楊秀蓮+李春意+王良桂

摘要：研究不同濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理下波葉金桂插穗的生根性狀及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、內(nèi)源激素含量變化。結(jié)果表明：生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理可顯著提高波葉金桂插穗的生根率及不定根數(shù)量，以500 mg/L NAA處理最有效。在不定根發(fā)生過(guò)程中，波葉金桂插穗皮部可溶性糖含量呈先降后升趨勢(shì)；前期淀粉含量下降較快，后期趨緩；整個(gè)生根過(guò)程中全氮含量總體呈下降趨勢(shì)；500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d IAA含量最高，隨后大幅下降；ABA的變化趨勢(shì)與IAA正相反，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d ABA含量最低，隨后逐漸上升。

關(guān)鍵詞：波葉金桂；扦插；生根；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；內(nèi)源激素

中圖分類號(hào)： S685.130.4文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2014）06-0202-03

收稿日期：2013-09-24

基金項(xiàng)目：國(guó)家林業(yè)公益性行業(yè)科研專項(xiàng)（編號(hào)：201204607）；江蘇省普通高校自然科學(xué)研究項(xiàng)目（編號(hào)：11KJB220002）；江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：楊秀蓮（1970—），女，浙江諸暨人，博士，副教授，從事園林植物栽培應(yīng)用研究。E-mail：yangxl339@sina.com。

通信作者：王良桂，教授，從事園林植物栽培和工程管理研究。E-mail：wlg@njfu.com.cn。桂花（Osmanthus fragrans Lour.） 是我國(guó)傳統(tǒng)的十大名花之一，具有很高的食用價(jià)值及藥用價(jià)值。桂花品種繁多，根據(jù)花色可分為四季桂品種群、銀桂品種群、金桂品種群、丹桂品種群，其中以金桂品種群的觀賞價(jià)值最高。波葉金桂是金桂品種群中的優(yōu)異品種。扦插是桂花的主要繁殖方式，但不同品種桂花的扦插生根能力有很大差異。自然條件下，波葉金桂的插穗不易生根，這也是目前該品種在園林中應(yīng)用較少的主要原因。本試驗(yàn)采用不同濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理波葉金桂的插穗，并研究插穗內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及內(nèi)源激素含量變化，旨在為繁殖波葉金桂提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料及處理

試驗(yàn)所用插條于2009年5月采自南京林業(yè)大學(xué)校園內(nèi)30年生波葉金桂。扦插試驗(yàn)在南京林業(yè)大學(xué)園林示范中心進(jìn)行。用塑料周轉(zhuǎn)箱（58 cm×36 cm×18 cm ）做插床，底部均勻打孔方便排水，采用蛭石、珍珠巖（體積比1 ∶1）混合基質(zhì)。扦插前3 d 用0.5%高錳酸鉀溶液浸泡插條24 h，隨后用清水沖洗干凈，待用。選取母樹中部外圍生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲害的當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條，剪成長(zhǎng)約10 cm的小段。插前用不同濃度的NAA、IAA、ABT等3種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理插條 30 s，以清水作對(duì)照。采取隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每處理90根插條，每小區(qū)30根插條，每處理重復(fù)3次，隨機(jī)排列，插條間距 10 cm。扦插后保持適宜濕度。每隔7 d 用0.5%多菌靈消毒1次。扦插后第71天統(tǒng)計(jì)生根率、根數(shù)、根長(zhǎng)等指標(biāo)。選擇 500 mg/L NAA溶液處理的插穗按相同方法進(jìn)行扦插，清水處理作對(duì)照。分別在插后15、24、44、57、71 d取樣。每處理隨機(jī)抽取4 根插穗，每處理3次重復(fù)。將插穗立即放入冰盒中帶回實(shí)驗(yàn)室，用清水沖洗干凈并擦干，剝?nèi)』? cm處的皮部測(cè)定內(nèi)含物、激素含量。

