★ 趙自明 高華宏 趙靜宇 黃雪君 姚楠 曾曉會 陳玉興

(1.廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院 廣東 廣州 510095；2.廣州中醫(yī)藥大學附屬三亞市中醫(yī)院 海南 三亞 572000)

姜黃素是從姜黃、莪術(shù)、郁金等的根莖中提取的一種多酚類活性成分。具有抗氧化、降血脂、抗炎、抗凝、抑制血管生成、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等多種生物學效應(yīng)[1]，但水溶性差、不穩(wěn)定，易氧化、堿性條件下易降解[2]、體內(nèi)吸收差、生物利用度低、代謝快[3,4],如何制備水溶性好、較為穩(wěn)定、吸收好、生物利用度高、代謝慢的新型姜黃素制劑已經(jīng)成為亟待解決的課題。本文擬通過觀察復(fù)方姜黃素磷脂復(fù)合物分散片新制劑的藥動學特性，以期開發(fā)出高溶出度、高穩(wěn)定性、高生物利用度、代謝緩慢的新型姜黃素新口服制劑。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SPF級新西蘭家兔，1.8～2.5kg，雌雄各半，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(粵)2010-0059，實驗動物質(zhì)量合格證號:4407207041。動物實驗環(huán)境：廣東省中醫(yī)研究所SPF級動物實驗室，設(shè)施使用許可證號SYXK(粵)2010-0059。

1.2 試藥與試劑 復(fù)方姜黃素(姜黃素、胡椒堿)普通片(普通片，批號：201012)和復(fù)方姜黃素(姜黃素、胡椒堿)磷脂物固體分散體分散片(分散片，批號：201012-1)，由廣東省中醫(yī)研究所中藥制劑室提供；姜黃素對照品(批號：110823-200603)，購于中國藥品生物制品檢定所；乙腈(批號：1674607308)，色譜純，德國Merk公司產(chǎn)品，乙酸乙脂(化學純，批號100205)，廣州化學試劑廠產(chǎn)品。

1.3 主要儀器 液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)(ACCELA高效液相系統(tǒng)、TSQ QUANTUM ACCESS MAX質(zhì)譜檢測系統(tǒng))、Hypersil Gold C18色譜柱(50mm×2.1mm，3μm)、電噴霧離子源(ESI源)、Forma-86C ULT Freezer型-86℃冰箱，均為Thermo公司產(chǎn)品；XS205DU型1/10萬電子分析天平，METTLER TOLEDO公司產(chǎn)品；渦旋混合儀，上海青浦滬西儀器廠；5424型小型高速離心機，德國Eppendorf公司；20-200μL移液槍，芬蘭BIOHIT公司；HSC-12A氮吹儀，天津Hengao公司；-20℃冰箱，青島海爾股份有限公司。SIGMA 3K30高速冷凍離心機，SIGMA公司產(chǎn)品。

1.4 藥動學實驗 12只家兔隨機均分為普通片和分散片2組，每組6只家兔，雌雄各半，各組小鼠給藥前禁食12h，自由飲水。兩種劑型按42mg·kg-1(姜黃素3倍臨床等效劑量[5])姜黃素含量灌胃給藥一次，于給后0、5、10、20、30、45、60、90、120、150、180、240、360和480min，分別自2組家兔耳中動脈取血1.0mL(肝素抗凝)，0℃ 3000 r/min離心10min，取上層血漿-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。按文獻[6]血樣的處理與檢測方法，在干擾試驗、線性關(guān)系考察、精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、回收率試驗基礎(chǔ)上，測定血漿樣品中姜黃素濃度(ng/mL)，DAS2.1計算二藥藥動學參數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 各時點兩組家兔血漿姜黃素含量比較 給藥前兩組家兔姜黃素血藥濃度均為0，與普通片比較，分散片藥后10、20、30、60、120、150、180、240和360min家兔血漿姜黃素濃度均有顯著性升高(P<0.01)，藥后480min家兔血漿姜黃素濃度也有顯著性升高(P<0.05)，而藥后5、45和90min家兔血漿姜黃素濃度均有所增加，但差異無顯著性(P>0.05)。

