高進(jìn)良 高春生 李 爍 錢 迪 杜政德 韓小璐

鼻咽癌是發(fā)生于鼻咽上皮細(xì)胞1種惡性腫瘤，常以頸部腫塊為首發(fā)癥狀，具有惡性程度高、解剖結(jié)構(gòu)特殊、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移較早及預(yù)后差等特點(diǎn)[1]。近年來，研究發(fā)現(xiàn)SOX家族的轉(zhuǎn)錄因子與腫瘤關(guān)系密切[2]。本研究旨在探討轉(zhuǎn)錄因子SOX11在鼻咽癌組織中的表達(dá)情況及與臨床病理的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院自2010年1月至2012年10月間收治的初治鼻咽癌患者26例，所有新鮮組織標(biāo)本均經(jīng)鼻咽活檢或手術(shù)獲取[3]?；颊呒韧唇邮苓^化放療。其中男性16例，女性10例，年齡31～65歲，平均年齡(44.2±6.5)歲，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移11例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15例。腫瘤組織形態(tài)以節(jié)結(jié)型和潰瘍型為主，黏膜下浸潤(rùn)型13例。臨床分期：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別有5、7、8和6例。選取20例鼻咽炎患者的鼻咽黏膜炎癥組織作為對(duì)照組。兩組患者年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 試劑及方法

按試劑盒要求提取RNA溶液;嚴(yán)格按照RNA提取試劑盒的方法進(jìn)行，總RNA提取后，取RNA溶液1 μl，采用spectrophotomete分光光度計(jì)測(cè)定OD260、OD280等值。RNA純度為OD260/OD280，比值在1.7～2.0間說明純度尚可，適合PCR實(shí)驗(yàn)。利用RNA在260 nm波長(zhǎng)處有吸收峰，因此可以測(cè)定RNA濃度。OD值為1相當(dāng)于大約40 μg/μl的單鏈RNA，計(jì)算公式:RNA總濃度(μg/μl)=OD260×0.04×稀釋倍數(shù)。擴(kuò)增：取各例鼻咽癌組織RNA作為模板，對(duì)上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成的PCR引物序列進(jìn)行擴(kuò)增。引物5'-GGTGGATAAGGATTTGGATTCG-3',反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性3 min，然后94℃變性60 s，55℃復(fù)性60 s，72℃延伸45 s，擴(kuò)增40個(gè)循環(huán)，72℃延伸10 min。鼻咽癌及鼻咽炎標(biāo)本均至少重復(fù)一次PCR反應(yīng)。取5 ml PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳，再按照PCR產(chǎn)物純化試劑盒使用說明要求進(jìn)行純化操作。將實(shí)驗(yàn)所觀察到的擴(kuò)增條帶與PCR marker進(jìn)行對(duì)照。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 鼻咽癌組和鼻咽炎組SOX11mRNA水平的比較

由表1可見，鼻咽癌組與鼻咽炎組SOX11mRNA水平進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 鼻咽癌組和鼻咽炎組SOX11mRNA水平比較

2.2 SOX11mRNA水平與鼻咽癌臨床病理特征的關(guān)系

由表2可見，SOX11mRNA水平與鼻咽癌T分期、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分化程度有關(guān)，而與患者年齡、性別及病程無相關(guān)性(P>0.05)。

3 討論

轉(zhuǎn)錄因子在基因轉(zhuǎn)錄過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，轉(zhuǎn)錄因子的異?？梢詫?dǎo)致細(xì)胞蛋白異常表達(dá)，深入探討腫瘤轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制對(duì)于闡明腫瘤發(fā)生進(jìn)展的機(jī)制以及提供研究新型抗腫瘤藥物的靶點(diǎn)具有非常重要的意義[4-5]。研究表明，SOX(SRY-related high-mobility)家族基因編碼的蛋白可作為一類重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。SOX家族基因在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、性別的分化、性別的決定及多種組織器官的形成中起著非常重要的作用[6]。SOX基因家族被分為A～J共10個(gè)不同的亞組，本研究選取C亞組中的SOX11作為研究對(duì)象進(jìn)行研究，SOX11基因位于2p58.3-2p58.4，共由8 718個(gè)堿基組成，研究表明，SOX11mRNA的高表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展及增殖相關(guān)，是預(yù)后不良的1個(gè)新指標(biāo)[7-8]。

表2 SOX11mRNA水平與鼻咽癌臨床病理特征的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示，鼻咽癌組SOX11mRNA值為(3.2±0.3)μg/μl，鼻咽炎組為(2.1±0.4)μg/μl，兩組進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示轉(zhuǎn)錄因子SOX11在鼻咽癌中為高表達(dá)，為鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展提供了新的例證。26例鼻咽癌患者組織標(biāo)本中SOX11mRNA水平與其T分期、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理分化程度有關(guān)，提示轉(zhuǎn)錄因子SOX11在腫瘤細(xì)胞發(fā)生浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的過程中可能發(fā)揮了重要作用，與相關(guān)研究結(jié)果一致[9-10]。

綜上所述，轉(zhuǎn)錄因子SOX11 可能在腫瘤發(fā)生與腫瘤細(xì)胞分化和細(xì)胞增殖過程中起著直接或間接的作用。隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展，對(duì)SOX11基因的研究也越來越受到重視，轉(zhuǎn)錄因子SOX11對(duì)鼻咽癌的診治、評(píng)估預(yù)后以及提供研究新型抗腫瘤藥物的靶點(diǎn)具有非常重要的臨床價(jià)值，但具體作用機(jī)制有待做更深入的研究。

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