(jié)論與討論

試驗(yàn)觀察結(jié)果表明，后背鱸鯉魚卵具有如下特性：后背鱸鯉成熟卵為金黃色，沉性，含有大量的卵黃，與報(bào)道的其他鱸鯉屬魚類的卵相似，后背鱸鯉受精卵與其他鱸鯉受精卵一樣具有微黏性，但吸水10~12 min后，黏性可自行消失[6-7]。觀察后背鱸鯉胚胎發(fā)育情況，后背鱸鯉受精卵直徑2.3~2.5 mm，吸水后達(dá)3.3~3.8 mm。在12.0~15.5 ℃水溫的條件下，個(gè)別胚體出膜時(shí)間在受精后190.10 h，1/2以上胚體出膜時(shí)間為受精后274 h，全部胚體出膜為受精后290 h。整個(gè)孵化期耗時(shí)100 h。其胚胎發(fā)育的時(shí)間較長，說明后背鱸鯉的胚胎發(fā)育速度存在明顯的個(gè)體差異。

后背鱸鯉胚胎發(fā)育與初孵仔魚的結(jié)果表明，本批催產(chǎn)的后背鱸鯉親魚成熟較好，獲卵42 904粒，受精卵27 168粒，受精率達(dá)63.3%，孵出初孵仔魚24 557尾，孵化率達(dá)90.4%。受精卵在尤先科孵化器中進(jìn)行孵化和胚后發(fā)育，孵化率和仔魚的成活率都較高，取得了顯著的效果[8-10]。

4致謝

在試驗(yàn)研究與論文撰寫過程中，吳敬東 、李瓊麗 、熊燕 、艾莎、李梁、李穎睿、楊松麗、李國鋒、周睿等同志參與并提供幫助，在此一并致謝！

5參考文獻(xiàn)

[1] 樂佩綺.中國動(dòng)物志 硬骨魚綱 鯉形目（下卷）[M].北京：科學(xué)出版社，2000：50-51.

[2] 申安華，李光華，趙樹海，等.光唇裂腹魚胚胎發(fā)育與仔魚早期發(fā)育的研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2013，34（6）：76 -80.

[3] 王永明，岳興建.鱸鯉的胚胎發(fā)育[J].四川動(dòng)物，2013，32（4）：530-535.

[4] 張良松.異齒裂腹魚胚胎發(fā)育與仔魚早期發(fā)育的研究[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，26（3）：238-242.

[5] 冷云，徐偉毅，劉躍天，等.小裂腹魚胚胎發(fā)育的觀察[J].水利漁業(yè)，2006，26（1）：32-33.

[6] 吳青，王強(qiáng)，蔡禮明，等.齊口裂腹魚的胚胎發(fā)育和仔魚的發(fā)育[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，19（3）：218-221.

[7] 肖海，代應(yīng)貴.北盤江光唇裂腹魚個(gè)體繁殖力的研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2010，31（3）：64-70.

[8] 姚俊杰，何登菊，趙云龍，等.甌江彩鯉胚胎發(fā)育研究[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)，2012（2）：49-53，78.

[9] 賴見生，杜軍，何興恒，等.鱸鯉胚胎發(fā)育特征觀察[J].西昌學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2013（4）：15-17，31.

[10] 左鵬翔，李光華，冷云，等.鱸鯉胚胎發(fā)育研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2014（6）：273-274，283.