1.2測(cè)定方法

取置于超低溫冰箱（-70 ℃）中保存?zhèn)溆玫钠げ浚?2 mL 內(nèi)含 1 mmol/L 2，6-二叔丁基對(duì)甲基苯酚的 80%甲醇溶液，冰浴下研磨成勻漿，轉(zhuǎn)入 10 mL 試管中，再用 2 mL提取液分次將研缽沖洗干凈，一并轉(zhuǎn)入試管中，搖勻后置于 4 ℃ 冰箱中提取 4 h，1 000 r/min 離心 15 min，取上清液。用酶聯(lián)免疫吸附分析法測(cè)定IAA、ABA、GA、ZR 4種內(nèi)源激素的含量，重復(fù)3次[1]。 采用蒽酮比色法[2]測(cè)定可溶性糖及淀粉含量，采用考馬斯亮藍(lán) G-250 法[2]測(cè)定可溶性蛋白質(zhì)含量，參照高俊鳳的方法[3]測(cè)定全氮含量，皮部C/N值計(jì)算公式如下：

C/N=可溶性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)/植物全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

1.3數(shù)據(jù)處理

用SPSS 13.10軟件進(jìn)行方差分析，用Duncans新復(fù)極差法檢驗(yàn)差異顯著性。

2結(jié)果與分析

2.1不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)波葉金桂扦插生根的影響

3種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理下波葉金桂插穗生根率都在60%以上，500 mg/L NAA處理下插穗生根率最高，是對(duì)照的3.6倍。500 mg/L NAA處理下插穗不定根數(shù)量也最多，達(dá)84條，對(duì)照僅有3條。由此可知，3種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑均可有效提高波葉金桂插穗的生根率，500 mg/L NAA可顯著提高波葉金桂插穗生根率及不定根數(shù)量，IAA對(duì)根長(zhǎng)的促進(jìn)作用較好。

2.2扦插生根過(guò)程中皮部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量

2.2.1可溶性糖、可溶性淀粉含量由圖1可知，波葉金桂插穗皮部可溶性糖含量呈先降后升趨勢(shì)。NAA處理下插穗皮部可溶性糖含量在扦插后第24天最低。扦插后第15天至第24天，NAA處理下插穗已經(jīng)形成較多的愈傷組織，對(duì)照此時(shí)變化不明顯。扦插后期，隨著不定根的出現(xiàn)及生長(zhǎng)，光合產(chǎn)

不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理下波葉金桂插穗的生根率、根長(zhǎng)、根數(shù)

物積累量增加，波葉金桂插穗根部可溶性糖含量不斷上升。淀粉水解轉(zhuǎn)化為糖類，供給插穗生根所需的能量。插穗內(nèi)淀粉含量越高，說(shuō)明可溶性糖含量越低[3]。由圖2可知，NAA處理及對(duì)照處理的淀粉含量變化趨勢(shì)均是前期下降較快，后期趨緩。但NAA處理下波葉金桂插穗皮部淀粉含量比對(duì)照低很多，表明用NAA處理波葉金桂插穗能顯著提高淀粉的降解速度，前期波葉金桂插穗愈傷組織及不定根生長(zhǎng)需要消耗大量可溶性糖，淀粉含量下降表明有更多的淀粉轉(zhuǎn)化為糖類。

2.2.2全氮含量、C/N值從圖3 可知，NAA處理、對(duì)照處理下波葉金桂插穗在整個(gè)生根過(guò)程中全氮含量總體呈下降趨勢(shì)，且NAA處理下波葉金桂插穗皮部總氮含量低于對(duì)照。這也證實(shí)了高氮條件不利于插穗生根的結(jié)論[4]。從圖4 可知，不同扦插時(shí)間波葉金桂插穗皮部C/N值變化趨勢(shì)與可溶性糖含量變化趨勢(shì)相似，C/N值的變化主要是由可溶性糖含量變化造成的。NAA處理下波葉金桂插穗皮部C/N值升高，從而提高了生根率，證明了C/N值高有利于生根的結(jié)論[4]。endprint

2.2.3可溶性蛋白質(zhì)含量可溶性蛋白與植物的形態(tài)發(fā)生有很大關(guān)系，為細(xì)胞的生長(zhǎng)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。從圖5可知，前 24 d，NAA處理下波葉金桂插穗皮部可溶性蛋白質(zhì)含量比對(duì)照低，44 d后高于對(duì)照。結(jié)合外部形態(tài)觀察可知，前24 d是波葉金桂插穗皮部愈傷組織及根原基形成期，要消耗較多的蛋白質(zhì)，不定根形成后，可溶性蛋白含量又逐漸升高。對(duì)照處理下波葉金桂插穗皮部可溶性蛋白質(zhì)含量前24 d 也呈下降趨勢(shì)，44 d到達(dá)低谷。

