潘禮斌 戈 力

（安徽省蕪湖市三山區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，安徽蕪湖 241080）

減蛋綜合癥又稱產(chǎn)蛋下降綜合癥，是由腺病毒引起，以產(chǎn)蛋高峰期產(chǎn)蛋量下降，產(chǎn)畸形蛋、軟殼蛋和無殼蛋為特征，臨診癥狀明顯。1992年證實(shí)我國有該病的存在，給廣大養(yǎng)殖戶及養(yǎng)殖企業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，我國將其列為B類動(dòng)物疫病，危害性非常嚴(yán)重。

1 病原體

引起本病的病原體是雞減蛋綜合癥（EDS-76）病毒，為一種腺病毒，對雞、火雞及鴨的紅細(xì)胞有凝集性。病毒存在于鴨體內(nèi)及病雞的輸卵管、咽喉、糞便和蛋內(nèi)，它不能使鴨、鵝發(fā)病，病毒對外界抵抗力較強(qiáng)。

EDS-76病毒粒子大小為76～80 nm，呈20面體對稱，是無囊膜的雙股DNA病毒，衣殼的結(jié)構(gòu)，殼粒的數(shù)目等均具有典型腺病毒的特征，對乙醚不敏感，pH耐受范圍廣，如pH3～10的處理很穩(wěn)定，60℃30 min喪失致病性，70℃20 min完全滅活，室溫條件下，至少可存活6個(gè)月以上；0.1%甲醛48 h，0.3%甲醛24 h可使病毒滅活。

2 流行病學(xué)

2.1 易感動(dòng)物

各種年齡的雞對EDS-76病毒都易感。鴨、鵝是自然宿主。有報(bào)道珍珠雞可被自然感染，并可產(chǎn)生軟殼蛋，未見烏骨雞、火雞、雉雞在自然條件下被感染。從某些野禽（白鷺、鯡魚鷗、貓頭鷹等）的血清血檢出了EDS-76病毒抗體。產(chǎn)褐色殼蛋的肉用雞的種母雞最易感，產(chǎn)白色殼蛋的母雞患病率低。在產(chǎn)蛋高峰期和接近產(chǎn)蛋高峰期發(fā)病高潮，其自然宿主是鴨或野鴨。

2.2 傳播途徑

（1）垂直傳播：病毒可經(jīng)種蛋垂直傳染給下一代雛雞，可在體內(nèi)長期潛伏，一直到產(chǎn)蛋高峰期才發(fā)病。（2）水平傳播：污染的飼料、飲水，經(jīng)消化道感染健康雞，傳播緩慢。（3）疫苗傳播：有些弱毒疫苗是由非特異性病原的雞胚制作的，其中含有EDS-76，注射或飲水且易于傳播本病，雞鴨混養(yǎng)。（4）器具傳播：注射針頭也可以傳播此病。

3 實(shí)驗(yàn)室檢查

3.1 病料采集

采取病雞的輸卵管、泄殖腔、鼻黏膜、變性卵泡、無殼軟蛋等作為被檢材料，把組織磨碎制成乳劑，凍融3次，離心，取上清液，加入青霉素、鏈霉素各1 000 IU（μg）／ml，于4℃作用2 h，對其他病料作無菌處理后，供病毒分離和攻毒用。

3.2 病原的分離培養(yǎng)

（1）雞胚接種：取處理過的病料接種9～12日齡鴨胚的尿囊腔，38℃繼續(xù)孵育，棄去24 h內(nèi)死胚，收獲48～96 h存活的鴨胚尿囊液，將收獲的鴨胚尿囊液繼續(xù)接種10～12日齡鴨胚尿囊腔進(jìn)行傳代培養(yǎng)，每代鴨胚尿囊液都用雞紅細(xì)胞做血凝試驗(yàn)，檢測尿囊液中的血凝素，即使對陰性尿囊液也應(yīng)至少傳2～3代。

（2）細(xì)胞培養(yǎng)：將病料接種于已長成單層的鴨胚成纖維細(xì)胞，37℃繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)日，觀察致細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）和核內(nèi)包涵體，然后收獲，反復(fù)凍融，做血清凝集試驗(yàn)，如無CPE，則應(yīng)至少盲傳2～3代，觀察結(jié)果。

3.3 病毒的鑒定

（1）人工感染試驗(yàn)：用分離毒株接種無EDS-76抗體的產(chǎn)蛋雞，可觀察到與自然病例相同的癥狀及產(chǎn)蛋異常變化。

（2）血凝抑制試驗(yàn)：用已知EDS-76陽性血清與收獲的HA陽性尿囊液做血凝抑制試驗(yàn)，檢測病原體。

此外，免疫熒光試驗(yàn)和病毒中和試驗(yàn)也可用于病毒的鑒定。

3.4 血清學(xué)檢查

3.4.1 血凝（HA）試驗(yàn)和血凝抑制（HI）試驗(yàn)