基金項(xiàng)目 國家科技支撐計(jì)劃“重大水電開發(fā)工程關(guān)鍵技術(shù)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)研究及集成示范”（2013BAB06B03）。

摘要對人工干法授精的后背鱸鯉（Percocypris pingi retrodorslis）胚胎發(fā)育進(jìn)行觀察，描述了從受精卵到卵黃囊期仔魚發(fā)育時(shí)期的時(shí)序和形態(tài)特征。后背鱸鯉的成熟卵近似于圓球形，呈金黃色，卵徑為2.3~2.5 mm;受精后13 min卵膜吸水膨脹，卵徑達(dá)3.3~3.8 mm。水溫在12.0~15.5 ℃的條件下，平均孵化時(shí)間為274 h。初孵仔魚全長為9.5~10.6 mm，8日齡仔魚初次攝食豐年蟲，進(jìn)入混合營養(yǎng)期。

關(guān)鍵詞后背鱸鯉；胚胎發(fā)育；初孵仔魚；觀察

中圖分類號Q959.46+8文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號 1007-5739（2014）11-0284-02

后背鱸鯉（Percocypris pingi retrodorslis）地方名為花魚，隸屬鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、鲃亞科（Ba-rbinae）、鱸鯉屬（Percocypris），分布于瀾滄江、怒江水系。后背鱸鯉體延長，略側(cè)扁，身體被較小鱗片，最大個(gè)體重達(dá)20 kg；后背鱸鯉為肉食性魚類，以捕食小型魚類為主，也食甲殼動(dòng)物、昆蟲及其幼蟲。由于過度捕撈等原因，自然水體中捕獲的后背鱸鯉數(shù)量已越來越少，現(xiàn)已成為瀕危珍稀魚類[1-3]。后背鱸鯉肉可入藥，有祛痰、止血、鎮(zhèn)靜的功效，主治急性與慢性支氣管炎、胃潰瘍出血、子宮出血、月經(jīng)過多。有關(guān)鱸鯉屬魚類的人工繁殖及其胚胎發(fā)育的研究已有一些報(bào)道[4-5]，但至今未見有關(guān)后背鱸鯉人工繁殖及胚胎發(fā)育方面的相關(guān)報(bào)道。通過對后背鱸鯉人工繁育，研究其胚胎發(fā)育情況，為進(jìn)一步開展其人工養(yǎng)殖和野生資源的保護(hù)提供基礎(chǔ)資料和理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)概況

供試魚種為后背鱸鯉，于2014年3月進(jìn)行人工繁殖親魚的試驗(yàn)，魚種取自于苗尾·功果橋水電站（華能瀾滄江水電公司）的魚類增殖站。于3月 15日進(jìn)行人工催產(chǎn)，♀∶♂＝4∶1，共催產(chǎn)4組。3月17日用人工干法授精獲卵42 904粒；取發(fā)育正常的受精卵為試驗(yàn)對象；受精卵或初孵仔魚在尤先科孵化器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。試驗(yàn)期間采用24 h微量滴水，控制水溫為12.0~15.5 ℃。器材為解剖鏡（Nikon，SMZ800）、顯微照相機(jī)。

1.2試驗(yàn)方法

根據(jù)胚胎發(fā)育的時(shí)期，對胚胎發(fā)育情況分次進(jìn)行觀察并進(jìn)行拍攝，胚胎發(fā)育時(shí)間以超過1/2的個(gè)體到各期的時(shí)間為準(zhǔn)，每次從孵化器內(nèi)隨機(jī)取樣20粒以上，使用解剖鏡觀察、拍攝和記錄胚胎發(fā)育全過程，相關(guān)數(shù)據(jù)測定利用Scope Photo軟件進(jìn)行。

2結(jié)果與分析

后背鱸鯉的胚胎發(fā)育各階段特征見表1，其圖序見圖1。后背鱸鯉的受精卵在受精后10~12 min之前（剛受精時(shí)）具有微黏性，其后黏性消失。成熟卵金黃色，卵黃豐富，為直徑2.3~2.5 mm的近圓球形，其胚胎發(fā)育過程包括8個(gè)階段，現(xiàn)將12.0~15.5 ℃水溫條件下各個(gè)階段特征分述如下。

