王延峰, 李南陽, 任雅玲, 薛秀斌, 李林臣, 曹蕾春, 賈儒淵, 于小平

(河北省張家口市第一醫(yī)院, 河北 張家口, 075000)

原發(fā)性肝癌(PHC)為最為常見的惡性腫瘤之一，早期多缺乏典型表現(xiàn)，起病隱匿，且不少患者就診時(shí)已為晚期，失去了手術(shù)治療的最佳時(shí)期，故死亡率較高[1]。另外，因中國屬于多種慢性肝病的高發(fā)地區(qū)，進(jìn)而造成原發(fā)性肝癌發(fā)病率有增高趨勢，其診斷早期主要依賴CT、MRI、超聲等影像學(xué)檢查與甲胎蛋白(AFP)的檢測。AFP是目前肝癌診斷中應(yīng)用最為廣泛的標(biāo)志物，敏感度約40%～65%，特異度約76%～96%，但約1/3肝癌患者AFP檢測可呈陰性結(jié)果[2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，高爾基體糖蛋白(GP73)在肝癌早期診斷中具有一定臨床應(yīng)用價(jià)值[3]。為探討GP73與AFP聯(lián)合檢測對(duì)早期PHC診斷的價(jià)值，本文回顧性分析66例PHC患者的臨床資料，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2010年8月—2013年7月就診的疑為PHC患者99例，以最終診斷為PHC的66例作為觀察組，其中男43例，女23例，年齡37～66歲，平均(50.7±14.4)歲；所有患者均符合中國抗癌協(xié)會(huì)肝癌專業(yè)委員會(huì)于2000年發(fā)布的《原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)》[4], 均經(jīng)病理學(xué)診斷確認(rèn)為肝細(xì)胞癌，并除外其他組織器官惡性腫瘤病史，均未接受放化療治療。隨機(jī)選取同期在本院接受健康體檢的正常人66例作為對(duì)照組，其中男44例，女22例，年齡36～67歲，平均(51.3±14.2)歲，均無系統(tǒng)性疾病病史，且肝功能化驗(yàn)正常。2組人員均除外妊娠哺乳期婦女，且在性別、年齡方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 具可比性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集: 2組人員均使用 惰性分離膠真空采血管采集空腹靜脈血3～5 mL, 于室溫下靜置30 min, 之后于離心機(jī)(半徑為16 cm)以4 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min, 將血清置-20 ℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 血清學(xué)檢測方法: GP73檢測使用美國Thermo公司生產(chǎn)的multriskanMK3酶標(biāo)儀以及熱景生物技術(shù)有限公司提供的試劑采用雙夾心ELISA法進(jìn)行檢測；AFP則使用瑞士羅氏公司生產(chǎn)的Cobas6000全自動(dòng)生化免疫分析儀以及配套試劑盒采進(jìn)行檢測。上述所有設(shè)備的操作均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。其中AFP正常值為<25 ng/mL，GP73測量范圍為0～250 ng/mL, 對(duì)于超過250 ng/mL的樣本，則使用配套的稀釋液稀釋之后重復(fù)檢測。

1.3 觀察項(xiàng)目

對(duì)比2組患者血清AFP及GP73水平，對(duì)比AFP與GP73單獨(dú)應(yīng)用與聯(lián)合應(yīng)用對(duì)PHC的診斷敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 2組患者血清AFP及GP73水平比較

經(jīng)上述檢測，觀察組患者血清AFP及GP73水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者血清AFP及GP73水平比較

2.2 AFP與GP73單獨(dú)應(yīng)用與聯(lián)合應(yīng)用對(duì)PHC的診斷價(jià)值比較

經(jīng)上述檢測，AFP單獨(dú)應(yīng)用對(duì)PHC診斷的敏感度為54.5%, 特異度為69.7%, 準(zhǔn)確度僅為59.6%; GP73增高分別為69.7%、81.8%以及74.7%; 而二者聯(lián)合應(yīng)用則再次增高為87.9%、90.9%以及88.9%。3種方法對(duì)PHC診斷敏感度及準(zhǔn)確度比較差異顯著(P<0.05), 而特異度比較則未見明顯變化(P>0.05)。見表2。

