張紅石，崔 淼，張昕燁，劉興山

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)春 130117）

酸棗仁加鋅合劑對(duì)睡眠剝奪小鼠綜合學(xué)習(xí)記憶能力的影響

張紅石，崔 淼，張昕燁，劉興山*

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)春 130117）

目的 探討酸棗仁加鋅合劑對(duì)睡眠剝奪小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法 在對(duì)80只經(jīng)過(guò)篩選獲得學(xué)習(xí)記憶能力的小鼠進(jìn)行分組。分為空白組、模型組、陽(yáng)性組、實(shí)驗(yàn)組，在酸棗仁加鋅合劑灌胃5 d后進(jìn)行睡眠剝奪，按時(shí)間不同每組分為24 h組和36 h組。造模結(jié)束后分別對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠進(jìn)行水迷宮、避暗、跳臺(tái)檢測(cè)，觀察其已獲得的學(xué)習(xí)記憶能力的變化情況。結(jié)果 空白組與模型組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），模型組與實(shí)驗(yàn)組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），陽(yáng)性藥物組與模型組之間差異不穩(wěn)定。結(jié)論 睡眠剝對(duì)機(jī)體的學(xué)習(xí)記憶能力有負(fù)面影響;酸棗仁加鋅合劑對(duì)小鼠睡眠剝奪引起的學(xué)習(xí)記憶能力下降有所改善，能較好的維持小鼠已獲得的學(xué)習(xí)記憶能力。

酸棗仁加鋅合劑;睡眠剝奪;學(xué)習(xí)記憶能力;小鼠

睡眠剝奪（sleep deprivation，SD）是機(jī)體在一段時(shí)間內(nèi)不能獲得有效睡眠，而出現(xiàn)精神、心理、行為等方面改變的狀態(tài)。醫(yī)護(hù)人員在倒班中常易出現(xiàn)睡眠剝奪狀態(tài)［1］，其對(duì)空間記憶學(xué)習(xí)能力影響較大［2］，嚴(yán)重影響職業(yè)能力和職業(yè)壽命。中藥酸棗仁有較好的促進(jìn)睡眠養(yǎng)心安神效果［3］，微量元素鋅對(duì)睡眠剝奪造成學(xué)習(xí)記憶能力下降有保護(hù)作用［4］。為此，筆者在結(jié)合了中醫(yī)飲食調(diào)護(hù)的基礎(chǔ)上自制酸棗仁加鋅合劑，通過(guò)水迷宮、避暗、跳臺(tái)、自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)，觀察其對(duì)睡眠剝奪小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康昆明種小鼠160只，購(gòu)自長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司，CSXK-（吉）2011-0007，經(jīng)篩選后（通過(guò)各項(xiàng)學(xué)習(xí)測(cè)試獲得學(xué)習(xí)能力者）選出80只，雌性各半，體質(zhì)量18～22 g。實(shí)驗(yàn)分組:隨機(jī)分成空白組20只（清水灌胃正常喂養(yǎng)組）、模型組20只（造睡眠剝奪模型清水灌胃組）、陽(yáng)性組20只（造睡眠剝奪模型、葡萄糖酸堿灌胃組）、實(shí)驗(yàn)組20只（造睡眠剝奪模型、酸棗仁加鋅合劑灌胃組）。在造模階段每組又分為24 h組（40只）和36 h組（40只），雌雄各半。實(shí)驗(yàn)灌胃時(shí)間為在分組結(jié)束后、睡眠剝奪前，按人鼠比例換算0.1 mL/10 g給藥，共給藥5 d，5 d后開(kāi)始進(jìn)入睡眠剝奪狀態(tài)。