2.3扦插生根過(guò)程中插穗皮部?jī)?nèi)源激素含量

激素在不定根形成過(guò)程中起著核心作用，它可以誘導(dǎo)根原基產(chǎn)生，影響新根形成。由圖6可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部IAA含量呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢(shì)。扦插后15 d IAA含量最高，此時(shí)正是愈傷組織及根原基大量形成期，較高的IAA有利于根原基形成，44 d達(dá)到低谷，隨后緩慢上升。對(duì)照IAA含量變化比較平緩。由此可知，NAA處理顯著提高了插穗皮部的IAA含量。愈傷組織生長(zhǎng)要消耗部分內(nèi)源IAA，新根生出后波葉金桂體內(nèi)合成內(nèi)源IAA，從而使內(nèi)源IAA含量上升。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究結(jié)論一致[4-6]。ABA是插穗生根的抑制劑。由可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部ABA含量在前44 d升高，后逐漸降低，整個(gè)生根過(guò)程中NAA處理下ABA含量始終低于對(duì)照。低濃度ABA有利于IAA及其他有利生根的物質(zhì)向插穗基部運(yùn)輸[6]。ZR是細(xì)胞分裂素的一種，由圖8可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部ZR含量呈先升后降再升的趨勢(shì)，對(duì)照處理下波葉金桂插穗皮部ZR含量總體呈緩慢下降趨勢(shì)，前期下降較快，后期比較緩慢。不定根長(zhǎng)出后，ZR含量逐漸上升，這可能是新生根重新合成ZR所致[6-9]。由圖9可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部 GA含量呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，44 d達(dá)到峰值，此時(shí)正是不定根大量形成時(shí)期。NAA處理下GA值始終低于對(duì)照，說(shuō)明較低水平的GA對(duì)生根有促進(jìn)作用，這與長(zhǎng)蕊杜鵑的變化相反，與珍珠黃楊變化相似[7-9]。

3結(jié)論與討論

3.1不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑與生根的關(guān)系

應(yīng)用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可促進(jìn)難生根樹種生根[9-11]。本試驗(yàn)表明，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗生根率可達(dá)90%，且不定根數(shù)量較多。IAA、ABT處理下波葉金桂插穗生根率也極顯著高于對(duì)照。由此可知，外源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可以有效促進(jìn)波葉金桂的插穗生根，這與前人的研究結(jié)果相同[12]。

3.2營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與生根的關(guān)系

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是插穗生根的基本條件之一，碳水化合物與氮素化合物不僅是插穗生根生長(zhǎng)不可或缺的物質(zhì)，也是插穗在生根前維持生命的重要能源?？扇苄蕴穷?，是生根必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為大量不定根的形成提供養(yǎng)分。插穗內(nèi)的可溶性糖積累于基部，用于誘導(dǎo)根原基及不定根的形成。本研究表明，波葉金桂插穗可溶性糖及蛋白質(zhì)含量均呈先降后升的趨勢(shì)，并且都高于對(duì)照，而淀粉含量則持續(xù)降低，說(shuō)明根原基的形成及不定根的出現(xiàn)需要消耗大量碳水化合物及蛋白質(zhì)。500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗總氮含量呈現(xiàn)出先降低后升高的趨勢(shì)，證實(shí)了高氮條件不利于插穗生根的結(jié)論[4]。500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗C/N值除24 d時(shí)略低于對(duì)照外，其余時(shí)間均高于對(duì)照且持續(xù)上升，這與張玉臣等的研究結(jié)果一致[13]。一定的碳水化合物及氮素化合物是波葉金桂不定根形成的基礎(chǔ)，插穗能夠大量生根與插穗體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量高低存在密切關(guān)系[14]。

