盧家奇 趙 松 楊 洋 齊 宇 張春敭

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院胸外科，河南 鄭州 450052)

肺癌是當(dāng)今導(dǎo)致死亡的主要惡性腫瘤之一，目前5年生存率僅有15%，90%以上的患者死于肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)并發(fā)癥〔1〕。肺癌的生物學(xué)特征復(fù)雜，預(yù)后因素較多，目前已發(fā)現(xiàn)一些能預(yù)測肺癌患者的生存以及指導(dǎo)輔助治療的獨立預(yù)后因素。Ki67抗體能識別增殖細(xì)胞上的抗原，能明確反映瘤細(xì)胞的增殖率，已被廣泛用于評估各種腫瘤病灶的生長分?jǐn)?shù)〔2,3〕。雖然關(guān)于Ki67已有大量研究，但Ki67的預(yù)后價值仍存在爭議〔4～10〕。本研究通過對非小細(xì)胞肺癌小活檢組織進行Ki67的檢測，擬分析其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性和診斷價值。

1 資料與方法

1.1臨床資料 我院2012年1月至2013年12月接受纖支鏡或穿刺活檢并檢測其中Ki67表達的非小細(xì)胞肺癌患者68例，其中男40例，女28例，平均年齡58.9歲，有吸煙史35例，腺癌47例，鱗癌21例，淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移者20例(N1轉(zhuǎn)移4例、N2轉(zhuǎn)移16例)，Ⅰ期36例、Ⅱ期15例，Ⅲ期17例。入選標(biāo)準(zhǔn)：①我院接受包括系統(tǒng)縱隔淋巴結(jié)清掃在內(nèi)的肺癌根治術(shù)；②術(shù)后病理證實為非小細(xì)胞肺癌；③術(shù)前經(jīng)纖支鏡檢查或肺穿刺活檢并行Ki67檢測；④病案信息中有相關(guān)信息記錄。排除病理類型不為鱗癌、腺癌、大細(xì)胞癌者；活檢病理與術(shù)后病理不一致者。

1.2檢測方法 采用Envision系統(tǒng)二步法(試劑由DAKO公司提供)。標(biāo)本經(jīng)甲醛固定的，石蠟包埋，常規(guī)脫蠟，水化，抗原修復(fù)后用蒸餾水、磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗，滴加3%過氧化氫，孵育10 min，再次用蒸餾水、PBS清洗，滴加一抗(即用型)，放入冰箱4℃過夜。PBS清洗3遍，5 min/遍，二抗孵育45 min。再次用PBS清洗3遍，5 min/遍，孵育，光鏡控制顯色。復(fù)染，脫水，中性樹膠封片。用各種一抗要求的組織分別進行陽性對照，PBS替代一抗作為陰性對照。

評定標(biāo)準(zhǔn)：兩位病理科醫(yī)生閱片審核。高倍鏡下隨機計數(shù)至少1 500個癌細(xì)胞，細(xì)胞核著色的細(xì)胞數(shù)占20%以下的為陰性組，陽性細(xì)胞數(shù)超過20%的為陽性組。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進行分析，進行單因素非條件Logistic回歸分析。

2 結(jié) 果

單因素非條件Logistic回歸分析顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與Ki67的表達呈正相關(guān)(P<0.05)，不受性別、年齡、吸煙史、組織學(xué)類型的影響，見表1。靈敏度80%，特異度45.8%，約登指數(shù)0.258，符合率57.4%，陽性預(yù)測值39.5%，陰性預(yù)測值88%。陽性似然比1.57，陰性似然比0.33。

表1 單因素非條件Logistic回歸結(jié)果分析

3 討 論

肺癌的病理學(xué)診斷往往由纖支鏡和肺穿刺活檢獲得，然而是否進行進一步的免疫組化檢驗仍有不同意見。Ki67是一種細(xì)胞增殖標(biāo)志，能可靠地反映惡性腫瘤的增殖率、惡性程度及侵襲力，有研究〔11〕表明，Ki67表達陽性為臨床預(yù)后較差的指標(biāo)，認(rèn)為Ki67指數(shù)與患者生存時間呈反比，細(xì)胞分化程度以及浸潤轉(zhuǎn)移與Ki67蛋白的表達有相關(guān)性，但這些研究大都針對術(shù)后標(biāo)本或與小活檢組織一并分析，本研究說明無明顯選擇偏倚，因此Ki67是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險因素。Ki67的檢測對非小細(xì)胞肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有一定診斷價值，臨床中應(yīng)結(jié)合其他檢查。另外，Ki67的表達也許能夠反映非小細(xì)胞肺癌的侵襲性，具有評估非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的價值。

4 參考文獻

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