王芝琴 許 劍 陳 茵 陶麗玲

卵巢癌是常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，死亡率是婦科惡性腫瘤的第1位[1]，由于卵巢癌早期缺乏典型的臨床表現(xiàn)，多數(shù)患者明確診斷時已處于晚期，即使經(jīng)過積極的治療，5年生存率也不足30%。因此，早診斷、早治療對改善患者預(yù)后，延長生存期有積極的意義。糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)是卵巢癌最常用的檢測指標(biāo)，但是其假陽性率高，單純以CA125作為初次篩選的指標(biāo)可能會造成部分患者的漏診和誤診。人類附睪蛋白4(humanepididymisprotein4，HE4)是近年新發(fā)現(xiàn)的卵巢癌腫瘤標(biāo)志物，其敏感性及特異性均優(yōu)于CA125。本研究旨在探討卵巢癌患者血清和腫瘤組織中HE4、CA125聯(lián)合檢測的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年2月-2013年5月在我院婦科進(jìn)行手術(shù)切除的卵巢腫瘤患者140例，根據(jù)術(shù)后病理結(jié)果分為卵巢癌組(A組)和卵巢良性腫瘤組(B組)。卵巢癌組75例，年齡29～79歲，平均年齡(49.2±3.6)歲；病理分期：早期(Ⅰ～Ⅱ期)16例，晚期(Ⅲ～Ⅳ期)59例，所有患者術(shù)前均未行放療和化療。卵巢良性腫瘤組65例，年齡19～68歲，平均(44.1±4.2)歲。另外選擇同期在我院由于其它卵巢疾病行子宮附件切除的45例患者作為對照組(C組)，年齡34～65歲，平均年齡(50.2±4.6)歲。

1.2 方法

1.2.1 血清HE4及CA125檢測 所有患者均于術(shù)前1天及術(shù)后1周采取清晨空腹靜脈血，高速離心后分離血清，置于-80℃的冰箱內(nèi)待測。HE4測定采用酶聯(lián)免疫法，正常參考值為0～150 pmol/L；CA125測定采用放射免疫分析，正常參考值0～35 pmol/L。以上檢測均嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行。對卵巢癌患者出院后1年進(jìn)行血清HE4和CA125的檢測。

1.2.2 腫瘤組織HE4及CA125蛋白測定 將新鮮腫瘤組織甲醛固定、常規(guī)脫水、石蠟包埋后，分別進(jìn)行HE和EnVsion兩步法免疫組化染色。以上操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒提示HE4陽性，細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒提示該細(xì)胞為CA125的陽性細(xì)胞，按照Guo等[2]的方法對標(biāo)本的染色程度和陽性細(xì)胞的百分比進(jìn)行分級。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)采用SPSS19.0版本軟件分析。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示并采用方差分析，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同卵巢組織中HE4和CA125的表達(dá)

A組HE4陽性表達(dá)率均明顯高于B組和C組(χ2=81.1704、79.5759，P=0.0000)；A組CA125陽性表達(dá)率也明顯高于B組和C組(χ2=89.3932、88.6622，P=0.0000)。A組中HE4和CA125陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=3.2508，P=0.0714)，見表1。

表1 3組患者卵巢組織中HE4和CA125的表達(dá) (例，%)

2.2 3組患者血清HE4和CA125表達(dá)情況

A組術(shù)前HE4和CA125水平明顯高于B組和C組(P<0.01)；Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者HE4和CA125水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.01)。術(shù)后HE4和CA125水平均下降，顯著低于手術(shù)前(P<0.01)。B組術(shù)前CA125水平高于C組(P<0.01)，但術(shù)后2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 3組患者血清中HE4和CA125的表達(dá)

注：a 為與B組和C組比較，P<0.01；b 為與Ⅰ～Ⅱ期比較，P<0.01；c為與C組比較，P<0.05；d為與術(shù)后比較，P<0.01。

2.3 血清HE4和CA125對卵巢癌診斷價值比較

HE4聯(lián)合CA125檢測，任何一項高于正常均記為陽性，以病理診斷為標(biāo)準(zhǔn)。血清HE4聯(lián)合CA125檢測對卵巢癌診斷的敏感性和特異性均高于任何一項單獨檢測，見表3。