（1）HA試驗(yàn)：一般采用微量法，在微量凝集反應(yīng)板上，從第2孔至11孔，用微量移液器每孔加生理鹽水0.05 ml，第1、2孔分別加10倍稀釋的病毒0.05 ml，從第2孔起，依次作倍數(shù)稀釋，至第10孔，最后棄0.05 ml。每孔加入1%雞紅細(xì)胞懸液0.05 ml，設(shè)不加病毒的紅細(xì)胞對照孔，立即在微量振蕩器上搖勻，置室溫（18℃～25℃）30 min左右觀察結(jié)果，以使紅細(xì)胞發(fā)生100%凝集的最高稀釋度作為血凝價(jià)。

（2）HI試驗(yàn)：常采用微量法，血清直接在抗原中作倍數(shù)稀釋。操作時(shí)先取4 IU抗原依次加入2～11孔，最后孔（12孔）加生理鹽水或PBS。第1孔加8 IU的抗原，然后吸取待檢血清0.05 ml最后孔中（血清對照），混合后吸0.05 ml于第1孔，依次倍比稀釋至11孔，棄去0.05 ml，置室溫（18℃～25℃）下作用10 min，再每孔加入1%雞紅細(xì)胞懸液0.05 ml，振蕩混合靜置30 min，判定結(jié)果。以完全抑制凝集的血清最大稀釋度為該血清的HI滴度，每次測定應(yīng)設(shè)已知滴度的標(biāo)準(zhǔn)陽性血清對照和4 IU病毒對照，待檢血清的抑制價(jià)在8倍以上為陽性。

3.4.2 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)

抗原的制備可將種毒經(jīng)尿囊腔接種13～14日齡鴨胚，接種后96 h收集鴨胚尿液，經(jīng)3 000 r/min離心30 min，取上清，加入甲醛使終濃度為0.2%，置37 ℃溫箱中作用48 h后，經(jīng)40 000 r/min離心2 h，棄上清，沉淀物按原液量的1／20加入滅菌生理鹽水，用注射器充分吹打溶解，再經(jīng)3 000 r/min離心20 min，取上清，將沉淀物再加少量滅菌生理鹽水充分吹打離心，將每次離心的上清液混合在一起，用滅菌生理鹽水補(bǔ)充到尿液的1/10量，作為瓊擴(kuò)抗原。瓊脂板的制備，是在100 ml pH 5.6～6.4的PBS中加入氯化鈉8 g、瓊脂糖1 g、10%的硫柳汞0.1 ml，充分煮沸后，每個(gè)平皿注入18 ml，待瓊脂自然凝固后，置普通冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｔ囼?yàn)時(shí)打孔經(jīng)4 mm、孔間距3 mm的7孔梅花孔，中心孔加抗原，周圍孔加待檢血清、陰性血清和陽性血清，置溫箱中，保持一定濕度，經(jīng)24～48 h觀察結(jié)果，抗原與待檢血清間出現(xiàn)特異性沉淀線者，判為陽性。

3.4.3 其他血清學(xué)診斷方法

病毒中和試驗(yàn)也是比較敏感、特異的方法。EDS-76病毒能致CPE，并產(chǎn)生核內(nèi)包涵體，這種作用可被特異性抗血清所中和，因此，本法也用于檢驗(yàn)EDS-76病毒抗原或血清抗體。免疫熒光試驗(yàn)與HI試驗(yàn)一樣敏感，操作方法同I型腺病毒的熒光診斷法。

4 病理變化

4.1 病理解剖學(xué)

病變不明顯，產(chǎn)無殼蛋和異常蛋雞有時(shí)可見輸卵管、子宮粘膜肥厚，卵巢靜止、不發(fā)育和輸卵管萎縮，少數(shù)可見子宮水腫，腔內(nèi)有白色滲出物或干酪樣物，卵泡變性和出血現(xiàn)象，人工感染時(shí)可見脾充血、腫大，偶見子宮內(nèi)有薄膜包裹的卵黃和少量水樣蛋清。

4.2 病理組織學(xué)

輸卵管和子宮黏膜明顯水腫，腺體萎縮，并有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和異嗜白細(xì)胞浸潤，在血管周圍形成管套現(xiàn)象，上皮細(xì)胞變性壞死，在上皮細(xì)胞中可見嗜伊紅的核內(nèi)包涵體，子宮腔內(nèi)滲出物中混有大量變性壞死的上皮細(xì)胞和異嗜性白細(xì)胞。少數(shù)病例可見卵巢間質(zhì)中有淋巴細(xì)胞浸潤，淋巴濾泡數(shù)量增多，體積增大，脾臟紅、白髓不同程度增生。

5 臨床癥狀

初產(chǎn)雞群產(chǎn)蛋率上升到50%以后即開始出現(xiàn)癥狀，大多數(shù)發(fā)生在26～32周齡（此時(shí)正值產(chǎn)蛋高峰期），病雞食欲、精神、糞便均正常，但輸卵管中蛋殼分泌腺受病毒破壞，卵泡發(fā)育、排卵受影響，出現(xiàn)產(chǎn)蛋減少和蛋殼變劣，蛋的破損率高。開始發(fā)病時(shí)出現(xiàn)殼色變白，產(chǎn)蛋量減少，逐漸下降20%～40%，同時(shí)出現(xiàn)大量薄殼、軟殼、無殼和畸形蛋。蛋殼表面粗糙呈砂紙樣，正常蛋僅占70%左右，有些雞還將所產(chǎn)的蛋吃掉，病程一般持續(xù)4～6周，隨后逐漸恢復(fù)，約10周恢復(fù)正常，患病雞的雞蛋不宜作種蛋孵化。

