馬寶慧 高永勝 潘桂蘭 陳曉東 呂 軍

(包頭醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，內(nèi)蒙古 包頭 014060)

木樨草素弱酸性四羥基黃酮類化合物，具有抗腫瘤、抗炎、抗菌等功效〔1〕。而關(guān)于木樨草素對(duì)高脂血癥大鼠血漿一氧化氮(NO)水平及氧化應(yīng)激的影響鮮有報(bào)道。本文研究木樨草素對(duì)大鼠血漿NO水平及抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1藥物與試劑 木樨草素(分析純，陜西慧科植物開發(fā)有限公司，純度99%)，溶于DMSO(含量<0.1%)，去離子水稀釋；血漿一氧化氮(NO)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.2動(dòng)物與飼料 Wistar大鼠24只，雄性，體重120～202 g，平均153 g，購自內(nèi)蒙古大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。高脂飼料由81.3%基礎(chǔ)飼料，0.5%膽鹽，10%豬油，3%膽固醇，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖組成。

1.3分組與方法 動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)5 d后，隨機(jī)分為空白對(duì)照組(C組)，高脂血癥模型組(H組)，木樨草素治療組(L組)，每組8只，自由飲水；C組飼喂基礎(chǔ)飼料，H組和L組飼喂高脂飼料，30 d高脂血癥模型成功建立后，L組每天灌胃(5 mg/100 g)，C組和H組每天以同體積去離子水灌胃。治療時(shí)間30 d。30 d后眶靜脈采血，分離血漿，檢測(cè)血漿NO、iNOS和血漿T-AOC、GPX、SOD、MDA。

2 結(jié) 果

2.1高脂飼料飼喂對(duì)大鼠血漿膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平的影響 見表1，適應(yīng)性喂養(yǎng)后H組和L組大鼠用高脂飼料飼喂1個(gè)月，血漿TC、TG含量顯著高于C組(P<0.05)，表明高脂血癥大鼠模型建立成功。

2.2木樨草素對(duì)大鼠血漿NO水平及iNOS活力的影響 H組大鼠血漿NO含量顯著增加，與C組相比具有明顯差異(P<0.05)。與H組相比，L組大鼠血漿NO含量明顯降低(P<0.05)，表明木樨草素治療可以降低大鼠血漿NO含量。iNOS活力在H組大鼠血漿顯著高于C組(P<0.05)。與H組相比，L組大鼠血漿NOS活力顯著下降(P<0.05)，表明木樨草素可以抑制iNOS活力，降低血漿NO含量。見表2。

2.3木樨草素對(duì)大鼠血漿抗氧化能力的影響 見表3，H組大鼠血漿T-AOC顯著降低，與C組相比具有顯著差異(P<0.05)；L組大鼠T-AOC顯著高于H組(P<0.05)，說明高脂血癥大鼠總抗氧化能力下降，木樨草素可以提高大鼠總抗氧化力。與C組相比，H組血漿GPX活力明顯下降(P<0.05)；L組大鼠血漿GPX和SOD活力顯著高于H組(P<0.05)。表明木樨草素可以使高脂血癥大鼠GPX、SOD活力顯著上升。高脂飼料飼喂可引起大鼠血漿MDA含量顯著高于C組，而木樨草素治療可以降低L組大鼠血漿MDA含量。

表1 高脂飼料飼喂1個(gè)月后大鼠血漿TC、TG測(cè)定結(jié)果

表2 實(shí)驗(yàn)大鼠血漿NO水平及iNOS活力

表3 實(shí)驗(yàn)大鼠抗氧化能力的測(cè)定結(jié)果

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)采用加喂膽固醇+豬油并輔以豬膽鹽的高脂飼料建立高脂血癥大鼠模型，通過檢測(cè)血漿TC、TG含量顯示30 d即造模成功。木樨草素是一種黃酮類物質(zhì)，已被國(guó)外確認(rèn)為一種法定的食品色素，表明其作為食品添加劑具有安全性。近年來，木樨草素作為食品添加劑的使用引起了國(guó)內(nèi)外的廣泛重視。本研究旨在分析木樨草素對(duì)于治療高脂血癥的作用。

