李英蘭 朱愛琴 鐘 欣 姜 瑞

(青海省人民醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)研究所，青海 西寧 810007)

胱抑素C(CysC)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種特異性高、準(zhǔn)確性好的新指標(biāo)〔1〕，CysC在腫瘤中的表達與腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤有關(guān)〔1〕。另外，肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型膠原(PcⅢ)、層粘蛋白(LN)和Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)均為重要的細胞外基質(zhì)(ECM)成分,在一定程度上也反映癌癥浸潤、轉(zhuǎn)移〔2〕,其水平的高低與肝纖維化及肝細胞損傷的程度有關(guān)。近年來,血清肝纖維化指標(biāo)檢測在肝癌臨床評價中有所報道,但聯(lián)合觀察血清CysC與肝纖維化指標(biāo)的報道較少。本研究旨在探討血清CysC及肝纖維化指標(biāo)與肝癌及肝癌是否有轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 對象和方法

1.1對象 2011年1～12月在我院住院的老年肝癌患者48例和健康對照組30例。將肝癌組分為：原發(fā)性肝癌組25例，平均年齡(63±9.17)歲，其中男15例，女10例；轉(zhuǎn)移性肝癌組23例，平均年齡68±8.25歲，其中男16例，女7例。正常對照組為本院健康體檢者30例，平均年齡(62±6.25)歲，其中男18例，女12例。對照組各項體檢指標(biāo)均為正常，無肝臟疾病史，肝炎病毒檢測均為陰性，肝功能正常。原發(fā)性肝癌組均為經(jīng)影像、肝穿或手術(shù)病理學(xué)檢查確診。轉(zhuǎn)移性肝癌組病灶均經(jīng)彩超、CT或磁共振成像(MRI)檢查確診。肝癌組排除因應(yīng)用大量糖皮質(zhì)激素和甲狀腺功能異常等可影響體內(nèi)CysC產(chǎn)生者。

1.2方法

1.2.1肝纖維化指標(biāo)的檢測 空腹采集靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min分離血清，于-20℃保存待測。采用放射免疫分析法檢測HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C，試劑盒由北京北方生物技術(shù)有限公司提供，儀器為上海日環(huán)光電有限公司SN26105型γ測量儀，操作由專人嚴(yán)格按說明操作。

1.2.2血清CysC測定 采用膠乳增強免疫比濁法。檢測試劑盒由浙江康特生物科技有限公司提供。儀器為日本OlympusAU600型全自動生化分析儀。由專人嚴(yán)格按說明操作。

2 結(jié) 果

2.13組研究對象HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C的比較 肝癌各組患者血清HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C水平與正常對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，并且HA、LN、Ⅳ-C濃度隨腫瘤的轉(zhuǎn)移而有所升高，見表1。

表1 3組HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C的比較

2.23組研究對象Cys C水平 原發(fā)性肝癌組患者血清Cys C濃度為(2.84±0.13)mg/L，明顯低于轉(zhuǎn)移性肝癌組(4.20±0.44)mg/L，但兩者均高于正常對照組人群〔(0.81±0.09)mg/L，P<0.05〕。

3 討 論

CysC又被稱為半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C，是半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族成員之一，表達于所有的有核細胞，機體產(chǎn)生CysC也相當(dāng)恒定，不受炎癥、膽紅素、溶血、甘油三酯的影響,且與性別、年齡、肌肉量無關(guān)〔3〕。目前，許多研究重點放在半胱氨酸蛋白酶和它們的抑制劑的最佳平衡點上。研究顯示，半胱氨酸蛋白酶與它們的抑制劑在病理狀態(tài)下呈不均衡的狀態(tài)，惡性腫瘤的細胞中存在編碼CysC等蛋白質(zhì)的基因超表達；在惡性腫瘤中，胱氨酸蛋白酶與其抑制劑的分泌不平衡，從而促進腫瘤細胞的生長、侵襲和向遠處轉(zhuǎn)移；大量研究證明，胞外mRNA、蛋白質(zhì)和腫瘤組織中胱氨酸蛋白酶含量增高，而胞內(nèi)抑制劑則無變化或僅輕度增高，從而導(dǎo)致惡性腫瘤中胱氨酸蛋白酶與其抑制劑的分泌不平衡〔4〕。國內(nèi)對惡性腫瘤患者血清CysC研究尚少，孫繼興等〔5〕檢測惡性腫瘤患者血清、胸水、腹水中CysC的水平，發(fā)現(xiàn)CysC水平均高表達，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

