姜妍 王妍 金玲 韓淑英

摘要：目的 觀察槲白合劑體外對(duì)白色念珠菌抑制作用及體內(nèi)對(duì)小鼠念珠菌性陰道炎的治療效果。方法：測(cè)定槲白合劑對(duì)白色念珠菌的最小抑菌濃度（MIC），構(gòu)建小鼠白念珠菌性陰道炎模型并分為6組，觀察小鼠外陰炎癥反應(yīng)程度和陰道粘膜的病理變化。結(jié)果 槲白合劑 對(duì)白色念珠菌的MIC為0.40 mg/mL，槲白合劑與氟康唑的效價(jià)比MIC 2:1，與模型組比較，槲白合劑及氟康唑治療組隨著給藥時(shí)間增加，小鼠外陰炎癥及小鼠陰道組織病理改變均有減輕，呈劑量依賴性，高劑量組與氟康唑組相近。結(jié)論槲白合劑體外對(duì)白色念珠菌具有抑制作用，對(duì)小鼠白色念珠菌性陰道炎有較好的治療效果。

關(guān)鍵詞：槲白合劑；白色念珠菌；陰道炎一、材料

SPF級(jí)昆明小鼠，18-22g，雌性，無(wú)孕，（北京華阜康生物科技股份有限公司）；槲皮素白藜蘆醇、單體粉末（98%，Sigma公司）；白色念珠菌臨床新分離菌株，由河北省唐山市開(kāi)灤醫(yī)院檢驗(yàn)科提供。

二、方法

（一）體外MIC測(cè)定。每一藥液挑選10支無(wú)菌試管，采用二倍連續(xù)稀釋法，不加菌作陰性對(duì)照，第10管只加菌液。37℃培養(yǎng)24h?；鞚釣殛?yáng)性，澄清為陰性，藥物最低濃度管無(wú)菌生長(zhǎng)者，即為受試藥的MIC。

（二）動(dòng)物分組與給藥。白色念珠菌性陰道炎60只小鼠隨機(jī)分5組，每組12只，加正常對(duì)照共6組：①為正常對(duì)照組；②模型對(duì)照組；③氟康唑治療組，按0.1ml/10g原液陰道灌注；④-⑥為槲白合劑低、中、高(L-槲白合劑、M-槲白合劑、H-槲白合劑)劑量組，分別按0.1ml/10g經(jīng)陰道灌注給藥，給藥量依次為

40、80、160 mg/kg；上述各組均連續(xù)給藥7天，每天1次。

（三）體內(nèi)指標(biāo)。（1）小鼠外陰觀察。于給藥第0、5、8天觀察各組小鼠外陰情況：正常為“0分”；單純紅腫為“1分”；紅腫并有少量分泌物為“2分”，紅腫并有大量分泌物為“3分”，分值的總和為炎癥反應(yīng)程度。（2）陰道組織病理學(xué)檢查。于給藥第8天處死小鼠，取小鼠陰道組織作常規(guī)石蠟包埋，HE染色，鏡下觀察病理變化。

（四）統(tǒng)計(jì)方法。所有結(jié)果比較均采用SPSS16.0 軟件進(jìn)行，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。

三、結(jié)果

（一）槲白合劑體外抗白色念珠菌的MIC。表1：隨著各槲白合劑濃度的降低，對(duì)白色念珠菌的抑菌作用也降低。槲白合劑對(duì)白念珠菌的MIC為0.40mg/mL，氟康唑?qū)Π啄钪榫?/p>

MIC為0.21 mg/mL，槲白合劑與氟康唑的效價(jià)比為2:1。

表１ 槲白合劑抗白色念珠菌的MIC mg/mL

注：-無(wú)混濁，+略混濁，2+較混濁，3+明顯混濁

（二）體內(nèi)結(jié)果。（1）小鼠外陰觀察。槲白合劑各劑量組及氟康唑組隨著給藥天數(shù)增加，白色念珠菌性陰道炎小鼠外陰紅腫明顯消失，分泌物明顯減少。給藥第五天，對(duì)照組、模型組、氟康唑、（L、M、H）- 槲白合劑組小鼠外陰評(píng)分總計(jì)分別為0、24、10、22、13、12分。給藥第8天，對(duì)照組、模型組、氟康唑、（L、M、H）- 槲白合劑組小鼠外陰評(píng)分總計(jì)分別為0、27、11、19、13、10分。槲白合劑高劑量組多數(shù)小鼠陰道外觀接近正常對(duì)照組。（2 ）陰道組織病理檢查結(jié)果。槲白合劑治療組小鼠陰道組織病理改變有不同程度的減輕，高劑量組作用更明顯，治療效果與陽(yáng)性對(duì)照藥氟康唑組相近。

四、討論

白念珠菌性陰道炎是婦女常見(jiàn)的陰道黏膜真菌感染性疾病。近年來(lái)，該病發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，多數(shù)患者表現(xiàn)反復(fù)發(fā)作。目前亟需研發(fā)高效低毒的抗真菌藥物。本研究所用槲皮素與白藜蘆醇均為黃酮類化合物，利用其多酚化合物聚集原理觀察對(duì)小鼠白色念珠菌性陰道炎的治療作用，為真菌性疾病的治療提供新的思路及方法。本次研究體外抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明槲白合劑有較強(qiáng)的抑制真菌作用，與氟康唑相近。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型組和給藥前比較，隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，癥狀逐漸好轉(zhuǎn)，隨著劑量的增加，小鼠小鼠外陰情況及陰道組織病理改變明顯減輕，有明顯的量效關(guān)系，高劑量組與氟康唑相似。前期研究發(fā)現(xiàn)，槲白合劑可增強(qiáng)正常小鼠和免疫功能低下小鼠抗應(yīng)激反應(yīng)能力和免疫功能。本研究表明，槲白合劑可能對(duì)真菌有抑制作用，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉云,馬克韶. 對(duì)家兔陰道粘膜刺激反應(yīng)的評(píng)價(jià)方法[J].中國(guó)藥檢藥理工作通訊,1990, 2 (1): 4-6.

[2] Chai X Y,Zhang J,Hu H G,Yu Ｓ Ｈ,Sun Q Y,Wu Q Y,et al. Design,synthesis,andbiological evaluation of novel triazole derivatives asinhabitors ofcytochrome P450 14 a-demethylase[J].Eur J Med Chen,2009,44:：1913-1920.