張海勇+酈秀芳+呂艷婷+胡孟鈞

[摘要] 目的 探討伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化（NED）結(jié)直腸腺癌中p53、Ki-67的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系。方法 采用SP法檢測NSE、CgA、Syn、CD-57及p53、Ki-67蛋白在65例結(jié)直腸腺癌組織中的表達(dá)，分為NED陽性組35例和NED陰性組30例，并分析p53、Ki-67表達(dá)對(duì)預(yù)后的影響。結(jié)果 NED陽性組中p53、Ki-67陽性表達(dá)率均明顯高于NED陰性組（P<0.05）。p53、Ki-67的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分化和DUCK分期密切相關(guān)（P<0.05）。NED陰性組的5年生存率明顯高于NED陽性組（P<0.05）；NED陽性組中，p53表達(dá)陰性者和Ki-67表達(dá)陰性者的5年生存率明顯高于兩者表達(dá)陽性者（P<0.05）。Cox回歸分析表明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、DUCK分期、p53及Ki-67表達(dá)是患者5年生存率的獨(dú)立預(yù)后因素（P<0.05）。結(jié)論 p53、Ki-67的高表達(dá)可能在伴NED結(jié)直腸腺癌發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用；兩者均為伴NED結(jié)直腸腺癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

[關(guān)鍵詞] 結(jié)直腸腺癌；神經(jīng)內(nèi)分泌分化；免疫組織化學(xué)；p53；Ki-67 ；預(yù)后

[中圖分類號(hào)] R73 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）24-0015-04

結(jié)直腸癌是人類最常見的消化道惡性腫瘤之一，近年來隨著對(duì)其發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)的提高、手術(shù)方式的進(jìn)步及新治療手段的涌現(xiàn)和應(yīng)用，結(jié)直腸癌患者得治療效果得到了很大的改觀，但患者總的5年生存率仍不理想[1，2]。目前發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)內(nèi)分泌分化（NED）現(xiàn)象廣泛存在于一般的非內(nèi)分泌組織、良勝腫瘤及惡性腫瘤組織中，且惡性腫瘤中以腺癌多見[3]。伴NED結(jié)直腸腺癌具有分化差、侵襲性強(qiáng)、轉(zhuǎn)移早等臨床病理特征，患者預(yù)后差、生存期短[4]。因此，探明其發(fā)病機(jī)制，尋找新的有效的相關(guān)診斷分子標(biāo)志物和治療靶標(biāo)，是提高患者治療效果、改善患者預(yù)后的關(guān)鍵，但目前國內(nèi)對(duì)伴NED結(jié)直腸腺癌的相關(guān)研究報(bào)道相對(duì)較少。P53基因位于第17號(hào)染色體（17P13.1）的短臂上，約有50%的突變率。p53基因發(fā)生突變時(shí)，由抑癌基因轉(zhuǎn)為原癌基因，可促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，其突變或缺失已經(jīng)被證實(shí)是導(dǎo)致許多腫瘤發(fā)生的原因[5]。Ki-67是存在于細(xì)胞增殖期的蛋白質(zhì)，在細(xì)胞凋亡中S、GM期均有表達(dá)，主要定位于細(xì)胞核，有助于了解細(xì)胞的增殖活性，且與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、分期、轉(zhuǎn)移有關(guān)[6]。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測p53、Ki-67在伴NED結(jié)直腸腺癌組織中的表達(dá)，探討二者表達(dá)與其臨床病理因素的關(guān)系及對(duì)預(yù)后的影響。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2005年1月～2007年12月我院手術(shù)切除且均經(jīng)病理證實(shí)的結(jié)直腸腺癌組織石蠟標(biāo)本65例，其中男33例，女32例；年齡29～70歲，平均43.4歲；管狀腺癌31例，乳頭狀腺癌14例，黏液腺癌20例；Dukes分期：A期10例，B期29例，C期14例，D期12例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例。所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)4 μm切片。凡四種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物中一種標(biāo)志物陽性表達(dá)均視為NED陽性。按神經(jīng)內(nèi)分泌陽性表達(dá)情況將入選結(jié)直腸腺癌組織分為NED陽性組35例和NED陰性組30例，兩組年齡、性別、腫塊大小、腫瘤部位、組織學(xué)類型及治療情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2方法