3.3內(nèi)源激素與生根的關(guān)系

植物不定根的發(fā)生雖然受多種因素的影響，但內(nèi)源激素及外源激素在根原基的形成中起關(guān)鍵作用。高濃度的內(nèi)源GA會(huì)抑制不定根的形成[15-16]，本研究表明，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d IAA含量最高，隨后大幅下降，結(jié)合形態(tài)觀察，此期為根原基發(fā)育高峰期，細(xì)胞在生長(zhǎng)素的作用下大量分裂并分化不定根原基，44 d降到谷值，此時(shí)大量不定根長(zhǎng)出。ABA的變化趨勢(shì)與IAA相反，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d ABA最低，隨后逐漸上升。IAA是促進(jìn)插穗生根的主要內(nèi)源激素，ABA是抑制生根的主要內(nèi)源激素。GA含量變化趨勢(shì)與ABA相似，ZR含量則呈先上升后下降再上升的趨勢(shì)，它們對(duì)生根影響小。ABA、GA、ZR含量與生根率呈負(fù)相關(guān)，IAA含量與生根率呈正相關(guān)，說(shuō)明IAA 與生根率關(guān)系最密切。外源NAA對(duì)內(nèi)源IAA 的合成有促進(jìn)作用，高濃度的IAA 有利于根原基的分化及形成。因此，外源NAA對(duì)波葉金桂不定根的形成有促進(jìn)作用[9]。外源激素對(duì)插穗生根效果的影響可能不是通過(guò)直接改變某種內(nèi)源激素含量而影響生根，而是使內(nèi)源激素之間達(dá)到了一定的平衡，從而促進(jìn)生根。另外，施用外源激素在愈傷形成期降低了生根部位的GA含量，低濃度的GA很可能有利于愈傷組織形成。本研究中由于第一次取樣時(shí)間是在插后15 d，結(jié)合形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察，此期已是愈傷組織根原基大量形成期，因此前期的很多變化均未能體現(xiàn)出來(lái)。

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2.2.3可溶性蛋白質(zhì)含量可溶性蛋白與植物的形態(tài)發(fā)生有很大關(guān)系，為細(xì)胞的生長(zhǎng)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。從圖5可知，前 24 d，NAA處理下波葉金桂插穗皮部可溶性蛋白質(zhì)含量比對(duì)照低，44 d后高于對(duì)照。結(jié)合外部形態(tài)觀察可知，前24 d是波葉金桂插穗皮部愈傷組織及根原基形成期，要消耗較多的蛋白質(zhì)，不定根形成后，可溶性蛋白含量又逐漸升高。對(duì)照處理下波葉金桂插穗皮部可溶性蛋白質(zhì)含量前24 d 也呈下降趨勢(shì)，44 d到達(dá)低谷。

2.3扦插生根過(guò)程中插穗皮部?jī)?nèi)源激素含量

激素在不定根形成過(guò)程中起著核心作用，它可以誘導(dǎo)根原基產(chǎn)生，影響新根形成。由圖6可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部IAA含量呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢(shì)。扦插后15 d IAA含量最高，此時(shí)正是愈傷組織及根原基大量形成期，較高的IAA有利于根原基形成，44 d達(dá)到低谷，隨后緩慢上升。對(duì)照IAA含量變化比較平緩。由此可知，NAA處理顯著提高了插穗皮部的IAA含量。愈傷組織生長(zhǎng)要消耗部分內(nèi)源IAA，新根生出后波葉金桂體內(nèi)合成內(nèi)源IAA，從而使內(nèi)源IAA含量上升。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究結(jié)論一致[4-6]。ABA是插穗生根的抑制劑。由可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部ABA含量在前44 d升高，后逐漸降低，整個(gè)生根過(guò)程中NAA處理下ABA含量始終低于對(duì)照。低濃度ABA有利于IAA及其他有利生根的物質(zhì)向插穗基部運(yùn)輸[6]。ZR是細(xì)胞分裂素的一種，由圖8可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部ZR含量呈先升后降再升的趨勢(shì)，對(duì)照處理下波葉金桂插穗皮部ZR含量總體呈緩慢下降趨勢(shì)，前期下降較快，后期比較緩慢。不定根長(zhǎng)出后，ZR含量逐漸上升，這可能是新生根重新合成ZR所致[6-9]。由圖9可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部 GA含量呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，44 d達(dá)到峰值，此時(shí)正是不定根大量形成時(shí)期。NAA處理下GA值始終低于對(duì)照，說(shuō)明較低水平的GA對(duì)生根有促進(jìn)作用，這與長(zhǎng)蕊杜鵑的變化相反，與珍珠黃楊變化相似[7-9]。