2.1受精卵

受精卵時(shí)期，受精后約13 min卵徑達(dá)3.3~3.8 mm，卵膜吸水膨脹，卵黃四周呈不規(guī)則凸凹狀，開始活動(dòng)。

2.2胚盤期

胚盤期歷時(shí)2.1 h左右（受精卵至形成胚盤），卵周隙出現(xiàn)，進(jìn)行兩極分化，并且細(xì)胞質(zhì)漸漸隆起，向動(dòng)物極集中，形成胚盤。

2.3卵裂期

第1次卵裂始于受精后3.45 h，細(xì)胞按2的指數(shù)成倍遞增，細(xì)胞體積變小。4細(xì)胞期、8細(xì)胞期、16細(xì)胞期、32細(xì)胞期分別形成于受精后4.33、7.43、8.93、10.52 h，多細(xì)胞期于受精后13.85 h形成。

2.4囊胚期

隨著細(xì)胞繼續(xù)分裂，其體積越來越小，數(shù)量成倍增多，胚盤細(xì)胞界限逐漸不清晰，囊胚早期一般為受精后15.75 h，囊胚層內(nèi)層稍凹下，外層凸出，卵黃上出現(xiàn)隆起的囊胚。受精后18.60 h，進(jìn)入囊胚中期，囊胚的高度隨著細(xì)胞的持續(xù)分裂而下降，囊胚層僅略凸出，變得扁而薄，卵黃囊原生質(zhì)網(wǎng)不明顯。受精后22.98 h為囊胚晚期，囊胚內(nèi)外層與卵黃面貼合，變得更為扁平，胚環(huán)形成。

2.5原腸胚期

受精后約36.37 h進(jìn)入原腸早期，囊胚細(xì)胞下包2/5，出現(xiàn)明顯胚環(huán)；受精后約43.03 h進(jìn)入原腸中期，胚層下包1/2；受精后50.25 h為原腸晚期，胚層下包2/3。

2.6神經(jīng)胚期

受精后52.45 h，胚層下包4/5，神經(jīng)板雛形出現(xiàn)，胚體轉(zhuǎn)為側(cè)臥，頭端隆起明顯，大卵黃栓外露。

2.7器官形成期

受精后58.43 h左右胚層進(jìn)一步下包，卵黃進(jìn)一步減少形成小卵黃栓。受精后60.25 h左右胚層細(xì)胞完全包圍卵黃，胚孔封閉，胚體圍繞卵黃1/2，胚胎發(fā)育至胚孔封閉期、受精后63.93 h左右胚體中部出現(xiàn)4對肌節(jié)，神經(jīng)板頭端隆起、受精后71.53 h左右視泡出現(xiàn)，肌節(jié)12對、受精后79.48 h左右眼囊呈長橢圓形，肌節(jié)17對，胚體圍繞卵黃約2/3、受精后83.63 h左右頭部更加膨大，后腦出現(xiàn)小泡狀耳囊，肌節(jié)21對，受精后85.25 h左右胚體尾部開始膨大，與卵黃囊分離形成尾芽，肌節(jié)23對，受精后87.85 h左右尾泡形成，肌節(jié)27對，受精后90.25 h左右尾芽逐漸游離，尾部鰭褶形成，肌節(jié)29對，受精后95.77 h左右尾泡逐漸變小直至消失，胚胎開始表現(xiàn)出微弱的肌肉收縮，肌節(jié)30對，受精后100.05 h左右在眼杯口出現(xiàn)橢圓的晶體，耳囊下方出現(xiàn)鰓板、受精后104.30 h左右在脊索前，卵黃囊的前上方心臟原基形成、受精后124.65 h左右耳囊內(nèi)2粒耳石明顯可見，身體擺動(dòng)加快，肌節(jié)38～39對，受精后127.78 h左右嗅囊形成，受精后141.72 h左右，位于頭部腹下方、卵黃囊的前左上方的心臟開始搏動(dòng)，搏動(dòng)次數(shù)為30～50次/min。胚體在卵膜內(nèi)擺動(dòng)10～16次/min。

