王玉紅,賈鵬博,張崇,姜秀煜
(黑龍江省帶嶺林業(yè)科學(xué)研究所,黑龍江伊春153106)
篤斯越桔(VacciniumuliginosumLinn.)為杜鵑花科越桔屬多年生落葉小灌木。株高20~80cm;樹皮紫褐色或帶紅褐色,有光澤,多分枝;枝暗紫褐色,纖維狀剝落,小細(xì)枝,多彎曲,褐色,無(wú)毛或有短毛;葉互生,倒卵形、橢圓形或長(zhǎng)卵形,長(zhǎng)1~3cm,寬0.8~1.5cm;具花1~3朵,生于前一年小枝上,花下垂;漿果,成熟后黑紫色,球形或橢圓形,直徑達(dá)1cm,具白霜,微酸甜;花期6月,果期7~8月,8月中旬后即脫落。產(chǎn)于小興安嶺北坡山地;我國(guó)黑龍江、吉林、內(nèi)蒙古均有分布。耐水濕、喜光,常生于溝谷滿覆苔蘚的沼澤地、濕潤(rùn)山坡、疏林下及溪流兩岸,多成片生長(zhǎng)。它是集營(yíng)養(yǎng)、保健于一身的第三代果樹,被國(guó)際糧農(nóng)組織列為人類五大健康食品之一,具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值與廣闊的開發(fā)前景。為了更好的開發(fā)利用這一寶貴資源,2010年黑龍江省帶嶺林業(yè)科學(xué)研究所采用植物組織培養(yǎng)的方式,對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)繁增殖培養(yǎng)。我們以不同種類和濃度的激素以及其他因素對(duì)篤斯越桔的組培苗進(jìn)行誘導(dǎo),以獲得最佳的誘導(dǎo)條件,從而為篤斯越桔的工廠化育苗提供相關(guān)的技術(shù)參數(shù)。
選用黑龍江省帶嶺林業(yè)科學(xué)研究所組培室培養(yǎng)的優(yōu)良篤斯越桔苗,以及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑IBA、細(xì)胞分裂素6-BA。
試驗(yàn)采用四因素三水平正交設(shè)計(jì)[選用正交L9(34)正交表],6-BA濃度為因素A,分為0、0.5、1.5mg/L三個(gè)水平;IBA的濃度為因素B,分為0.05、0.1、0.2mg/L三個(gè)水平;光照強(qiáng)度為因素C,分為1、2、3燈;培養(yǎng)時(shí)間為因素D,分別為60、80、90d。以上均附加4.8g/L瓊脂、20g/L蔗糖。
2012年4月10日實(shí)驗(yàn)室組培技術(shù)人員將莖、葉、高度相似的篤斯越桔組培苗從培養(yǎng)瓶移出,分割成4cm長(zhǎng)的小段,然后放入分裝不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,在每個(gè)培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)基上平放4小段。共計(jì)9個(gè)試驗(yàn)號(hào),每個(gè)號(hào)6瓶,共需要216段。培養(yǎng)基pH5.2,123℃滅菌20min。培養(yǎng)室內(nèi)溫度控制在(25±2)℃,相對(duì)濕度控制在70%~80%,日光燈照射24h。2012年6月10日對(duì)篤斯越桔組培苗的生長(zhǎng)高度、莖粗進(jìn)行了第一次調(diào)查,將調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行了記錄,通過調(diào)查記錄發(fā)現(xiàn)每個(gè)試驗(yàn)號(hào)的生長(zhǎng)高度和莖粗的差異不大;2012年7月1日和7月10日又對(duì)篤斯越桔組培苗進(jìn)行了第二次和第三次調(diào)查,將調(diào)查數(shù)據(jù)同樣進(jìn)行了記錄,通過調(diào)查記錄就能發(fā)現(xiàn),每個(gè)試驗(yàn)號(hào)的生長(zhǎng)高度和莖粗有了明顯的區(qū)別。將每個(gè)試驗(yàn)號(hào)中的生長(zhǎng)高度和莖粗的平均值列入表1進(jìn)行分析。
表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與計(jì)算結(jié)果
從表1中可以看出,3號(hào)試驗(yàn)的效果最好,篤斯越桔組培苗的生長(zhǎng)高度為3.35cm,莖粗為0.28cm,其生產(chǎn)組合為A1B3C3D3。
以表1中數(shù)據(jù)計(jì)算分析,各個(gè)因素對(duì)篤斯越桔組培苗的生長(zhǎng)高度及莖粗的影響進(jìn)行極差排序。R1—苗高:A(6-BA)>D(培養(yǎng)時(shí)間)>B(IBA)>C(光照強(qiáng)度);R2—莖粗:D(培養(yǎng)時(shí)間)>C(光照強(qiáng)度)>A(6-BA)>B(IBA)。這一試驗(yàn)結(jié)果表明6-BA的濃度是影響篤斯越橘組培苗的生長(zhǎng)高度的主要因素,而培養(yǎng)時(shí)間是影響莖粗的主要因素。
用表1中數(shù)據(jù)計(jì)算分析,6-BA濃度為0mg/L的比濃度為0.5mg/L的高度高出9.7%,比濃度為1.5mg/L的高度高出26.2%。培養(yǎng)時(shí)間為90天的比培養(yǎng)時(shí)間為60天的莖粗粗出97%,比培養(yǎng)時(shí)間為80天的莖粗粗出19.6%。從苗高看,A1>A2>A3,B3>B1>B2,C3=C2>C1,D3>D2>D1,最佳組合為A1B3C3D3,與直觀表中的結(jié)果恰好吻合;再?gòu)那o粗來看,A1>A3>A2,B3=B1>B2,C3>C2>C1,D3>D2>D1,最佳組合為A1B3C3D3,也與表中的最佳組合為A1B3C3D3的結(jié)果相吻合。
綜合上述分析,6-BA的濃度是影響篤斯越橘組培苗生長(zhǎng)高度的主要因素,培養(yǎng)時(shí)間是影響莖粗的主要因素。6-BA濃度為0mg/L的比濃度為0.5mg/L的高度高出9.7%,比濃度為1.5mg/L的高度高出26.2%。培養(yǎng)時(shí)間為90天的比培養(yǎng)時(shí)間為60天的莖粗粗出97%,比培養(yǎng)時(shí)間為80天的莖粗粗出19.6%。3號(hào)試驗(yàn)的效果最好,組培苗的生長(zhǎng)高度為2cm,莖粗為0.28cm,其組合為:A1B3C3D3,即生產(chǎn)選用6-BA的濃度0mg/L,IBA的濃度0.2mg/L,光照強(qiáng)度3燈,培養(yǎng)時(shí)間90天進(jìn)行篤斯越橘組織培養(yǎng)的增殖效果較好。
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