采用免疫組織化學(xué)SP法檢測入選結(jié)直腸腺癌組織中神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物NSE、CgA、Syn、CD-57及p53、Ki-67蛋白的表達(dá)，SP試劑盒及NSE、CgA、Syn、CD-57、p53、Ki-67六種抗體均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。操作程序按說明書進(jìn)行。結(jié)果判斷：細(xì)胞胞漿或胞膜為棕黃色細(xì)顆粒者為神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物陽性表達(dá)。p53、Ki-67陽性表達(dá)定位于細(xì)胞胞核（圖1和圖2）。采用半定量評(píng)分法[7]，染色強(qiáng)度：0分，無色；1分，染色弱但明顯強(qiáng)于陰性對(duì)照；2分，染色清晰，中等程度；3分，染色程度強(qiáng)。陽性細(xì)胞數(shù)：0分，無陽性細(xì)胞；1分，陽性細(xì)胞≤25%；2分，陽性細(xì)胞占26%～50%；3分，陽性細(xì)胞占51%～75%；4分，陽性細(xì)胞>75%。上述兩項(xiàng)評(píng)分相加，0～1分為（-），2～3分為（±），4～5分為（+），6～7分為（++）；（-）和（±）判為陰性，（+）和（++）判為陽性。

1.3隨訪

通過門診或電話對(duì)65例結(jié)直腸腺癌患者進(jìn)行隨訪，隨訪內(nèi)容：總生存、死亡及腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。隨訪終止日期是2012年12月30日。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，生存資料作Kaplan-Meier生存曲線，并行Log-rank檢驗(yàn)和Cox多因素分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 p53、Ki-67在NED陽性組和NED陰性組中的表達(dá)

p53在NED陽性組和NED陰性組的陽性表達(dá)率分別為80.0%（28/35），26.7%（8/30）；Ki-67在NED陽性組和NED陰性組的陽性表達(dá)率分別為85.7%（30/35），40.0%（12/30）。NED陽性組中p53、Ki-67陽性表達(dá)率均明顯高于NED陰性組（P<0.05）。

2.2 伴NED結(jié)直腸腺癌組織中p53、Ki-67表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

p53、Ki-67在伴NED結(jié)直腸腺癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、組織學(xué)分化和DUCK分期密切相關(guān)（P<0.05）， 而與其他臨床病理學(xué)特征無關(guān)，見表1。

2.3 p53、Ki-67蛋白表達(dá)對(duì)伴NED結(jié)直腸腺癌患者預(yù)后的影響

本組均獲完整隨訪，隨訪率100.0%。NED陽性組5年或5年以上存活10例（28.6%，10/35），死亡25例（71.4%，25/35），5年總的生存率22.9%；NED陰性組5年或5年以上存活16例（53.3%，16/30），死亡14例（46.7%，14/30），5年總的生存率43.3%。經(jīng)Kaplan-Meier生存率曲線及Log-Rank顯著性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，NED陰性組的5年生存率明顯高于NED陽性組；NED陽性組中，p53表達(dá)陰性者的5年生存率明顯高于p53表達(dá)陽性者（P<0.05），Ki-67表達(dá)陰性者的5年生存率也明顯高于Ki-67表達(dá)陽性者（P<0.05），見圖3和圖4。

Cox回歸單因素分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、組織學(xué)分級(jí)、DUCK分期、p53及Ki-67陽性表達(dá)與伴NED結(jié)直腸腺癌患者5年生存率顯著相關(guān)（P<0.05）。Cox回歸多因素分析表明淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、DUCK分期、p53及Ki-67表達(dá)是伴NED結(jié)直腸腺癌患者5年生存率的獨(dú)立預(yù)后因素（P<0.05），而組織學(xué)分級(jí)未進(jìn)入Cox回歸模型，見表2。

3 討論

1938年Feyrter提出在機(jī)體傳統(tǒng)內(nèi)分泌腺以外存在一些NED細(xì)胞，能產(chǎn)生胺類、肽類及蛋白酶類激素，他們廣泛分布于肺、胃、腸等組織器官中。近年來國內(nèi)外學(xué)者對(duì)伴有NED前列腺癌、乳腺癌、肺癌的相關(guān)研究較多，但對(duì)于結(jié)直腸癌中NED與結(jié)直腸癌預(yù)后的關(guān)系以及通過何種途徑影響預(yù)后等方面研究報(bào)道也相對(duì)較少。