2.8孵出期

受精后190.10 h，個(gè)別胚體開始孵出。受精后274 h，1/2以上的胚體出膜，受精后290 h，全部胚體出膜。破膜前直至出膜，胚胎在膜內(nèi)不停轉(zhuǎn)動(dòng)和顫動(dòng)。初孵仔魚極少活動(dòng)，在孵化器底部靜臥，全長9.5~10.6 mm，身體除卵黃外呈透明，肛后長占全長的26%，卵黃囊后部為棒狀，前部橢圓形，心臟位于卵黃囊正前段，心律55~65次/min。

3結(jié)論與討論

試驗(yàn)觀察結(jié)果表明，后背鱸鯉魚卵具有如下特性：后背鱸鯉成熟卵為金黃色，沉性，含有大量的卵黃，與報(bào)道的其他鱸鯉屬魚類的卵相似，后背鱸鯉受精卵與其他鱸鯉受精卵一樣具有微黏性，但吸水10~12 min后，黏性可自行消失[6-7]。觀察后背鱸鯉胚胎發(fā)育情況，后背鱸鯉受精卵直徑2.3~2.5 mm，吸水后達(dá)3.3~3.8 mm。在12.0~15.5 ℃水溫的條件下，個(gè)別胚體出膜時(shí)間在受精后190.10 h，1/2以上胚體出膜時(shí)間為受精后274 h，全部胚體出膜為受精后290 h。整個(gè)孵化期耗時(shí)100 h。其胚胎發(fā)育的時(shí)間較長，說明后背鱸鯉的胚胎發(fā)育速度存在明顯的個(gè)體差異。

后背鱸鯉胚胎發(fā)育與初孵仔魚的結(jié)果表明，本批催產(chǎn)的后背鱸鯉親魚成熟較好，獲卵42 904粒，受精卵27 168粒，受精率達(dá)63.3%，孵出初孵仔魚24 557尾，孵化率達(dá)90.4%。受精卵在尤先科孵化器中進(jìn)行孵化和胚后發(fā)育，孵化率和仔魚的成活率都較高，取得了顯著的效果[8-10]。

4致謝

在試驗(yàn)研究與論文撰寫過程中，吳敬東 、李瓊麗 、熊燕 、艾莎、李梁、李穎睿、楊松麗、李國鋒、周睿等同志參與并提供幫助，在此一并致謝！

5參考文獻(xiàn)

[1] 樂佩綺.中國動(dòng)物志 硬骨魚綱 鯉形目（下卷）[M].北京：科學(xué)出版社，2000：50-51.

[2] 申安華，李光華，趙樹海，等.光唇裂腹魚胚胎發(fā)育與仔魚早期發(fā)育的研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2013，34（6）：76 -80.

[3] 王永明，岳興建.鱸鯉的胚胎發(fā)育[J].四川動(dòng)物，2013，32（4）：530-535.

[4] 張良松.異齒裂腹魚胚胎發(fā)育與仔魚早期發(fā)育的研究[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，26（3）：238-242.

[5] 冷云，徐偉毅，劉躍天，等.小裂腹魚胚胎發(fā)育的觀察[J].水利漁業(yè)，2006，26（1）：32-33.

[6] 吳青，王強(qiáng)，蔡禮明，等.齊口裂腹魚的胚胎發(fā)育和仔魚的發(fā)育[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，19（3）：218-221.

[7] 肖海，代應(yīng)貴.北盤江光唇裂腹魚個(gè)體繁殖力的研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2010，31（3）：64-70.

[8] 姚俊杰，何登菊，趙云龍，等.甌江彩鯉胚胎發(fā)育研究[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)，2012（2）：49-53，78.

[9] 賴見生，杜軍，何興恒，等.鱸鯉胚胎發(fā)育特征觀察[J].西昌學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2013（4）：15-17，31.

[10] 左鵬翔，李光華，冷云，等.鱸鯉胚胎發(fā)育研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2014（6）：273-274，283.