表3 HE4和CA125對卵巢癌診斷的靈敏度和特異度

2.4 出院后1年卵巢癌患者血清HE4、CA125的變化情況

卵巢癌患者出院后1年12例復(fù)發(fā)，63例病情穩(wěn)定。復(fù)發(fā)組血清HE4、CA125水平明顯高于穩(wěn)定組，見表4。

表4 出院后1年卵巢癌組患者血清HE4、CA125水平

3 討論

CA125是卵巢癌常用的血清檢測標(biāo)志物，在卵巢癌的術(shù)前診斷及術(shù)后病情評估中發(fā)揮著重要的作用，但CA125對Ⅰ～Ⅱ卵巢癌的診斷率不高[3]，尤其Ⅰ期卵巢癌單用CA125診斷的陽性率僅為10%左右[4]。雖然對Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌有著較高的敏感度，但卵巢的其它良惡性病變、子宮內(nèi)膜異位癥、肝腫瘤、肺腫瘤、乳腺腫瘤以及任何刺激腹膜的疾病均可導(dǎo)致血清CA125水平的升高[5]，因此單用血清CA125指標(biāo)的變化對卵巢癌的診斷存在著較高的假陽性率，限制了其在臨床的應(yīng)用。因此，婦產(chǎn)科學(xué)者試圖探尋一種新的腫瘤標(biāo)志物來提高對卵巢癌診斷的敏感性和特異性。

HE4是附睪分泌蛋白E4 的前體，是一種蛋白酶抑制劑，由HE4蛋白基因編碼，該基因位于染色體20q12-13.1上，對機體的免疫功能具有保護(hù)作用，在女性生殖管道上皮及男性附睪上皮組織中含量較高，而在正常卵巢組織中不能測出。HE4在卵巢癌組織中呈高表達(dá)，100%的卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌、93%的漿液性上皮癌和50%的透明細(xì)胞癌組織中HE含量異常增高[6]，并有研究顯示在卵巢癌患者明確診斷前12個月，血清學(xué)檢測就能發(fā)現(xiàn)HE4蛋白含量的變化[7]，并可作為卵巢癌早期篩查指標(biāo)。國內(nèi)外已有藥品管理機構(gòu)允許將血清HE4檢測用于卵巢癌的研究，并認(rèn)為HE4蛋白是重要的卵巢癌腫瘤標(biāo)志物[8]。

本研究對3組患者的病變卵巢組織的HE4和CA125含量進(jìn)行了檢測，發(fā)現(xiàn)2種腫瘤標(biāo)志物在卵巢癌組織中明顯高表達(dá)，與良性卵巢腫瘤組織和其他卵巢疾病組織比較有顯著性差異，而HE4在卵巢疾病組織和良性卵巢腫瘤組織中呈低表達(dá)或不表達(dá)，與文獻(xiàn)報道相符[6]。對3組患者進(jìn)行血清學(xué)檢測，結(jié)果顯示卵巢良性腫瘤CA125水平高于其他卵巢疾病(P<0.05)，而HE4水平2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示血清HE4在卵巢腫瘤的良惡性判斷方面劣于CA125。2種腫瘤標(biāo)志血清含量術(shù)前卵巢癌組顯著高于另外2組，與HE4和CA125在不同病理性質(zhì)卵巢組織的檢測一致，Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者高于Ⅰ～Ⅱ期患者，術(shù)后卵巢癌組血清HE4和CA125含量均顯著下降(P<0.01)，1年后，卵巢癌復(fù)發(fā)患者2種腫瘤標(biāo)志物均顯著高于病情穩(wěn)定患者，提示血清HE4和CA125表達(dá)情況與卵巢癌組織浸潤和轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系，并可作為評價臨床療效和監(jiān)測復(fù)發(fā)情況的重要指標(biāo)。另外本研究結(jié)果還顯示單用血清CA125對卵巢癌診斷的敏感性高于HE4，但特異性低于后者，而HE4和CA125聯(lián)合檢測較單用CA125進(jìn)一步提高了敏感性，比單用HE4進(jìn)一步提高了特異性，優(yōu)于任何一項單獨檢測，與國外Granato等[9]的研究高度一致。

綜上所述，聯(lián)合檢測組織和血清中的HE4和CA125可提高卵巢癌診斷的敏感性和特異性，對卵巢癌的早期診斷、療效評估和病情監(jiān)測具有重要價值。

[1] 韓文明.HE4和CA125聯(lián)合檢測在卵巢癌診斷中的應(yīng)用價值〔J〕.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(14)：1757-1758.

[2] Guo JL，Zheng SJ，Li YN，et al.Toxicarioside A inhibits S-GC-7901 proliferation，migration and invasion via NF-κB/bFGF signaling〔J〕.World J Gastroenterol，2012，18(14)：1602-1609.

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[4] 宋曉翠，滕洪濤，張建海，等.聯(lián)合檢測血清HE4和CA-125在卵巢癌早期診斷及病情監(jiān)測中的價值〔J〕.實用醫(yī)學(xué)雜志，2012，28(14)：2380-2382.

[5] 黎明鸞，陳 蔚，林葉飛，等.CA125及HE4蛋白在卵巢癌組織及血清中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.中國婦幼保健，2013，28(24)：4023-4026.

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[9] Granato T，Midulla C，Longo F，et al.Role of HE4，CA72.4，and CA125 in monitoring ovarian cancer〔J〕.Tumour Biol，2012，33(5)：1335-1339.