云亞歌

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院眼科，青海 西寧 810001)

眼瞼基底細(xì)胞癌在老年人常見，病變發(fā)生時(shí)多種蛋白表達(dá)失調(diào)。連接子蛋白(CX)43是建立細(xì)胞間縫隙連接通訊的重要蛋白，其羧基端包含大部分與其他蛋白結(jié)合的位點(diǎn)，對(duì)黏附、細(xì)胞骨架和連環(huán)蛋白均有一定的調(diào)節(jié)作用〔1,2〕。近來人們也關(guān)注CX43在腫瘤中的表達(dá)，認(rèn)為其作為抑癌基因起作用〔3,4〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是黏附蛋白家族的重要成員，在正常基底細(xì)胞中高表達(dá)，對(duì)維持上皮細(xì)胞的形態(tài)和功能起重要作用〔5〕。

基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解的重要蛋白，其高表達(dá)時(shí)可以溶解ECM成分，尤其是基底膜，使腫瘤細(xì)胞易于脫離原發(fā)灶，形成轉(zhuǎn)移瘤〔6,7〕。關(guān)于CX43、E-cadherin和MMP-9在老年基底細(xì)胞癌中的表達(dá)特征尚未見報(bào)道。本文關(guān)注老年眼瞼基底細(xì)胞癌患者癌組織中CX43、E-cadherin和MMP-9的表達(dá)及相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1臨床資料 我院2009年8月至2013年6月眼瞼基底細(xì)胞癌老年患者98例作為觀察組，其中男60例，女38例，年齡60～83(平均69.1)歲。均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中皮膚腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)的診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除診斷不明確及伴有其他惡性腫瘤的患者。選擇同期在我院診斷為基底細(xì)胞乳頭狀瘤的老年患者70例作為對(duì)照組，男40例，女30例，年齡60～82(平均68.7)歲。兩組一般臨床資料無明顯差別，具有可比性。

1.2CX43、E-cadherin和MMP-9表達(dá)的檢測(cè) 應(yīng)用免疫組化SP法，DAB染色。嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作，嚴(yán)格質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3CX43、E-cadherin和MMP-9的判定方法 CX43和MMP-9以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)黃染顆粒為陽性細(xì)胞，E-cadherin以細(xì)胞膜中出現(xiàn)完整的黃染顆粒為陽性細(xì)胞。每張切片中觀察5個(gè)400倍高倍視野，陽性細(xì)胞≥25%為陽性，陽性細(xì)胞<25%為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組CX43、E-cadherin和MMP-9蛋白表達(dá)陽性率的比較 與對(duì)照組比較，觀察組CX43和E-cadherin低表達(dá)，MMP-9高表達(dá)(P<0.000 1)，見表1。

2.2觀察組不同臨床特征患者CX43、E-cadherin和MMP-9蛋白表達(dá)陽性率的比較 觀察組CX43、E-cadherin和MMP-9表達(dá)陽性率與腫瘤最大徑、臨床分期及Ki67表達(dá)密切相關(guān)。見表2。

2.3觀察組CX43、E-cadherin和MMP-9表達(dá)相關(guān)性 CX43和E-cadherin表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.49，P=0.020 9)，而CX43和MMP-9表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.45，P=0.032 6)。

表1 兩組CX43、E-cadherin和MMP-9蛋白表達(dá)陽性率比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征患者CX43、E-cadherin和MMP-9蛋白表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

老年患者常伴退行性改變，使腫瘤蛋白的表達(dá)異常率更高。CX43是生物體組織中最廣泛分布的CX，其作為跨膜蛋白，其氨基酸和羧基端定位于胞質(zhì)，兩個(gè)胞外環(huán)與相鄰細(xì)胞的對(duì)應(yīng)區(qū)域接觸，一個(gè)胞內(nèi)環(huán)則被認(rèn)為參與通道通透性的調(diào)節(jié)，羧基端隨著不同CX的長(zhǎng)度而變化〔8,9〕。它們會(huì)經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄、翻譯后的修飾，被一些激酶所磷酸化。目前多數(shù)研究顯示CX43起著腫瘤抑制因子的作用〔10,11〕。也有學(xué)者〔12〕研究CX43在腫瘤晚期可以觀察到其瞬間上調(diào)，如乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到骨組織時(shí)。E-cadherin是上皮細(xì)胞間連接的重要蛋白，在正常組織時(shí)高表達(dá)，對(duì)維持細(xì)胞形態(tài)和功能的完整性有重要作用。當(dāng)其表達(dá)下降后，細(xì)胞間連接松散，易離開原發(fā)灶〔13〕。MMP-9也稱明膠酶B，正常情況下低表達(dá)，可以使基底膜和ECM維持完整性，當(dāng)腫瘤增殖活躍或呈進(jìn)展?fàn)顟B(tài)時(shí)，MMP-9表達(dá)升高，此時(shí)ECM可以形成有效的降解，腫瘤細(xì)胞與外圍屏障功能丟失，腫瘤易于播散形成轉(zhuǎn)移〔14〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示CX43和E-cadherin低表達(dá)、MMP-9高表達(dá)促進(jìn)基底細(xì)胞癌的發(fā)生過程。CX43可能通過通道依賴性和非通道依賴性發(fā)揮作用。在通道依賴性途徑中，CX43的首要功能是建立縫隙連接通道，調(diào)節(jié)細(xì)胞之間胞質(zhì)小分子的交換，此機(jī)制主要與CX43抑制腫瘤和腫瘤細(xì)胞缺乏正常細(xì)胞間交換的分子有關(guān)〔15,16〕。近來也有學(xué)者〔17〕關(guān)注CX43非通道依賴性的調(diào)控機(jī)制，即對(duì)細(xì)胞增殖凋亡的影響。CX43除了可通過增強(qiáng)細(xì)胞間縫隙連接通訊來抑制腫瘤細(xì)胞增殖外，還可通過延長(zhǎng)細(xì)胞周期來抑制腫瘤細(xì)胞增殖〔18〕。研究認(rèn)為CX43可以調(diào)節(jié)一些細(xì)胞周期相關(guān)基因的表達(dá)，如細(xì)胞周期相關(guān)蛋白A、D、P21、P27等〔19〕。本文結(jié)果提示CX43、E-cadherin和MMP-9 3種蛋白異常表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和細(xì)胞的增殖過程。CX43低表達(dá)促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的過程中可能與細(xì)胞黏附和ECM降解作用有關(guān)〔20,21〕。CX43低表達(dá)后，可以引起細(xì)胞間連接的松動(dòng)，使腫瘤細(xì)胞易脫離原發(fā)灶，此時(shí)由于MMP-9等ECM溶解作用，使腫瘤轉(zhuǎn)移的通路被打開，腫瘤細(xì)胞突破基底膜或ECM，向周圍浸潤(rùn)性生長(zhǎng)和遠(yuǎn)處播散〔22～24〕。本實(shí)驗(yàn)也間接顯示CX43對(duì)Ki67表達(dá)增殖作用的調(diào)節(jié)作用，即CX43高表達(dá)可以有效抑制腫瘤性的增殖過程，而CX43低表達(dá)可以使增殖活性提高，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。

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