EDS-76最初癥狀是有色蛋殼的色澤消失，緊接著產(chǎn)生薄殼、軟殼或無殼蛋，薄殼蛋的殼質(zhì)經(jīng)常粗糙。病雞群生產(chǎn)的外觀正常的蛋受精率和孵化率均呈現(xiàn)顯著異常，種雞群發(fā)生EDS-76時(shí)，種蛋的孵化率降低，同時(shí)出現(xiàn)弱雛。發(fā)病雞群的產(chǎn)蛋量突然下降，產(chǎn)蛋量下降通常發(fā)生于產(chǎn)蛋高峰期前后，產(chǎn)蛋量下降可達(dá)20%～50%，持續(xù)期為4～10周左右，產(chǎn)蛋量的恢復(fù)十分緩慢。有的早期感染EDS-76的雞群出現(xiàn)產(chǎn)蛋期推遲，產(chǎn)蛋率上升緩慢，且達(dá)不到產(chǎn)蛋高峰應(yīng)有的產(chǎn)蛋量。褪色的薄殼蛋、脆殼蛋往往出現(xiàn)在產(chǎn)蛋減少前24～48 h，借此特征癥狀區(qū)別于其他病因引起的產(chǎn)蛋減少癥。

6 診斷

根據(jù)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查和病理變化綜合診斷。另外，要做好與以下疾病的鑒別診斷。

傳染性支氣管炎：引起產(chǎn)蛋下降的同時(shí)有呼吸道癥狀，產(chǎn)畸形小蛋，而減蛋綜合癥產(chǎn)薄殼蛋、軟殼蛋和無殼蛋，易于區(qū)別。

非典型新城疫：在產(chǎn)蛋減少的同時(shí)，出現(xiàn)消化道癥狀，如下痢、全群采食減少，有個(gè)別死亡現(xiàn)象，剖檢死雞，消化道出血，產(chǎn)出的蛋蒼白，而無軟殼和無殼蛋。

維生素和礦物質(zhì)缺乏：產(chǎn)蛋減少和蛋殼變劣為逐漸發(fā)生，改善飼料5～7 d后即可恢復(fù)正常，而減蛋綜合癥則持續(xù)4～6周。

傳染性腦脊髓炎、雞敗血支原體病及包涵體性肝炎等也可引起產(chǎn)蛋下降綜合癥，在臨床實(shí)踐中應(yīng)予以注意。

7 防治

本病無特異性治療方法，只能對癥治療，可適當(dāng)添加微量元素和維生素，可促進(jìn)其產(chǎn)蛋恢復(fù)。預(yù)防接種是防制本病的根本措施，可用減蛋綜合癥油乳劑苗在120日齡與傳染性支氣管炎苗、新城疫苗同時(shí)注射免疫，如為種雞，為確保其免疫效果：可在70日齡先免疫1次減蛋綜合癥油乳劑苗，再在120日齡免疫1次。在進(jìn)行其他弱毒苗免疫時(shí)，應(yīng)選用無其他特殊病原（SPF），尤其是不含減蛋綜合癥病毒的疫苗，飼養(yǎng)管理上應(yīng)注意雞、鴨、鵝不能混養(yǎng)，搞好平時(shí)的衛(wèi)生消毒工作。

7.1 衛(wèi)生管理措施

對該病尚無特效藥物治療，所以，應(yīng)加強(qiáng)衛(wèi)生管理措施。

（1）由于EDS-76是垂直傳播，因此，因注意不能使用來自感染雞群的種蛋。

（2）病毒能在糞便中存活，具有抵抗力，因此，要有科學(xué)有效的衛(wèi)生管理措施，嚴(yán)格控制外人及野鳥進(jìn)入雞舍，預(yù)防傳播。

（3）要采取“全進(jìn)全出”的飼養(yǎng)方式，對空雞舍全面清潔及消毒后，空置一段時(shí)間方可進(jìn)雞。對種雞采取雞群凈化措施，即將40周齡以上的雞所產(chǎn)蛋孵化成雛后，分成若干小組，隔離飼養(yǎng)，每隔6周用HI試驗(yàn)測定抗體，一般測定10%～25%的雞，淘汰陽性雞，直到40周齡時(shí)，100%陰性小雞繼續(xù)養(yǎng)殖。

7.2 防治方案

（1）緊急注射減蛋綜合癥乳苗。

（2）克毒金剛早晚飲水，連用3～5 d，瘟必嘉+卵管嘉飲水，連用3～5 d，而百疫散同時(shí)拌料效果更好，病情得到控制后，用產(chǎn)蛋多精+維生E+嘉利補(bǔ)快速恢復(fù)產(chǎn)蛋率。