南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司，江蘇 南京 210012

HPLC法測定理氣解郁丸中橙皮苷的含量

施明王業(yè)盈

南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司，江蘇 南京 210012

目的研究測定理氣解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法采用高效液相色譜法，以甲醇-0.1%磷酸溶液(45∶55)為流動相；流速為1.0ml/min；檢測波長為283nm。結(jié)果橙皮苷線性范圍為0～1.140μg，平均回收率為100.3%，RSD=2.6%。結(jié)論采用高效液相色譜法測定理氣解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、結(jié)果準(zhǔn)確、操作簡便的優(yōu)點(diǎn)，可以用于理氣解郁丸的質(zhì)量控制。

理氣解郁丸；HPLC；橙皮苷

理氣解郁丸是南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司研制的中藥新藥，由陳皮、木香、半夏、延胡索等十余味中藥組成，具有舒肝理氣，解郁的功能，用于胸肋脹悶，氣郁不舒。陳皮為其君藥，為有效控制藥品質(zhì)量，采用高效液相色譜法測定該藥品中橙皮苷的含量。

1 儀器與試藥

日本島津高效液相色譜儀，LC-10AD泵，SPD-10A型檢測器，電子分析天平(北京賽多利斯天平有限公司)。橙皮苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號0709-9803)。理氣解郁丸(南京同仁堂藥業(yè)有限責(zé)任公司)。缺味陰性對照樣品：按照制劑工藝制備相應(yīng)的缺味處方藥。色譜級甲醇(Fiser)、雙蒸水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件色譜柱 SinoChrom ODS-BP柱(5μm，4.6×250mm)；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液(45:55)；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：283nm。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備取適量橙皮苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品1g，研細(xì)，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加熱提取4小時(shí)。提取液水浴蒸干，殘?jiān)眉状既芙?，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得[1]。

2.2.3 陰性對照品溶液的制備取缺陳皮的樣品，同供試品溶液的制備項(xiàng)下操作。

2.3 干擾試驗(yàn)分別吸取對照品、供試品溶液、陰性對照溶液各5μl，按2.1項(xiàng)下的色譜條件分別進(jìn)樣測定，結(jié)果陰性無干擾[2]。

2.4 線性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷對照品溶液，將其轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分別吸取六個(gè)濃度的橙皮苷對照品溶液5μl，注入高效液相色譜儀測定其峰面積。以峰面積Y對進(jìn)樣量X(μg)進(jìn)行線性回歸，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997(n=6)，其線性范圍為0～1.140μg。

2.5 精密度試驗(yàn)取同一批次的樣品1.0g，精密稱定，按2.2.2項(xiàng)下的方法制備成供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，體積5μml，測定其峰面積[4]。計(jì)算RSD為1.35%，符合要求，表明該方法的精密度較好。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)精密稱取6份同一批號的樣品，按照2.2.2項(xiàng)下的方法制成供試品溶液，進(jìn)樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計(jì)算得RSD為1.28%，符合要求。表明該方法的重現(xiàn)性較好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8h進(jìn)樣，進(jìn)樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計(jì)算得RSD為2.25%，符合要求。表明供試品溶液在8h內(nèi)比較穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)取已知含量的樣品約0.5g，精密稱定，加入一定量的橙皮苷對照品，按2.2.2項(xiàng)下的方法制成供試品溶液，測定其峰面積。計(jì)算得平均回收率為100.3%，RSD為2.6%，均符合要求，說明該方法可以用于橙皮苷的含量測定。具體結(jié)果見表1所示。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=2)

2.9 樣品含量測定取三批理氣解郁丸樣品各1g，精密稱定，按2.2.2項(xiàng)下的方法制備成供試品溶液，測定橙皮苷的含量，結(jié)果見表2所示。

表2 樣品含量測定結(jié)果(n=2)

3 討論

本試驗(yàn)考察了索氏提取、回流提取、超聲提取方法，結(jié)果表明索氏提取時(shí)間過長；回流提取雜質(zhì)多、干擾大；超聲提取檢測周期短、無雜質(zhì)干擾。提取溶劑的選擇，考察了甲醇、乙醇，結(jié)果甲醇提取完全，峰形好。

[1] 趙曉紅，楊瑩，申睿，等．HPLC測定復(fù)方豆蔻合劑中橙皮苷含量[J]．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(11)：61-63.

[2]奚永蘭，徐富柱．高效液相色譜法測定乳寧顆粒中芍藥苷的含量[J]．中國民族民間醫(yī)藥，2012，21(6)：42-43.

[3]雷虹，馮偉紅．HPLC法測定枳術(shù)膠囊中橙皮苷的含量[J]．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2005，11(4)：5-6.

[4] 王亞莉，程龍．杜仲顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]．中國民族民間醫(yī)藥，2011，20(5)：34-35.

ContentdeterminationofhesperidininLiqijieyupillssolutionbyHPLC

Shi Ming Wang Ye-ying

Nanjing Tongrentang Pharmaceutical CO. LTD. Nanjing 210012,China

ObjectiveTo determine the content of Hesperidin in Liqijieyu pills.MethodsA HPLC method was used. The mobile phase consisted of methanol-0.1% phosphate(45∶55).The flow rate was 1 mL/min. The detection wavelength was at 283 nm.ResultsThe linear range of Hesperidin was 0～1.140μg. The average recovery rate was 100.3%(RSD=2.6%).ConclusionThe HPLC method is accurate,simple and suitable for quality studies of the Liqijieyu pills.

Liqijieyu pills；HPLC；Hesperidin

R284.1

A

1007-8517(2014)06-0025-02

2014.01.15)