p53是目前發(fā)現(xiàn)的與腫瘤相關(guān)性最密切的一種基因，分為野生型和突變型。野生型p53屬于抑癌基因，具有對(duì)細(xì)胞生長、凋亡、DNA 修復(fù)等的調(diào)控作用；而突變型p53不僅無抑癌作用，更具有促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的活性功能。一旦p53發(fā)生基因突變，失去了其“分子警察”的重要抑癌作用，由抑癌基因轉(zhuǎn)變成癌基因，導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化和癌變[8，9]。眾多資料顯示，P53在多種惡性腫瘤組織呈高表達(dá)，可能參與腫瘤發(fā)生的過程[10-13]。Ki-67是一種敏感的判斷細(xì)胞增殖活性的核抗原，能較可靠地檢測良性、惡性組織的生長狀態(tài)，已經(jīng)成為應(yīng)用最廣泛的增殖細(xì)胞標(biāo)記之一。目前有研究表明在多種實(shí)體惡性腫瘤中均有Ki-67的異常表達(dá)，其表達(dá)遠(yuǎn)高于正常組織，并與惡性腫瘤的種植、浸潤、轉(zhuǎn)移潛能及預(yù)后密切相關(guān)[14，15]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，伴NED結(jié)直腸腺癌組織中p53、Ki-67陽性表達(dá)率均明顯高于NED陰性結(jié)直腸腺癌組織（P<0.05），且p53、Ki-67在伴NED結(jié)直腸腺癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、組織學(xué)分化和DUCK分期密切相關(guān)（P<0.05），表明p53、Ki-67的高表達(dá)不僅可能參與了結(jié)直腸腺癌發(fā)生的過程，也可能在伴NED結(jié)直腸腺癌發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用，同時(shí)也對(duì)伴NED結(jié)直腸腺癌的惡性增殖、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤潛能等惡性臨床病理特征有重要影響[16，17]，有望成為評(píng)估伴NED結(jié)直腸腺癌的生物學(xué)行為的參考分子指標(biāo)。

NED對(duì)腫瘤患者預(yù)后的影響一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)，但一直存在較多的爭議。目前多數(shù)認(rèn)為出現(xiàn)伴有NED的腺癌預(yù)后差，易發(fā)生淋巴結(jié)，侵襲性強(qiáng)，器官轉(zhuǎn)移早。本組研究資料中，隨訪結(jié)果顯示NED陽性組5年總的生存率22.9%，NED陰性組5年總的生存率43.3%，NED陰性組的5年生存率明顯高于NED陽性組，進(jìn)一步證明了伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化的結(jié)直腸腺癌預(yù)后差，提示NED對(duì)結(jié)直腸腺癌患者預(yù)后具有重要影響。同時(shí)本組研究結(jié)果還顯示，伴NED結(jié)直腸腺癌中，p53表達(dá)陰性者的5年生存率明顯高于P53表達(dá)陽性者（P<0.05），Ki-67表達(dá)陰性者的5年生存率也明顯高于Ki-67表達(dá)陽性者（P<0.05）。Cox回歸多因素分析結(jié)果提示p53及Ki-67表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、DUCK分期等一樣，是伴NED結(jié)直腸腺癌患者5年生存率的獨(dú)立預(yù)后因素（P<0.05）。說明P53和（或）Ki-67表達(dá)陽性者，其轉(zhuǎn)移、浸潤的風(fēng)險(xiǎn)更高，生存期短，預(yù)后不良。因此p53和Ki-67可能成為判斷伴NED結(jié)直腸腺癌患者預(yù)后的新分子指標(biāo)，通過聯(lián)合檢測p53、Ki-67在伴NED結(jié)直腸腺癌中的表達(dá)情況，將有助于臨床對(duì)患者的預(yù)后判斷；同時(shí)深入研究兩者的確切活性功能，將為進(jìn)一步探討伴NED結(jié)直腸腺癌發(fā)病機(jī)制開辟了新思路，并對(duì)臨床判斷伴NED結(jié)直腸腺癌患者預(yù)后以及制定術(shù)后治療方案具有重要實(shí)用價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 吳又明，丁彥青，李納，等. 結(jié)直腸鋸齒狀腺瘤、傳統(tǒng)腺瘤及結(jié)直腸癌中端粒酶、p53及Ki-67表達(dá)比較[J]. 中國癌癥雜志，2013，23（7）：519-522.