3結(jié)論與討論

3.1不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑與生根的關(guān)系

應(yīng)用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可促進(jìn)難生根樹種生根[9-11]。本試驗(yàn)表明，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗生根率可達(dá)90%，且不定根數(shù)量較多。IAA、ABT處理下波葉金桂插穗生根率也極顯著高于對(duì)照。由此可知，外源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可以有效促進(jìn)波葉金桂的插穗生根，這與前人的研究結(jié)果相同[12]。

3.2營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與生根的關(guān)系

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是插穗生根的基本條件之一，碳水化合物與氮素化合物不僅是插穗生根生長(zhǎng)不可或缺的物質(zhì)，也是插穗在生根前維持生命的重要能源?？扇苄蕴穷?，是生根必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為大量不定根的形成提供養(yǎng)分。插穗內(nèi)的可溶性糖積累于基部，用于誘導(dǎo)根原基及不定根的形成。本研究表明，波葉金桂插穗可溶性糖及蛋白質(zhì)含量均呈先降后升的趨勢(shì)，并且都高于對(duì)照，而淀粉含量則持續(xù)降低，說(shuō)明根原基的形成及不定根的出現(xiàn)需要消耗大量碳水化合物及蛋白質(zhì)。500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗總氮含量呈現(xiàn)出先降低后升高的趨勢(shì)，證實(shí)了高氮條件不利于插穗生根的結(jié)論[4]。500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗C/N值除24 d時(shí)略低于對(duì)照外，其余時(shí)間均高于對(duì)照且持續(xù)上升，這與張玉臣等的研究結(jié)果一致[13]。一定的碳水化合物及氮素化合物是波葉金桂不定根形成的基礎(chǔ)，插穗能夠大量生根與插穗體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量高低存在密切關(guān)系[14]。

3.3內(nèi)源激素與生根的關(guān)系

植物不定根的發(fā)生雖然受多種因素的影響，但內(nèi)源激素及外源激素在根原基的形成中起關(guān)鍵作用。高濃度的內(nèi)源GA會(huì)抑制不定根的形成[15-16]，本研究表明，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d IAA含量最高，隨后大幅下降，結(jié)合形態(tài)觀察，此期為根原基發(fā)育高峰期，細(xì)胞在生長(zhǎng)素的作用下大量分裂并分化不定根原基，44 d降到谷值，此時(shí)大量不定根長(zhǎng)出。ABA的變化趨勢(shì)與IAA相反，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d ABA最低，隨后逐漸上升。IAA是促進(jìn)插穗生根的主要內(nèi)源激素，ABA是抑制生根的主要內(nèi)源激素。GA含量變化趨勢(shì)與ABA相似，ZR含量則呈先上升后下降再上升的趨勢(shì)，它們對(duì)生根影響小。ABA、GA、ZR含量與生根率呈負(fù)相關(guān)，IAA含量與生根率呈正相關(guān)，說(shuō)明IAA 與生根率關(guān)系最密切。外源NAA對(duì)內(nèi)源IAA 的合成有促進(jìn)作用，高濃度的IAA 有利于根原基的分化及形成。因此，外源NAA對(duì)波葉金桂不定根的形成有促進(jìn)作用[9]。外源激素對(duì)插穗生根效果的影響可能不是通過(guò)直接改變某種內(nèi)源激素含量而影響生根，而是使內(nèi)源激素之間達(dá)到了一定的平衡，從而促進(jìn)生根。另外，施用外源激素在愈傷形成期降低了生根部位的GA含量，低濃度的GA很可能有利于愈傷組織形成。本研究中由于第一次取樣時(shí)間是在插后15 d，結(jié)合形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察，此期已是愈傷組織根原基大量形成期，因此前期的很多變化均未能體現(xiàn)出來(lái)。