表1 各時點兩組姜黃素血藥濃度比較

注：與普通片相比，*P<0.05，**P<0.01。

圖1 分散片與普通散片中姜黃素家兔血藥濃度藥時變化曲線

2.2 房室模型及藥動學參數(shù)計算方法的選擇 普通片和分散片二種劑型均時效變化趨勢均出現(xiàn)雙峰，普通片血藥濃度峰值分別出現(xiàn)在藥后20和45min，而分散片出現(xiàn)在藥后20和120min，普通片和分散片血藥濃度首峰均遠遠小于次峰；分散片姜黃素藥后5～480min內(nèi)血藥濃度均高于相同給藥時間的普通片，分散片血藥濃度首峰也大于普通片首峰和次峰濃度。由于二制劑均不符合一室、二室和三室模型(擬合效果R2<0.51)，見1和圖2，固以統(tǒng)計矩方法計算二制劑藥動學參數(shù)。

2.3 分散片中姜黃素家兔的藥動學參數(shù) 由表2可知，與普通片相比，分散片中姜黃素血藥濃度藥時曲線下面積(AUC0-480)、達峰時間(tmax)和血藥濃度峰值(Cmax)均有顯著性增加(P<0.05)，表觀分布容積(Vd)、體內(nèi)平均駐留時間(MRT0-480)有顯著性減小或縮短(P<0.01)，體內(nèi)平均駐留時間極值(MRT0-∞)和消除半衰期(t1/2)均有顯著性縮短(P<0.05)，而藥時曲線下面積極值(AUC0-∞)和體內(nèi)總清除率(CL)雖有減少趨勢，但差異無顯著性(P>0.05)。

表2 家兔體內(nèi)姜黃素藥動學參數(shù)

注：與普通片相比，*P<0.05，**P<0.01。

3 討論

姜黃素難溶于水且極不穩(wěn)定的“瓶頸問題”嚴重阻礙著I類新藥的開發(fā)[7]，但隨著制劑技術(shù)的發(fā)展，采用固體分散體、微乳、納米混懸劑等技術(shù)，可提高難溶藥物的溶出、吸收和生物利用度[8]，諸多研究也表明，固體分散體、糊精包合物、脂質(zhì)體、納米粒、微球、微囊等技術(shù)開發(fā)的姜黃素口服新制劑，均能在一定程度上提高姜黃素的溶出，增加穩(wěn)定性、生物利用度和體內(nèi)的吸收[9]。

磷脂復(fù)合物作為藥物載體，通過氫鍵等電荷遷移力作用形成分子絡(luò)合物。有增溶、改變藥物理化性質(zhì)、增加胃腸道吸收、增強脂溶性、細胞膜親和性，促進藥物吸收、降低不良反應(yīng)、延長作用時間和提高藥物有效性等作用[10]；采用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等水溶性載體材料將難溶性藥物制成固休分散體后，由于增加了藥物的分散度，可提高難溶性藥物的溶出速率、溶解度，增加血藥濃度、減慢體內(nèi)消除，從而可以提高口服藥物的吸收和生物利用度[11,12]；磷脂復(fù)合與固體分散技術(shù)合用能顯著提高姜黃素體外溶出度[13]。

由結(jié)果可知，與普通片(未采用磷脂復(fù)合和固體分散技術(shù))相比，同等劑量姜黃素的分散片灌胃給藥一次，大鼠血中姜黃素AUC0-480、Cmax顯著性增加，而Vd和t1/2顯著減小；盡管分散片tmax顯著長于普通片，但藥后5～480min內(nèi)分散片姜黃素血藥濃度均高于同一時間普通片，提示磷脂復(fù)合與PVPk30固體分散技術(shù)合用所制備的復(fù)方姜黃素固體分散片，可通過促進藥物崩解、自腸道的吸收速度和吸收總量，以及減慢消除速度、抑制體內(nèi)分布，從而增加姜黃素480min內(nèi)生物利用度。由于姜黃素毒性極低，姜黃素血藥濃度崜值的增加和高濃度持續(xù)時間的延長，姜黃素同等劑量的分散片的最大藥理效應(yīng)和藥理效應(yīng)持續(xù)時間均明顯增加和延長。

綜上所述，姜黃素與胡椒堿合用，采用磷脂復(fù)合和固體分散技術(shù)所制備的姜黃素分散片，可大大提高姜黃素的生物利用度，提高藥物效應(yīng)并延長效應(yīng)持續(xù)時間，是一種較普通片更好的新型制劑。

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