王彥青

（鄭州市第八人民醫(yī)院藥劑科，河南 鄭州 450000）

延胡索是一種中國傳統(tǒng)藥材，為罌粟科植物延胡索的干燥塊莖，又稱元胡或玄胡。延胡索中含有多種生物堿，主要有延胡索乙素（dltetrahydropalmatine）、延胡索甲素（d-corydaline）和延胡索丙素（protopine）等，是臨床上常用的活血、止痛藥，具有活血、行氣、止痛等功能[1]。目前臨床上常用的延胡索是經(jīng)炮制后的延胡索，研究結(jié)果表明[2]，醋炙后的延胡索能提高它的行血、止痛作用，而酒炙后的延胡索能增強(qiáng)其活血、化瘀的功能。本文以延胡索的主要有效成分延胡索乙素為研究對象，采用超聲法提取經(jīng)不同方法炮制過后的延胡索中的有效成分，并應(yīng)用薄層色譜法對有效成分進(jìn)行鑒別和對比分析，以確定最佳的炮制方法，為延胡索的炮制及有效應(yīng)用提供參考和依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

全自動薄層鋪板器（TD-Ⅱ型，上?？普苌萍加邢薰荆壯h(huán)水箱（HH-501型，金壇市鴻科儀器廠），臺式超聲波清洗器（KQ2200V型，昆山舒美超聲儀器有限公司），暗箱式微型雙光紫外分析儀（GL-200型，江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司），恒溫干燥箱（DHG-101-3A型，天津諾宏儀器制造有限公司），電子分析天平（CP225D型，德國賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）

1.2 試藥

硅膠G（青島海洋化工有限公司），延胡索（天津中新藥業(yè)藥材公司，批號：070912）； 延胡索乙素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110726-201112），山西老陳醋（山西老陳醋集團(tuán)），黃酒（紹興花雕），其他所有試劑均為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 炮制方法

首先將延胡索洗凈，將其干燥后打碎，再采用醋烘、醋煮、醋炙、酒炙的方法分別對其進(jìn)行炮制。其中，①醋烘：稱取延胡索適量，加入20%總質(zhì)量的醋將其潤濕，待醋完全吸盡后，放入120 ℃的烘箱內(nèi)干燥45 min，隨后取出來放涼，備用；②醋煮：稱取延胡索適量，加20%總重量的醋將其潤濕，待醋完全吸盡后，再加入純化水將藥材浸沒，隨后用武火煮沸，再用文火煎煮，干燥備用；③醋炙：稱取延胡索適量，加入20%的醋潤濕，待醋完全吸盡后，以文火炒干，放涼后，備用；④酒炙：稱取延胡索適量，加20%的酒潤濕，悶透后，以文火炒干，放涼后，備用。

2.2 對照品溶液的制備

稱取延胡索乙素對照品10.5 mg，置于10 mL的容量瓶中，加少量甲醇溶解后，然后繼續(xù)用甲醇定容至刻度，混合均勻后，即得1.1 mg/mL的延胡索對照溶液，將其放置于冰箱中保存，備用。

2.3 供試品溶液的制備

取上述炮制后的延胡索及延胡索生品各取5 g，置于錐形瓶中，加入純化水100 mL，超聲提取25 min后，分離上清液，收集；然后將殘?jiān)僦貜?fù)上述操作1 次，合并2次的濾液；接著殘?jiān)尤?0 mL的水溶解后，再加10 mL濃氨水，然后乙醚萃取3 次，合并萃取液，蒸干；稱取0.2 g濃縮物，用2 mL甲醇溶解，混合均勻，即得供試品溶液，于冰箱中保存，備用。

2.4 薄層色譜的點(diǎn)樣、展開及處理

預(yù)先采用2%（W/V）的氫氧化鈉溶液制備硅膠G薄層板，然后將“2.2”項(xiàng)下的對照品和“2.3”項(xiàng)下的供試品溶液經(jīng)點(diǎn)樣器點(diǎn)于硅膠薄層板上（S為延胡索乙素對照品溶液，其余按標(biāo)號為不同炮制方法的供試品溶液），展開劑為甲苯-丙酮（9∶2），展距7 cm。隨后取出薄層板，待晾干后，將其放置于密閉的碘缸中約5 min，取出，揮盡薄層板上所吸附的碘，最后放于紫外光燈（波長為365 nm）下，檢視，結(jié)果見圖1所示。