肝纖維化形成的主要機制是肝細胞和內(nèi)皮細胞的慢性損傷激活炎性細胞和Kupffers細胞，導(dǎo)致星狀細胞的增生、轉(zhuǎn)化和分解，合成大量的膠原、蛋白多糖和糖蛋白的ECM。血清HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C是反映肝細胞的ECM代謝的血清學(xué)指標(biāo)〔6〕。ECM 與癌癥的發(fā)展侵襲及轉(zhuǎn)移、肝纖維化有密切關(guān)系，許多學(xué)者認(rèn)為癌癥浸潤、轉(zhuǎn)移機制之一就是癌細胞分泌蛋白溶解酶破壞ECM，HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C 游離出來，并反映到外周血循環(huán)中，因此血清中上述肝纖維化指標(biāo)含量與癌的浸潤生長及轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系〔2〕。HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C由肝臟間質(zhì)細胞合成,經(jīng)內(nèi)皮細胞攝取并分解,可準(zhǔn)確、靈敏地反映肝內(nèi)已生成的纖維量及肝細胞受損狀況。70%～90% 原發(fā)性肝癌患者伴有肝纖維化,故病情進展較快,預(yù)后較差。因此,了解肝癌患者肝纖維化程度尤為重要。本研究結(jié)果提示,血清HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C指標(biāo)肝癌各組明顯升高，原發(fā)性肝癌與轉(zhuǎn)移性肝癌組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。這可能與原發(fā)性肝癌多有慢性肝病基礎(chǔ)和肝細胞受損程度較重及腫瘤包膜易破壞,基底膜分解代謝活躍有關(guān)。因此,血清HA、PcⅢ、LN、Ⅳ-C可作為診斷癌癥和監(jiān)測其病情的重要參考指標(biāo)。

惡性腫瘤是一種人體細胞異常而且無限制的增生，最主要的特點是細胞生長失控，癌細胞具有強大的生長繁殖能力，又由于Cys C能在幾乎所有的有核細胞表達，由于Cys C無組織學(xué)特異性，由此可推測，其他惡性腫瘤有可能也會有血清Cys C檢測值升高，Cys C聯(lián)合肝纖維化指標(biāo)檢測有可能成為一種新的診斷及檢測肝癌患者病情的標(biāo)志物。

4 參考文獻

1閆 哲,王 欣.CysC與腫瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究現(xiàn)狀〔J〕.中華乳腺病雜志,2008；2(5):580-5.

2鐘 英,杜明華.肝癌患者血清中透明質(zhì)酸、層黏蛋白、Ⅲ型前膠原的測定及其診斷價值〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2006；34(1):25- 8.

3Dharnidharka VR,Kwon C,Stevens G.Serum cystatin C is superior to serum creatinine as a marker of kidney function:a meta analysis〔J〕.Am J Kidney Dis,2002；40(2):221.

4張云燕,朱禮剛,陳新寬,等.血清CysC在消化道腫瘤患者中的臨床意義〔J〕.放射免疫學(xué)雜志,2010；23(5):566-7.

5孫繼興,趙 剛,楊雅靜,等.惡性腫瘤患者血清、胸水、腹水、囊腫液、尿液中胱抑素C和可溶性尿激酶受體水平的測定〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2011;31(2):498.

6勞 明,潘元平,朱 波,等.原發(fā)性肝癌患者血清肝纖維化指標(biāo)檢測的意義〔J〕.實用癌癥雜志,2006；21(4)：4371-3.