云南省食品藥品檢驗所，云南 昆明 650011

ICP-MS法測定復(fù)方龍血竭膠囊中5種有害元素的殘留量

郭毅新張元杰來國防

云南省食品藥品檢驗所，云南 昆明 650011

目的建立復(fù)方龍血竭膠囊中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬及有害元素含量的測定方法。方法采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)，樣品經(jīng)微波消解后測定，在線引入內(nèi)標以校正基體效應(yīng)。結(jié)果各元素在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r≥0.9990)；檢測限為0.389 ng·g-1～3.548ng·g-1；加樣回收率為87.5% ～109.4%，RSD(n=9)均小于9.1%。結(jié)論該方法較簡便、快速、準確，可用于復(fù)方龍血竭膠囊中有害元素的測定。

電感耦合等離子體質(zhì)譜法；復(fù)方龍血竭膠囊；重金屬及有害元素；微波消解

復(fù)方龍血竭膠囊是由三七、龍血竭、冰片3味中藥組成的復(fù)方制劑，具有活血化瘀、通竅止痛之功效，臨床試驗表明其緩解心絞痛等癥狀的效果明顯優(yōu)于復(fù)方丹參膠囊，可用于冠心病、穩(wěn)定型心絞痛等心血管疾病的治療[1]。心血管疾病多需要長期用藥的特點，對重金屬及有害元素等影響藥物安全性的關(guān)鍵因素提出了更高的要求。

近年來，主產(chǎn)地土壤砷污染以及對土壤中鎘等有害元素的富集作用使得對重金屬有害元素的測定成為三七及其成方制劑如三七通舒膠囊、三七葛根膠囊等質(zhì)量控制的重要指標[2-5]。因此，在復(fù)方龍血竭膠囊質(zhì)量標準制定及質(zhì)量控制過程中，有害元素的測定有充分的必要性。本實驗運用電感耦合等離子體質(zhì)譜建立了同時測定復(fù)方龍血竭膠囊中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬及有害元素的方法，該方法簡便、快速、準確，可用于復(fù)方龍血竭膠囊的質(zhì)量控制。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Agilent 7700x電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國Agilent)；ETHOS One高效微波消解儀(意大利Mlistone)；TB-215D電子天平(美國 Denver)；UP ulupure超純水制造系統(tǒng)(成都超純)。

1.2 標準溶液 鉛單元素標準溶液GBW08619 (1000μg/ml，中國計量科學(xué)研究院)；鎘單元素標準溶液GBW08612 (1000μg·ml-1，中國計量科學(xué)研究院)；砷單元素標準溶液GBW08611 (1000μg·ml-1，中國計量科學(xué)研究院)；汞單元素標準溶液GBW08617 (1000μg·ml-1，中國計量科學(xué)研究院)；銅單元素標準溶液GBW08615 (1000μg·ml-1，中國計量科學(xué)研究院)；多元素內(nèi)標混合標準溶液5188-6525(美國Agilent)；楊樹葉成分分析標準物質(zhì)GBW07604 (國家標準物質(zhì)研究中心)；

1.3 試劑 A.C.S級硝酸(美國J.T.Baker)；全部實驗用水均為超純水制造系統(tǒng)制備的電阻率大于18.25MΩ·cm的超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 測定條件 正向功率：1.55kW；采樣深度：9.0mm；He碰撞氣流量：4.2L·min-1；載 氣 流 速：0. 90L·min-1；進 樣 速 度：0.1rps；測量點數(shù)/峰：3；重復(fù)次數(shù)：3；各元素采集質(zhì)量數(shù)與采集時間見表1。

表1 各元素采集質(zhì)量數(shù)與時間

2.2 供試品溶液制備 將本品內(nèi)容物適量，研磨混合均勻。取約0.5g，精密稱定，置微波消解罐中，加硝酸10ml，密閉并按表 2所列參數(shù)進行消解。消解完全后，消解液冷卻至60℃以下，取出消解罐，放冷，將消解液轉(zhuǎn)入50ml樣品管中，用少量水洗滌3次，洗滌液合并于樣品管中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 標準品溶液制備 精密量取鉛、鎘、砷、銅元素標準溶液適量2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉛、砷0ng、1ng、5ng、10ng、20ng，含鎘0ng、0.5ng、2.5ng、5ng、10ng，含銅0ng、50ng、100ng、200ng、500ng的系列濃度混合標準溶液。另精密量取汞元素標準溶液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含汞0ng、0.2ng、0.5ng、1ng、2ng、5ng的系列標準溶液(臨用現(xiàn)配)即得。

表2 微波消解儀工作參數(shù)

2.4 內(nèi)標溶液制備 精密量取多元素內(nèi)標混合標準溶液適量，用水稀釋制成每1ml分別含鍺(Ge)、銦(In)、鉍(Bi)1μg的混合溶液，即得。

2.5 方法學(xué)考察

2.5.1 線性關(guān)系 依次將儀器的樣品管插入各個濃度的標準溶液中，按“2.1”項下條件進行測定，以3次測量值的平均值為縱坐標 Y，相應(yīng)濃度(ng·ml-1)為橫坐標 X，繪制標準曲線。5種元素的標準曲線線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均在 0. 9990以上(見表3)

表3 標準曲線及線性范圍

2.5.2 儀器檢出限 以 2%硝酸溶液連續(xù)測定10次，以測定結(jié)果的3倍標準偏差所對應(yīng)的濃度值作為各元素的檢出限。鉛、鎘、砷、汞、銅的檢出限分別為：2.917ng·g-1，0.389ng·g-1，0.516ng·g-1， 0.821ng·g-1，3.548 ng·g-1。