1.1.2 主要藥品與儀器 實(shí)驗(yàn)藥品:二氧化鈦（天津福辰，批號(hào):20060220）、葡萄糖酸鋅（哈藥集團(tuán)，批號(hào):12030212）、酸棗仁（購(gòu)自北京同仁堂，按人屬比例生藥量1∶8進(jìn)行煎煮，即100 g酸棗仁800 mL清水，文火煎煮至藥液濃縮100 mL后待用）。酸棗仁加鋅合劑（每100 mL酸棗仁湯劑加100 mL含鋅35.3 mg的葡萄糖酸鋅）。實(shí)驗(yàn)儀器:BA-200避暗儀，香港萬(wàn)科;DT-200小鼠跳臺(tái)儀，杭州雷琪;Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)，成都泰盟。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模 采用改良多平臺(tái)睡眠剝奪法（modified multiple plat-formmethod，MMPM），在標(biāo)準(zhǔn)大鼠籠內(nèi)，倒入清水，水位平鋪布滿籠底，在籠底黏附10根直徑在2 cm的方形木壯。每籠10只小鼠，當(dāng)小鼠進(jìn)入睡眠狀態(tài)后會(huì)從木樁上掉落，因觸水而達(dá)到覺(jué)醒，進(jìn)而完成睡眠剝奪造模。造模時(shí)水溫控制在22～23℃，每天持續(xù)日光燈照射，排除晝夜明暗交替。造模分24 h和36 h兩個(gè)時(shí)間段。

1.2.2 水迷宮實(shí)驗(yàn) Morris水迷宮（Morris water maze，MWM）試驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物游泳，學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn)，主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置感和方向感（空間定位）的學(xué)習(xí)記憶能力。觀察指標(biāo)潛伏期、總距離、平均速度、朝向角［5］。

1.2.3 壁暗實(shí)驗(yàn) 利用鼠類(lèi)的嗜暗習(xí)性而設(shè)計(jì)。記錄反射建立過(guò)程中的主動(dòng)回避反應(yīng)指標(biāo)來(lái)反映實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶能力的變化。觀察指標(biāo)潛伏期和次數(shù)［6］。

1.2.4 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn) 通過(guò)測(cè)試動(dòng)物在平臺(tái)上的潛伏期測(cè)試記憶，從而反應(yīng)出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶能力的變化。觀察指標(biāo)潛伏期和次數(shù)［7］。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 酸棗仁加鋅合劑對(duì)24 h睡眠剝度小鼠水迷宮的影響 見(jiàn)表1。

表1 酸棗仁加鋅合劑對(duì)24 h睡眠剝度小鼠水迷宮的影響（±s，n=10）

表1 酸棗仁加鋅合劑對(duì)24 h睡眠剝度小鼠水迷宮的影響（±s，n=10）

注:與模型組比較，#P ＜0.05

組 別 潛伏期/s 總距離/cm 平均速度 朝向角空白組 84.70 ±20.47 1368.77 ±318.3015.81 ±2.48 39.45 ±16.25模型組 112.32 ±6.48 2113.16 ±200.16 17.78 ±3.21 82.50 ±26.28陽(yáng)性組 77.24 ±15.92#1665.73 ±518.60#22.86 ±9.39 81.14 ±20.71實(shí)驗(yàn)組 81.85 ±22.84#1502.53 ±318.21#16.98 ±4.25 23.70 ±10.35

2.2 酸棗仁加鋅合劑對(duì)36 h睡眠剝度小鼠水迷宮的影響 見(jiàn)表2。

表2 酸棗仁加鋅合劑對(duì)36 h睡眠剝度小鼠水迷宮的影響（±s，n=10）

表2 酸棗仁加鋅合劑對(duì)36 h睡眠剝度小鼠水迷宮的影響（±s，n=10）

注:與模型組比較，#P ＜0.05

組 別 潛伏期/s 總距離/cm 平均速度 朝向角空白組 85.07 ±16.86 1 409.01 ±162.3016.70 ±3.04 29.85 ±11.30模型組 115.62 ±11.98 2 445.47 ±376.47 18.42 ±2.24 65.95 ±49.69陽(yáng)性組 78.09 ±26.48#1 536.29 ±412.08#22.86 ±9.39 81.14 ±50.71實(shí)驗(yàn)組 81.26 ±26.15#1 407.71 ±502.23#16.98 ±4.25 23.54 ±17.97

2.3 酸棗仁加鋅合劑對(duì)睡眠剝奪小鼠避暗實(shí)驗(yàn)的影響 見(jiàn)表3。

表3 對(duì)睡眠剝奪小鼠避暗實(shí)驗(yàn)的影響（±s，n=20）

表3 對(duì)睡眠剝奪小鼠避暗實(shí)驗(yàn)的影響（±s，n=20）

注:與模型組比較，#P ＜0.05

組 別 24 h（n=10）潛伏期/s 次數(shù)/次36 h（n=10）潛伏期/s 次數(shù)/次空白組 281.0 ±46.50 1 260.2 ±44.964模型組 202.3 ±78.40 8 208.0 ±40.00 12陽(yáng)性組 257.2 ±50.71# 5 243.5 ±62.60# 9實(shí)驗(yàn)組 268.0 ±15.49# 2 256.0 ±34.50#2