表2 AFP與GP73單獨(dú)應(yīng)用與聯(lián)合應(yīng)用對(duì)PHC的診斷價(jià)值比較

3 討 論

PHC是目前全球范圍內(nèi)最為常見的惡性腫瘤之一，惡性程度極高，進(jìn)展速度較快，預(yù)后較差，死亡率極高。該病是一個(gè)多因素共同作用、多階段發(fā)展的最終結(jié)果，其發(fā)展需經(jīng)歷激發(fā)期、促進(jìn)期及演進(jìn)期3個(gè)階段，若能在較早時(shí)期進(jìn)行正規(guī)的醫(yī)學(xué)干預(yù)，可能有效改變疾病進(jìn)程，改善患者預(yù)后，提高患者生活質(zhì)量[5]。對(duì)該病的高危人群，目前最為常用的檢測手段即為定期檢測血清AFP水平，并結(jié)合腹部超聲、CT等影像學(xué)資料進(jìn)行綜合判斷。但由于早期腫瘤體積較小，影像學(xué)檢查可能較難發(fā)現(xiàn)。AFP雖是目前PHC診斷中應(yīng)用最為廣泛的血清學(xué)標(biāo)志物，但30多年臨床應(yīng)用及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出，其敏感性為40%～65%, 特異性76%～96%，另外有近1/3 PHC患者可表現(xiàn)為AFP陰性[6], 且在急慢性肝炎、肝硬化睪丸癌或卵巢癌等疾病患者中可有AFP水平的增高。因此，僅僅依賴AFP檢測早期診斷PHC尚不夠理想[7], 尋找一種敏感性及特異性均更高的新型血清學(xué)標(biāo)志物成為近年來該病研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)問題。隨著近年來基因技術(shù)、蛋白質(zhì)組分、腫瘤免疫等多方面研究的不斷進(jìn)展，一些新型的肝癌標(biāo)志物脫穎而出。其中GP73被廣泛認(rèn)為在該病早期診斷中最具潛力，且最有可能作為廣泛應(yīng)用的新型PHC早期診斷的血清學(xué)標(biāo)志物。GP73是國外相關(guān)學(xué)者在人巨細(xì)胞性肝炎的研究中發(fā)現(xiàn)的一種跨膜糖蛋白[8]。目前已經(jīng)證實(shí)在穩(wěn)定狀態(tài)下，GP73是高爾基體順面膜囊上的一種整合膜蛋白， 在肝臟組織中主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá)，肝細(xì)胞不表達(dá)或表達(dá)量極其微弱，但在病變肝細(xì)胞中的表達(dá)則明顯增高[9-10]。這種表達(dá)的增高與急性肝損傷的觸發(fā)及慢性肝臟重構(gòu)及纖維化等有關(guān)[11]。為探討AFP與GP73聯(lián)合用于PHC診斷的應(yīng)用價(jià)值，本文對(duì)66例PHC患者進(jìn)行了相關(guān)檢測和對(duì)比分析。結(jié)果顯示，與正常人群比較，PHC患者血清AFP及GP73水平均明顯增高。并通過統(tǒng)計(jì)其診斷的敏感度、特異度及準(zhǔn)確度結(jié)果顯示，單獨(dú)應(yīng)用AFP對(duì)PHC診斷的敏感度及準(zhǔn)確性顯著低于單獨(dú)應(yīng)用GP73，而單獨(dú)應(yīng)用GP73的敏感度及準(zhǔn)確度均顯著低于二者聯(lián)合檢測，但3種方法的特異度比較均無顯著差異。由此可見，若能夠聯(lián)合檢測上述2項(xiàng)指標(biāo)對(duì)PHC進(jìn)行早期診斷，可使診斷的敏感性和準(zhǔn)確性大幅提升[12]。關(guān)于特異度的分析結(jié)果可能與本研究所采用的僅僅為相對(duì)較為特異的指標(biāo)進(jìn)行檢測所致，并未與其他相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比，故其差異并不明顯。

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