圖1 不同炮制方法下的延胡索的薄層色譜圖

從薄層色譜圖上可以看出，所有供試品的斑點(diǎn)均與對照品的斑點(diǎn)出現(xiàn)在同一位置上，且呈現(xiàn)出相同顏色的熒光。但未經(jīng)炮制的延胡索生品（9、10號）較其他炮制后的延胡索來說，斑點(diǎn)稍小且顏色稍淺，而經(jīng)醋烘、醋煮、醋炙、酒炙炮制后的延胡索中，斑點(diǎn)最大且最亮的為醋炙（5、6號）后的供試品溶液，其次為酒炙、醋烘、醋煮后的延胡索斑點(diǎn)。

3 討論

傳統(tǒng)的延胡索炮制方法主要有醋炙、醋烘、醋煮和灑炙等，目前，關(guān)于這些不同的炮制方法對延胡索中延胡索乙素影響的研究報(bào)道有許多，如許捷[3]曾用醋炙、醋煮、醋烘、酒炙的方法炮制延胡索，并采用高效液相色譜法測定炮制后延胡索中延胡索乙素的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)醋炙和酒炙這2種方法炮制后的延胡索中延胡索乙素含量較醋煮和醋烘高，而未經(jīng)任何炮制處理后的延胡索中延胡索乙素含量最低[4]。本研究通過薄層色譜分析也證實(shí)，醋炙延胡索、酒煮延胡索所、醋烘延胡索及酒炙延胡索后得到的斑點(diǎn)較延胡索生品的斑點(diǎn)大且顏色亮，且斑點(diǎn)的位置均與延胡索乙素對照品的薄層色譜位置一致，說明經(jīng)過炮制后，延胡索中的有效成分延胡索乙素含量有所提高，這可能是因?yàn)檠雍髦械纳飰A大多都是以游離態(tài)的形式存在，而游離態(tài)的生物堿卻難溶于水，但經(jīng)過醋制或酒制后，可能會形成生物堿的鹽類，而使其的溶解度增加，進(jìn)而提高含量，使斑點(diǎn)變大且增亮。還有可能是因?yàn)檠雍鹘?jīng)醋炙和酒炙后，改變了延胡索中有效成分的結(jié)構(gòu)，有利于有效成分的浸潤、溶解、擴(kuò)散，從而增強(qiáng)了延胡索乙素的溶出[5]。

醋煮炮制方法下延胡素的斑點(diǎn)較小較暗，提示該種炮制方法下得到的延胡索中乙素含量較低，其原因的可能是因?yàn)橹蟮臅r(shí)間過長，破壞了生物堿的結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響了其含量，所以在采用醋煮的方法對延胡索進(jìn)行炮制時(shí)，需注意煮的時(shí)間，以免破壞了有效成分的結(jié)構(gòu)。而醋炙后的斑點(diǎn)最大最亮，提示此炮制方法下得到的延胡索乙素含量最高，該種方法是一種較為合適的延胡索的炮制方法，但在采用該種方法炮制延胡索時(shí)，需嚴(yán)格掌握火候，因延胡索大小不一，若火力較大，則會出現(xiàn)受熱不均，炒制過渡，進(jìn)而影響飲片的質(zhì)量[6]。

總而言之，延胡索是中醫(yī)臨床上常用的藥材，通常需經(jīng)炮制后再入藥，然而，由于多種炮制方法存在較大的差異，因此選擇一種優(yōu)質(zhì)的炮制方法就顯得尤其重要，本研究采用超聲法提取了不同炮制方法后的延胡索乙素，并采用薄層色譜對其進(jìn)行鑒別和對比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)醋炙法是炮制延胡索的最佳方法，該方法操作簡便，方法可行，且質(zhì)量可控，適用于延胡索的炮制，為其臨床用藥的有效性奠定了基礎(chǔ)。

[1]鄭弘,許紅瑋.延胡索不同炮制方法的薄層色譜鑒別對比研究[J].中醫(yī)學(xué)報(bào),2013,28(5):695-696.

[2]沈志沖.元胡不同炮制方法對延胡索乙素含量的影響[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2011,38(21): 4454-4455.

[3]徐捷.不同炮制方法對延胡索有效成分影響研究[J].河北醫(yī)藥,2013,35(3): 454-455.

[4]李瑞麗,王喜民,張玉東.薄層色譜法鑒別胃康靈膠囊中白芍、三七和延胡索[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2013,9(3):19-20.

[5]劉霞,張小慧,仝立國,等.胃腸康定膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2012,23(05):582-585.

[6]付莉,韓桂茹.三種制劑中多味藥材的同時(shí)鑒別研究[J].中國藥事,2012,26(1):69-71.