[2] Viale G，Regan MM，Mastropasqua MG，et al. Predictive value of tumor Ki-67 expression in two randomized trials of adj uvant chemoendocrine therapy for nodenegative breast cancer[J]. J Natl Cancer Inst，2008，100（3）：207-212.

[3] Bartley A N，Rashid A，F(xiàn)ournier K F，et al. Neuroendocrine and mucinous diferentiation in signet ring cell carcinoma of the stomach：Evidence for a common cell of origin in composite tumor[J]. Human Patholgy，2011，42（10）：1420-1429.

[4] 閔曉紅，陸建波，宋精玲，等. 結(jié)腸腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化的臨床病理學(xué)意義[J]. 昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，34（3）：67-72.

[5] Yang Y，Nakagawa H，Tetreault MP，et al. Loss of transcription factor KLF5 in the context of p53 ablation drives invasive progression of human squamous cell cancer[J]. Cancer Res，2011，71（4）：6475-6484.

[6] 夏紅強(qiáng)，何建蓉. Ki-67、EGFR、HER-2和P53在乳腺癌中的表達(dá)及其相關(guān)性[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志，2011，16（2）：139-143.

[7] Ryu HS，Chang KH，Yang HW，et al. High cyclooxygenase expression in stage 1B cervical cancer with lymph node metastasis or parametrial invasion[J]. Gynecol Oncol，2000，76（3）：320-325.

[8] Bidard FC，Matthieu MC，Chollet P，et al. P53 status and efficacy of primary anthracyclines/alky1ating agent based regim en according to breast cancer molecular classes[J]. Annals of Oncology，2008，19（7）：1261-1265.

[9] Lu M，Hofman R. p53 as a target in myeloproliferative neoplasms[J]. Oncotarget，2012，3（9）：1052-1053.

[10] Yang Y，Tarapore RS，Jarmel MH，et al. p53 mutation alters the efect of the esophageal tumor suppressor KLF5 on kemfinocyte proliferation[J]. Cell Cycle，2012，11（6）：4033-4039.

[11] Shapochka DO，Zaletok SP，Gnidyuk MI. Relationship between NF-KB， ER， PR， Her2/neu， Ki67， p53 expre ssion in human breast cancer[J]. Exp Oncol，2012， 34（4）：358-353.

[12] 湯嬌嬌，李洪勝，何麗珍，等. 乳腺癌病灶VEGF、Ki67、p53的相關(guān)性研究[J]. 國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2010，16（4）：429-431.

[13] 代小娟，韓英，王魯平. 連環(huán)素、P53、Ki-67在結(jié)直腸鋸齒狀腺瘤與腺瘤/癌組織表達(dá)的比較[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，12（4）：631-632.

[14] 吳婧婧，顧康生. 小腸腺癌患者中MMP-9、Ki-67、EGFR和VEGF的表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性研究[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，48（6）：647-650.

[15] 董春鴿，章杰，吳亮，等. 乳腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化與預(yù)后因素的相關(guān)性[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，41（2）：132-135.

[16] 潘冰，張仙土，陳靈斌，等. 乳腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化的特點(diǎn)及患者預(yù)后的臨床研究[J]. 浙江臨床醫(yī)學(xué)，2011， 13（3）：254-256.

[17] Han JS，Cao D，Molberg KH，et al. Hormone receptor status rather than HER2 status is significantly associated with increased Ki-67 and p53 expression in triplenegative breast carcinomas，and hish expression of Ki-67 but not p53 is significantly associated with axillary nodal metas tasis in triple-negative and high-grade non-triple-negative breast carcinomas[J]. Am J Clin Pathol，2011， 135（2）：230-237.

（收稿日期：2013-12-16）

[7] Ryu HS，Chang KH，Yang HW，et al. High cyclooxygenase expression in stage 1B cervical cancer with lymph node metastasis or parametrial invasion[J]. Gynecol Oncol，2000，76（3）：320-325.

[8] Bidard FC，Matthieu MC，Chollet P，et al. P53 status and efficacy of primary anthracyclines/alky1ating agent based regim en according to breast cancer molecular classes[J]. Annals of Oncology，2008，19（7）：1261-1265.

[9] Lu M，Hofman R. p53 as a target in myeloproliferative neoplasms[J]. Oncotarget，2012，3（9）：1052-1053.

