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(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029;2.北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，北京 100029)

音樂電針對(duì)SAMP8模型小鼠血清MDA含量、SOD活力及行為學(xué)的影響

陳軒霆1,王詩惠1,周源1,姚海江1,姜靜1,時(shí)素華2*

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029;2.北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，北京 100029)

目的 探討音樂電針對(duì)SAMP8 小鼠血清中SOD活力、MDA含量及其行為學(xué)的影響。方法 將8月齡雄性SAMP8 小鼠18只隨機(jī)分為3組，即:模型組(N)、音樂電針組(M)、藥物組(D)；同月齡雄性SAMR1小鼠6只作為空白組(C)。模型組和空白組不予以治療；音樂電針組配相關(guān)穴位進(jìn)行針刺治療；藥物組予鹽酸多奈哌齊(0.92 mg/g)灌胃。治療15 d后用Morris水迷宮檢測(cè)各組小鼠學(xué)習(xí)記憶能力；測(cè)定血清中SOD活力和MDA含量。結(jié)果 治療結(jié)束后，模型組的逃避潛伏期時(shí)間大于空白組(P<0.01)；藥物組的逃避潛伏期變化不明顯；音樂電針組的逃避潛伏期時(shí)間明顯小于模型組(P<0.05)。模型組較空白組血清MDA含量升高,SOD活力降低(P<0.01);音樂電針組和藥物組較模型組SOD活力升高，MDA含量降低(P<0.01)。結(jié)論 音樂電針可能通過降低SAMP8小鼠血清中MDA含量，提升SOD活力，改善SAMP8小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能，具有一定抗老年性癡呆的功能。

SAMP8小鼠；阿爾茨海默??；音樂電針；抗氧化

老年性癡呆, 亦稱阿爾茨海默病(AD)，是一種好發(fā)于老年群體，以進(jìn)行性認(rèn)知功能損害、記憶能力降低的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退變性疾病。AD的病因機(jī)制較為復(fù)雜，發(fā)病率高，以及缺乏較好的預(yù)防治療手段，給社會(huì)帶來嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)。為此,本實(shí)驗(yàn)以SAMP8快速老化小鼠作為模型，選取音樂電針作為治療手法，在觀察行為學(xué)指標(biāo)的同時(shí)測(cè)定小鼠大腦血清MDA含量和SOD活力變化，為音樂電針治療老年性癡呆提供一定的科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康8月齡,雄性,體質(zhì)量(30±2) g，清潔級(jí)SAMP8、SAMR1小鼠，均由天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證編號(hào)：SCXK(津)2008-0001。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，溫度為(23±1) ℃，12 h光照，濕度45%，自由進(jìn)食，單籠飼養(yǎng)，排除飲食及環(huán)境等所有可能對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生的影響。

1.2 儀器與藥品 韓氏穴位神經(jīng)刺激儀，HANS-202型(南京濟(jì)生醫(yī)療科技有限公司);ZJ-12H音樂電針治療儀(中國(guó)針灸學(xué)會(huì)研制，哈爾濱致厚醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn));Morris水迷宮(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)；SOD、MDA試劑盒由南京建成生物工程研究所提供；鹽酸多奈哌齊片[衛(wèi)材(中國(guó))藥業(yè)有限公司制造，批號(hào):H20050978]。

1.3 分組 隨機(jī)選取18只SAMP8小鼠分為模型組、音樂電針組、藥物組,以及同背景、同月齡6只SAMR1小鼠作為空白組。

1.4 治療方法 音樂電針組:以1寸毫針點(diǎn)刺小鼠水溝穴，向下平刺百會(huì)穴、向上平刺印堂穴(穴位選取參考實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位圖譜)。進(jìn)針深度為3～5 mm，百會(huì)穴、印堂穴針柄接音樂電針治療儀，頻率為2 Hz，電流強(qiáng)度為1 mA，以此同時(shí)選取節(jié)奏明朗、速度與力度適中的音樂處方：《碧海揚(yáng)帆》，調(diào)節(jié)強(qiáng)度以使動(dòng)物不掙扎嘶叫保持安靜為度，留針20 min。藥物組：將由用雙蒸水和鹽酸多奈哌齊配制成1 mg/mL的濃度，0.92 mg/kg的劑量灌胃給藥。模型組、空白組：只做和音樂電針組治療過程的相同束縛。以上4組進(jìn)行同步實(shí)驗(yàn)，1次/d，連續(xù)15 d。

1.5 行為學(xué)檢測(cè) 各組動(dòng)物在治療結(jié)束后，采用Morris水迷宮測(cè)試小鼠定位航行及空間搜索之學(xué)習(xí)記憶能力，同時(shí)記錄各組動(dòng)物到達(dá)站臺(tái)的逃避潛伏期游泳時(shí)間，檢測(cè)行為學(xué)指標(biāo)。

1.6 生物指標(biāo)檢驗(yàn)與方法 待行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，摘除小鼠眼球取血，將所得血液迅速放入1 mL的離心管中。低溫離心15 min(4 ℃，2～4 h,3 000 r/min)，將離心所得上清液迅速移入離心管，移入低溫冰箱(-20 ℃)，等待檢測(cè)。用SOD、MDA試劑盒檢測(cè)其活力與含量，測(cè)定時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 音樂電針組與其他組對(duì)小鼠血清MDA含量、SOD活力變化影響 見表1。