2.4 酸棗仁加鋅合劑對(duì)小鼠睡眠剝奪模型跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)的影響 見(jiàn)表4。

表4 對(duì)小鼠睡眠剝奪模型跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)的影響（±s，n=20）

表4 對(duì)小鼠睡眠剝奪模型跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)的影響（±s，n=20）

注:與模型組比較，#P ＜0.05

組 別 24 h（n=10）潛伏期/s 次數(shù)/次36 h（n=10）潛伏期/s 次數(shù)/次空白組 233.0±44.9△ 3 259.0±18.7△1模型組 121.6 ±18.5 17 132.0 ±50.2 4陽(yáng)性組 158.3 ±50.7 8 208.5 ±47.6# 6實(shí)驗(yàn)組 182.0 ±66.2# 2 179.3 ±48.7#4

3 小結(jié)

水迷宮、避暗、跳臺(tái)均屬于探討實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。筆者將其引入研究酸棗仁加鋅合劑對(duì)睡眠剝奪影響的研究，探討其對(duì)睡眠剝奪后小鼠記憶能力的影響。在水迷宮實(shí)驗(yàn)中參考值潛伏期和總距離，模型組與其他組別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而平均速度、傾向角由于小鼠游泳隨機(jī)性較大，并沒(méi)有出現(xiàn)傾向性結(jié)果。避暗實(shí)驗(yàn)和跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，模型組與實(shí)驗(yàn)組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而陽(yáng)性組與模型組在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證明陽(yáng)性組對(duì)學(xué)習(xí)記憶的影響并不穩(wěn)定，還需要有其他干預(yù)手段配合使用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酸棗仁加鋅合劑對(duì)小鼠睡眠剝奪引起的學(xué)習(xí)記憶能力下降有所改善，能較好的維持小鼠已獲得的學(xué)習(xí)記憶能力。

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［1］張?jiān)伱?，江智霞，王連紅，等.護(hù)理輪班導(dǎo)致睡眠剝奪對(duì)人體免疫功能的影響［J］.護(hù)理研究，2011，25（3）:259-260.

［2］陳景元，張?jiān)?，楊瑞華.睡眠剝奪對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響［J］.衛(wèi)生研究，2007，3（2）:234-236.

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Mixture of spina date seed and zinc gluconate for the ability of learning and memory of sleep deprived mice

ZHANG Hongshi，CUI Miao，ZHANG Xinye，LIU Xingshan*
（Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China）

ObjectiveTo explore the effects of Mixture of Spina Date Seed and Zinc Gluconate for the ability of learning and memory of sleep deprived（SD）mice.Methods80 mice that have got the ability of learning and memory were divided into four groups，including blank group，model group，positive group and experimental group.5 days later，get rid of sleep that time is 24 hours and 36 hours，of 80 mice after they were gavaged with the mixture.The end of the building，the four groups mice were tested in water maze，avoid dark，diving platform，to observing the changes of the acquired the ability of learning and memory.ResultsCompare of blank group and model group，there is the significant difference（P ＜0.05）.Compare of model group and experimental group，there is the significant difference（P ＜0.05）.But there is no stable difference between the positive group and model group.ConclusionSleep deprivation has negative effect of learning and memory ability;The mixture of Spina Date Seed and Zinc Gluconate can improve the mice's ability of learning and memory，as well as can better maintain the acquired ability of learning and memory of mice.

mixture of spina date seed and zinc gluconate;sleep deprived;the ability of learning and memory;mouse

R285.5

A

2095－6258（2014）05－0782－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.05.008

國(guó)家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)學(xué)科南京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)護(hù)理學(xué)開(kāi)放課題項(xiàng)目（ZYHL0305-2）。

張紅石（1979－），女，碩士研究生。研究方向:中醫(yī)康復(fù)護(hù)理理論與實(shí)踐。

劉興山，男，教授，碩士研究生導(dǎo)師，電話:0431-86045377。

2014－01－11）