張鳳梅，孫捍衛(wèi)，韓 磊，張洪財(cái)

(1.武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院，天津300162;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，哈爾濱150040)

白鮮皮系蕓香科白鮮屬植物白鮮(Dictamnus dasycarpus Turcz.)的干燥根皮.白鮮皮味苦，性寒;歸脾、胃、膀胱經(jīng).具有清熱解毒，祛風(fēng)燥濕功效.主治濕熱瘡毒，黃水淋漓，濕疹，風(fēng)疹，疥癬瘡癩等病癥[1].白鮮皮具有抗菌、抗腫瘤、抗炎與抗變態(tài)反應(yīng)、抗?jié)?、抗冠狀?dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)肝臟和神經(jīng)等藥理作用[2－3].本文對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行研究，為闡明藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學(xué)依據(jù).本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用硅膠柱色譜、ODS柱色譜、高效液相色譜等方法，從中共分離鑒定出5個(gè)化合物.

1 儀器與材料

Bruker—400型超導(dǎo)核磁共振光譜儀(美國(guó)Bruker公司)，Agilent 1100制備型HPLC(美國(guó)Agilent公司，)，C18制備型色譜柱(ZORBAX SB －C18，9.4 mm ×25 cm，5 μm);柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠，80～120、200～300目);薄層色譜用硅膠板(Silica ge l60 F254)和 TLC Silica gel60 Rp－18 F254s(Rp－18)為德國(guó)Merck公司產(chǎn)品;柱色譜用反相ODS(ODS－AM)為日本YMC公司產(chǎn)品;化學(xué)試劑為分析純(天津市第一化工有限公司生產(chǎn)).

白鮮皮于2011年10月采自河北，經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定學(xué)教研室鑒定為蕓香科白鮮屬植物白鮮(Dictamnus dasycarpus Turcz.)的干燥根皮，標(biāo)本(20101015)保存于武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院植物標(biāo)本室.

2 提取分離

白鮮皮14 kg，用95%的乙醇回流提取3次，每次2 h，每次乙醇用量8 L，過(guò)濾，減壓回收溶劑，得稠浸膏180 g.將浸膏混懸于12L水中，分別用等體積的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水飽和 正丁醇梯度萃取，每種溶劑萃取3次，減壓濃縮，得到石油醚萃取物55 g，氯仿萃取物64 g，乙酸乙酯萃取物67g，正丁醇萃取物50 g.乙酸乙酯萃取物經(jīng)反復(fù)正相硅膠柱色譜、ODS、制備HPLC得到化合物1(32 mg)、2(26 mg)、3(43 mg)、4(21 mg)、5(36 mg).

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:黃白色粉末，易溶于甲醇等有機(jī)溶劑.HR－ESI－MS m/z:355.30941[M+H]+，分子式C16H19O9，不飽和度為 8.1H － NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.03(1H，d，J=1.9，H –2')6.93(1H，dd，J=8.3，1.9 ，H –6')、6.76(1H，d，J=8.3，H –5');2 個(gè)烯氫信號(hào)分別為 δ7.53(1H，d，J=15.5)6.24(1H，d，J=15.5).13C －NMR(100 MHz，CD3OD)δ:127.7(C －1)、115.0(C －2)、147.2(C －3)、149.5(C －4)、116.3(C －5)、123.1(C －6)、144.8(C －7)、115.3(C －8)、168.5(C －9).綜合以上分析結(jié)果與文獻(xiàn)[4]對(duì)比，鑒定化合物為綠原酸(caffeotannic acid)(化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1)

圖1 化合物結(jié)構(gòu)式1－5

化合物2:無(wú)色針狀結(jié)晶，易溶于甲醇、乙醇、丙酮.Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性.經(jīng)酸水解后，通過(guò)薄層層析色譜檢識(shí)證明含有葡萄糖.HR－ESI－MSm/z345.3129[M+H]+，分子式 C17H25O9，不飽和度為6.1H － NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6.74(2H，s)，3.84(6H，s)，δ4.21(2H，dd，J=5.5，1.3 Hz)，4.83(1H，d，J=7.5Hz).13C － NMR(100 MHz，CD3OD)δ:135.2(C － 1)、154.4(C － 2)、105.4(C －3)、130.0(C －4)、129.4(C －7)、128.3(C －8)、63.5(C －9)、105.4(C －1＇).綜合解析與文獻(xiàn)[5]進(jìn)行比較，證明兩者基本一致.鑒定化合物為紫丁香苷(syringoside)(化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1)

化合物3:為無(wú)色針狀結(jié)晶，易溶于乙醇.三氯化鐵反應(yīng)呈陽(yáng)性，示有酚羥基存在.HR－ESI－MS m/z183.2169[M+H]+，分子式為 C10H14O3，不飽和度為 4.1H － NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6.63(1H，d，J=8.1，H －5)，6.54(1H，d，J=1.5，H－2)，6.51(1H，dd，J=8.1Hz，1.5，H －6)，3.71(3H，s)，3.56(2H，m，H－9)，2.61(2H，m，H －7)，1.63(2H，m，H －8).13C － NMR(100 MHz，CD3OD)δ:148.6(C －3)、145.3(C －4)、133.7(C－1)、122.5(C －6)、115.6(C －5)、113.2(C －2)、δ62.3(C － 9)、44.2(C － 8)、36.5(C － 7)、56.1(CH3O－).將化合物與已知化合物[6]進(jìn)行對(duì)照，兩者基本一致.綜合以上分析，鑒定化合物雙氫松柏醇(Dihydroc－oniferyl alcohol).(化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1)

化合物4:白色針狀結(jié)晶，mp:81～83℃，易溶于甲醇.1H－NMR(400 MHz，CDCl3)δ(ppm):9.80(1H，s，－ CHO)，7.02(1H，d，J=8.3，H－6)，7.39(2H，t，J=2.1，H －2，H －5)，3.94(3H，s，－ OCH3)，13C － NMR(100MHz，CDCl3)δ(ppm):189.7(－ CHO)，149.9(C － 3)，145.1(C －4)，128.0(C －1)，125.4(C －6)，112.5(C －5)，106.8(C －2)，56.1(OCH3－).經(jīng)文獻(xiàn)[7]綜合解析，鑒定該化合物為4－羥基－3－甲氧基苯甲醛(4－h(huán)ydroxy－3－methoxy benzene formaldehyde).(化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1)

化合物5:白色粉末，mp:153－154℃.易溶于氯仿，EI－MS m/z:420.6922[M －H]－，分子式為 C29H48O.1H －NMR(400 MHz，CDCl3)δ:3.50(1H，m，H －3)，5.33(1H，d，J=5.2 Hz，H －6)，5.13(1H，dd，J=15.1，8.5 Hz，H －22)，4.99(1H，dd，J=15.1，8.5 Hz，H －23).13C－ NMR(100 MHz，CDCl3):36.2(C －1)，30.9(C －2)，71.0(C － 3)，41.2(C －4)，139.8(C －5)，120.8(C － 6)，30.7(C －7)，31.0(C －8)，49.3(C －9)，35.4(C －10)，20.1(C－11)，38.9(C －12)，40.3(C －13)，55.7(C－14)，23.4(C －15)，27.9(C －16)，55.0(C－17)，11.2(C －18)，18.3(C －19)，39.5(C－20)，20.2(CH3－21)，137.4(C －22)，128.1(C －23)，50.1(C －24)，31.0(C －25)，18.3(CH3－26)，19.1(CH3－27)，24.6(C －28)，11.0(CH3－29).以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8－9]報(bào)道的基本一致，故化合物鑒定為豆甾醇.(化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1)

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