表1 各組小鼠血清MDA含量、SOD活力比較

注：與空白組比較，##P<0.01；與模型組比較，△△P<0.01；與藥物組比較，▲P<0.05

2.2 音樂電針組與其他組小鼠隱蔽平臺(tái)實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期比較 見表2。

表2 音樂電針組與其他組小鼠隱蔽平臺(tái)實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期比較±s,n=6)

注：與空白組比較，##P<0.01；與模型組比較，△P<0.05

3 討論

百會(huì)、水溝、印堂穴，均位于任督二脈上，為臨床針灸治療老年性癡呆的常用穴位。研究[1]表明，針灸治療百會(huì)等相關(guān)穴位，通過提高小鼠大腦內(nèi)的乙酰膽堿含量，從而達(dá)到改善老年癡呆模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，音樂電針針刺百會(huì)、印堂、水溝，使SAMP8小鼠的逃避潛伏時(shí)間明顯減少,表明了音樂電針對(duì)老年癡呆有一定的治療作用[2-6]。楊俊生等[7]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,音樂電針配合藥物效果優(yōu)于單純藥物效果,說明音樂電針與藥物的配合可以顯著提高臨床療效果。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,模型組小鼠與空白組比較，Morris水迷宮測(cè)試學(xué)習(xí)記憶能力下降，藥物組與模型組相比較，潛伏期變化不明顯，可能是該批老鼠耐藥性強(qiáng)，從而藥物治療對(duì)其行為影響較小；音樂電針組與模型組相比較，學(xué)習(xí)記憶能力提高，提示長(zhǎng)期音樂針刺，可以改善小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。音樂電針組血清中MDA含量減少、SOD活力升高，提示音樂電針可能通過降低SAMP8小鼠血清中MDA含量，提升SOD活力，從而改善SAMP8小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能，具有一定抗老年性癡呆的功能，其具體機(jī)制尚需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

[1]張衛(wèi),劉來虎,殷克敬.針灸對(duì)老年癡呆模型小鼠防治作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī),2001,22(10):633-634.

[2]Smith M A,Rottkamp C A,Nunomura A,et al.Oxidative stress in Alzheimer’s disease[J].Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease,2000,1502(1):139-144.

[3]孫上明,余曙光,曾道冰,等.電針涌泉穴對(duì)老年大鼠自由基代謝影響的研究[J].中國(guó)自然醫(yī)學(xué)雜志,2002,4(2):80-82.

[4]王少錦,李愛英.針刺對(duì)擬癡呆大鼠腦內(nèi)自由基系統(tǒng)酶活性的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2004,24(1):47-49.

[5]李東紅,段燦燦,郝石磊,等.針刺合谷、太沖對(duì)老年癡呆模型大鼠行為學(xué)及氧自由基的影響[J].北京中醫(yī)藥,2010,29(4):311-313.

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[7]楊俊生,衣蕾,蔣宏偉.音樂電針療法對(duì)腦出血大鼠血腫周圍腦組織SODI活力及形態(tài)學(xué)的影響[J].陜西中醫(yī),2011,32(2):238-240.

Musicalelectro-acupuncturetherapyontheSODvigour,MDAcontentandtheirbehaviorsintheserumofSAMP8mice

CHEN Xuanting1,WANG Shihui1,ZHOU Yuan1,YAO Haijiang1,JIANG Jing1,SHI Suhua2*

(1.Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;2.The third affiliated hospital of Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China)

ObjectiveTo discuss the effect of musical electro-acupuncture therapy on the super oxide dismutase activity,malondialdehyde content,and their behaviors in the serum of SAMP8 mice.Methods18 8-month-old male mices were randomly divided into three groups,model group(N),musical electro-acupuncture group(M),drug group(D)and 6 SMR1 mices with the same age as blank group(C).The mice in model group and blank group will not be treated,the mice in musical electro-acupuncture group will be treated with acupuncture in related acupuncture acupoints;the mice in drug group with donepezil hydrochloride gavarage.(0.92 milligrams per kilogram).After the treatment for 15 days,Morris water maze was used to test the learning and memory ability of mice and to detect the super oxide dismutase activity and malondialdehyde content in the serum.ResultsAfter the treatment,the escape latency of the mice in model group is longer than that blank group(P<0.01);the change of escape latency of the mice in drug group is not quite obvious;while the escape latency in musical elctro-acupuncture group is clearly shorter than that model group (P<0.05).In model group,the malondialdehyde content is higher than that blank group,but the super oxide dismutase activity decreases(P<0.01);in musical electro-acupuncture group and drug group,super oxide dismutase activity increases,while the malondialdehyde content decreases(P<0.01).ConclusionMusical electro-acupuncture therapy may improve the learning and memory ability through decreasing the malondialdehyde content and increasing super oxide dismutase activity in the serum,hence could prevent and cure senile dementia.

SMAP8 mice;alzheimer disease;musical electro-acupuncture;anti-senile dementia

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.04.007

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81273825);教育部大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(201210026020)。

陳軒霆(1991-)，男，大學(xué)本科。研究方向：針灸推拿學(xué)。

] 時(shí)素華，女，博士，主治醫(yī)師，電話:1381137923，電子信箱：mollyflower@163.com。

R285.5

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：2095-6258(2014)04-0582-03

2014-04-12)

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