2.5.3 重復(fù)性 取本品內(nèi)容物約 0. 5 g，共6份，分別按供試品溶液的制備方法操作，按“2.1”項下條件進行測定，計算各元素含量。結(jié)果鉛、鎘、砷、汞、銅含量RSD(n=6)分別為6.3%，4.9%，6.2%，5.1%，4.4%。

2.5.4 精密度 取前述重復(fù)性試驗所用樣品約0.5g，按供試品溶液的制備方法操作，按“2.1”項下條件連續(xù)測定6次，計算鉛、鎘、砷、汞、銅6次測定結(jié)果的RSD(n=6)分別為0.9%，1.6%，2.5%，5.3%，3.7%。

2.5.5 加樣回收率 取前述重復(fù)性試驗所用樣品內(nèi)容物共9份，每份約0.5g，精密稱定，置消解罐中，分低、中、高3水平，分別加入各元素的混合標準溶液(含銅10000 ng·g-1，砷500 ng·g-1的，鎘1000 ng·g-1，鉛1000 ng·g-1)和汞100ng·g-1的標準溶液，每水平3份，按供試品溶液制備項下步驟進行消解處理，并按“2.1”項下條件進行測定，計算加樣回收率及RSD。測得5種元素的平均回收率見表4。結(jié)果表明，各元素的回收率均在87.5%～109.4%之間，符合痕量分析要求。

表4 各元素的加樣回收率

2.5.6 質(zhì)控物質(zhì)驗證 取楊樹葉成分分析標準物質(zhì)約0.5g，共3份，按供試品溶液的制備方法操作，按“2.1”項下條件測定，測定值與參考值吻合，結(jié)果見表5。

表5 楊樹葉成分分析標準物質(zhì)測定結(jié)果

2.6 樣品測定結(jié)果 取復(fù)方龍血竭膠囊10批，按前述方法分別測定各元素含量，結(jié)果見表6。

表6 樣品測定結(jié)果(μg·g-1)

a：ND為未檢出

3 討論

相對于原子吸收法(AAS)和原子熒光法(AFS)等傳統(tǒng)方法，ICP-MS具有低檢出限、寬線性范圍、可同時進行多元素測定等特點，已成為重金屬及有害元素測定的首選方法。

研究顯示，鉛、鎘、砷、汞等重金屬聚積可促發(fā)動脈粥樣硬化、冠心病、心律失常、高血壓等心血管疾病[5]。因此，對于需長期服用的心血管疾病藥物，重金屬及有害元素安全性指標的控制須引起充分的重視。參照《中國藥典》2010年版一部對于甘草等中藥材中鉛不得過百萬分之五，鎘不得過千萬分之三，砷不得過百萬分之二，汞不得過千萬分之二，銅不得過百萬分之二十的限度標準，復(fù)方龍血竭膠囊中各元素含量均低于規(guī)定值。一定程度上說明生產(chǎn)過程中的重金屬及有害元素污染得到了較好的控制，且滲漉提取工藝使用的70%乙醇對于三七中有害元素的可能溶出率相對較小。

[1]慶慧，范軍銘，王守富，等. 復(fù)方龍血竭膠囊治療穩(wěn)定型心絞痛隨機對照多中心臨床研究[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志，2009，16(2)：10～12.

[2]閻秀蘭，廖曉勇，于冰冰，等. 藥用植物三七對土壤中砷的累積特征及其健康風(fēng)險[J].環(huán)境科學(xué)，2011，32(3)：880～885.

[3]林龍勇，于冰冰，閻秀蘭，等. 三七對土壤中鎘、鉻、銅、鉛的累積特征及健康風(fēng)險[J/OL].生態(tài)學(xué)報，2014(11). http://www.cnki.net/kcms/detail/10.5846/stxb201307261958.html

[4]劉洋，楊華蓉，林大勝，等. 符合歐盟技術(shù)要求的三七通舒膠囊原料及制劑重金屬測定方法研究[C].2010年中國藥學(xué)大會暨第十屆中國藥師周論文集. 2010.

[5]崔蘊慧，利奕成. ICP-AES法測定三七葛根膠囊中重金屬的含量[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2012，22(11)：2560～2561，2565.

[6]楊菊賢，杜勤. 環(huán)境污染是促發(fā)心血管疾病的重要危險因素[J].心血管病學(xué)進展，2008，29(2)：214～217.

Determinationof5heavymetalsinFufanglongxuejiecapsulesbyICP-MS

GUO Yi-xin，ZHANG Yuan-jie，LAI Guo-fang*

Yunnan Institute for Food and Drug Control，Kunming 650011，China

ObjectiveTo establish a method for determination of Pb，Cd，As，Hg and Cu in Fufanglongxuejie capsules.MethodsThe samples were determined by inductively coupled plasma-mass spectrometry (ICP-MS) after microwave digestion. The internal standard solution was used to eliminate the matrix effect.ResultEach element showed good linearity in certain concentration range(r≥0.9990).The detection limits ranged from 0.389 ng·g-1～3.548ng·g-1. The average recoveries were from 87.5% to 109.4% with RSD no more than 9.1%.ConclusionThe method is simple，efficient and accurate for determination of heavy metals in Fufanglongxuejie capsules.

ICP-MS; Fufanglongxuejie capsules; Heavy metals; Microwave digestion

郭顏新(1955-)，云南食品藥品檢驗所儀器室主任，E-mail:gyxxk@sina.com

R917

A

1007-8517(2014)14-0011-03

2014.05.26)