NO在體內(nèi)廣泛參與多種生理過程。但在受到外界刺激時(shí)，體內(nèi)多種細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、滑膜細(xì)胞等可異常表達(dá)iNOS，產(chǎn)生比生理量大得多的NO〔2〕，且持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)。本研究發(fā)現(xiàn)高脂血癥模型大鼠血漿NO含量顯著增加，推測(cè)高脂可能刺激細(xì)胞異常表達(dá)iNOS，產(chǎn)生大量NO，從而引起血漿NO含量明顯增高。本研究提示木樨草素可以抑制iNOS活性從而降低血漿NO含量。

NO可與超氧陰離子反應(yīng)，生成一種強(qiáng)氧化劑過氧化亞硝酸(ONOOH)，誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。MDA是脂質(zhì)過氧化的中間產(chǎn)物，常用于反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，由于MDA可交鏈蛋白質(zhì)和磷脂的氨基，使膜性結(jié)構(gòu)的脆性增加，導(dǎo)致生物膜變性，因此可以間接反映細(xì)胞損傷的程度〔3〕。過多脂質(zhì)沉積于血管表皮，使內(nèi)皮產(chǎn)生的抗氧化酶含量下降，機(jī)體清除自由基的能力下降，產(chǎn)生大量自由基及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA〔4〕。本實(shí)驗(yàn)提示木樨草素可以抑制自由基誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。

正常情況下，體內(nèi)存在一套有效的抗氧化防御系統(tǒng)如SOD、GPX等，能及時(shí)清除過量的自由基，從而保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整。某些病理情況下，機(jī)體產(chǎn)生的自由基超過機(jī)體的清除能力，促使疾病進(jìn)一步發(fā)展。T-AOC是用于衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標(biāo)。T-AOC的大小可反映機(jī)體抗氧化系統(tǒng)對(duì)外來刺激的代償能力以及機(jī)體自由基代謝的狀態(tài)〔5〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，高脂干擾了體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)的平衡，使抗氧化能力下降，脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng)。龔志剛等〔6〕的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明：葛根異黃酮(500 mg/kg)可明顯提高糖尿病大鼠血清抗氧化酶活性，降低脂質(zhì)過氧化程度，改善胰島素和血糖水平。Wang等〔7〕的體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，浮萍總黃酮可以明顯提高經(jīng)H2O2氧化損傷后人臍血管內(nèi)皮細(xì)胞的總抗氧化活性以及SOD、CAT和GPX酶活性，降低MDA含量。本研究說明木樨草素可以增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，清除過量的自由基，維持機(jī)體氧化和抗氧化系統(tǒng)的平衡。

綜上，體脂過高時(shí)木樨草素可顯著提高SOD和GPX等抗氧化物酶活性，增加機(jī)體抗氧化能力，降低NO等自由基含量，從而抑制脂質(zhì)過氧化，維持機(jī)體氧化和抗氧化系統(tǒng)的平衡。

4 參考文獻(xiàn)

1祝德秋，劉皋林.木樨草素的藥理作用研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)藥房，2010；21(19):1807-10.

2陳樹君，孫玉敏，孟羽俊，等.慢性氟中毒大鼠睪丸組織總抗氧化能力與一氧化氮合酶和一氧化氮水平的變化〔J〕.環(huán)境與健康，2007；24 (8)：627-9.

3劉 連，徐園園，許 潔，等.氟中毒大鼠血清中NO和MDA及GSH-Px的研究〔J〕.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010；37(6)：1108-9.

4Aviram M.Review of studies on human oxidative damage and anti-oxidant protection related to cardiovascular diseases〔J〕.Free Radic Res,2000;33(1):85-97.

5孫玉敏，陳樹君，楊 揚(yáng)，等.慢性氟中毒大鼠血清總抗氧化能力與一氧化氮水平的變化〔J〕.中國(guó)工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2009；22(6)：445-6.

6龔志剛，朱 篤，張?jiān)氯A.葛根素干預(yù)對(duì)糖尿病運(yùn)動(dòng)大鼠血清抗氧化能力的影響〔J〕.食品科學(xué)，2008；29(9):567-70.

7Wang B，Peng L，Zhu L,etal.Protective effect of total flavonoids from Spirodela polyrrhiza(L.)Schleid on human umbilical vein endothelial cell damage induced by hydrogen peroxide〔J〕.Colloids Surf，2007;60(1):36-9.