[10] Yang Y，Tarapore RS，Jarmel MH，et al. p53 mutation alters the efect of the esophageal tumor suppressor KLF5 on kemfinocyte proliferation[J]. Cell Cycle，2012，11（6）：4033-4039.

[11] Shapochka DO，Zaletok SP，Gnidyuk MI. Relationship between NF-KB， ER， PR， Her2/neu， Ki67， p53 expre ssion in human breast cancer[J]. Exp Oncol，2012， 34（4）：358-353.

[12] 湯嬌嬌，李洪勝，何麗珍，等. 乳腺癌病灶VEGF、Ki67、p53的相關(guān)性研究[J]. 國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2010，16（4）：429-431.

[13] 代小娟，韓英，王魯平. 連環(huán)素、P53、Ki-67在結(jié)直腸鋸齒狀腺瘤與腺瘤/癌組織表達(dá)的比較[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，12（4）：631-632.

[14] 吳婧婧，顧康生. 小腸腺癌患者中MMP-9、Ki-67、EGFR和VEGF的表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性研究[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，48（6）：647-650.

[15] 董春鴿，章杰，吳亮，等. 乳腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化與預(yù)后因素的相關(guān)性[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，41（2）：132-135.

[16] 潘冰，張仙土，陳靈斌，等. 乳腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化的特點(diǎn)及患者預(yù)后的臨床研究[J]. 浙江臨床醫(yī)學(xué)，2011， 13（3）：254-256.

[17] Han JS，Cao D，Molberg KH，et al. Hormone receptor status rather than HER2 status is significantly associated with increased Ki-67 and p53 expression in triplenegative breast carcinomas，and hish expression of Ki-67 but not p53 is significantly associated with axillary nodal metas tasis in triple-negative and high-grade non-triple-negative breast carcinomas[J]. Am J Clin Pathol，2011， 135（2）：230-237.

（收稿日期：2013-12-16）

[7] Ryu HS，Chang KH，Yang HW，et al. High cyclooxygenase expression in stage 1B cervical cancer with lymph node metastasis or parametrial invasion[J]. Gynecol Oncol，2000，76（3）：320-325.

[8] Bidard FC，Matthieu MC，Chollet P，et al. P53 status and efficacy of primary anthracyclines/alky1ating agent based regim en according to breast cancer molecular classes[J]. Annals of Oncology，2008，19（7）：1261-1265.

[9] Lu M，Hofman R. p53 as a target in myeloproliferative neoplasms[J]. Oncotarget，2012，3（9）：1052-1053.

[10] Yang Y，Tarapore RS，Jarmel MH，et al. p53 mutation alters the efect of the esophageal tumor suppressor KLF5 on kemfinocyte proliferation[J]. Cell Cycle，2012，11（6）：4033-4039.

[11] Shapochka DO，Zaletok SP，Gnidyuk MI. Relationship between NF-KB， ER， PR， Her2/neu， Ki67， p53 expre ssion in human breast cancer[J]. Exp Oncol，2012， 34（4）：358-353.

[12] 湯嬌嬌，李洪勝，何麗珍，等. 乳腺癌病灶VEGF、Ki67、p53的相關(guān)性研究[J]. 國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2010，16（4）：429-431.

[13] 代小娟，韓英，王魯平. 連環(huán)素、P53、Ki-67在結(jié)直腸鋸齒狀腺瘤與腺瘤/癌組織表達(dá)的比較[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，12（4）：631-632.

[14] 吳婧婧，顧康生. 小腸腺癌患者中MMP-9、Ki-67、EGFR和VEGF的表達(dá)與臨床特征及預(yù)后的相關(guān)性研究[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，48（6）：647-650.

[15] 董春鴿，章杰，吳亮，等. 乳腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化與預(yù)后因素的相關(guān)性[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，41（2）：132-135.

[16] 潘冰，張仙土，陳靈斌，等. 乳腺癌伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化的特點(diǎn)及患者預(yù)后的臨床研究[J]. 浙江臨床醫(yī)學(xué)，2011， 13（3）：254-256.

[17] Han JS，Cao D，Molberg KH，et al. Hormone receptor status rather than HER2 status is significantly associated with increased Ki-67 and p53 expression in triplenegative breast carcinomas，and hish expression of Ki-67 but not p53 is significantly associated with axillary nodal metas tasis in triple-negative and high-grade non-triple-negative breast carcinomas[J]. Am J Clin Pathol，2011， 135（2）：230-237.

（收稿日期：2013-12-16）