參考文獻(xiàn)：

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2.2.3可溶性蛋白質(zhì)含量可溶性蛋白與植物的形態(tài)發(fā)生有很大關(guān)系，為細(xì)胞的生長(zhǎng)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。從圖5可知，前 24 d，NAA處理下波葉金桂插穗皮部可溶性蛋白質(zhì)含量比對(duì)照低，44 d后高于對(duì)照。結(jié)合外部形態(tài)觀察可知，前24 d是波葉金桂插穗皮部愈傷組織及根原基形成期，要消耗較多的蛋白質(zhì)，不定根形成后，可溶性蛋白含量又逐漸升高。對(duì)照處理下波葉金桂插穗皮部可溶性蛋白質(zhì)含量前24 d 也呈下降趨勢(shì)，44 d到達(dá)低谷。

2.3扦插生根過(guò)程中插穗皮部?jī)?nèi)源激素含量

激素在不定根形成過(guò)程中起著核心作用，它可以誘導(dǎo)根原基產(chǎn)生，影響新根形成。由圖6可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部IAA含量呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢(shì)。扦插后15 d IAA含量最高，此時(shí)正是愈傷組織及根原基大量形成期，較高的IAA有利于根原基形成，44 d達(dá)到低谷，隨后緩慢上升。對(duì)照IAA含量變化比較平緩。由此可知，NAA處理顯著提高了插穗皮部的IAA含量。愈傷組織生長(zhǎng)要消耗部分內(nèi)源IAA，新根生出后波葉金桂體內(nèi)合成內(nèi)源IAA，從而使內(nèi)源IAA含量上升。本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究結(jié)論一致[4-6]。ABA是插穗生根的抑制劑。由可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部ABA含量在前44 d升高，后逐漸降低，整個(gè)生根過(guò)程中NAA處理下ABA含量始終低于對(duì)照。低濃度ABA有利于IAA及其他有利生根的物質(zhì)向插穗基部運(yùn)輸[6]。ZR是細(xì)胞分裂素的一種，由圖8可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部ZR含量呈先升后降再升的趨勢(shì)，對(duì)照處理下波葉金桂插穗皮部ZR含量總體呈緩慢下降趨勢(shì)，前期下降較快，后期比較緩慢。不定根長(zhǎng)出后，ZR含量逐漸上升，這可能是新生根重新合成ZR所致[6-9]。由圖9可知，NAA處理下波葉金桂插穗皮部 GA含量呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，44 d達(dá)到峰值，此時(shí)正是不定根大量形成時(shí)期。NAA處理下GA值始終低于對(duì)照，說(shuō)明較低水平的GA對(duì)生根有促進(jìn)作用，這與長(zhǎng)蕊杜鵑的變化相反，與珍珠黃楊變化相似[7-9]。

3結(jié)論與討論

3.1不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑與生根的關(guān)系

應(yīng)用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可促進(jìn)難生根樹種生根[9-11]。本試驗(yàn)表明，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗生根率可達(dá)90%，且不定根數(shù)量較多。IAA、ABT處理下波葉金桂插穗生根率也極顯著高于對(duì)照。由此可知，外源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可以有效促進(jìn)波葉金桂的插穗生根，這與前人的研究結(jié)果相同[12]。

3.2營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與生根的關(guān)系

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是插穗生根的基本條件之一，碳水化合物與氮素化合物不僅是插穗生根生長(zhǎng)不可或缺的物質(zhì)，也是插穗在生根前維持生命的重要能源。可溶性糖類，是生根必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為大量不定根的形成提供養(yǎng)分。插穗內(nèi)的可溶性糖積累于基部，用于誘導(dǎo)根原基及不定根的形成。本研究表明，波葉金桂插穗可溶性糖及蛋白質(zhì)含量均呈先降后升的趨勢(shì)，并且都高于對(duì)照，而淀粉含量則持續(xù)降低，說(shuō)明根原基的形成及不定根的出現(xiàn)需要消耗大量碳水化合物及蛋白質(zhì)。500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗總氮含量呈現(xiàn)出先降低后升高的趨勢(shì)，證實(shí)了高氮條件不利于插穗生根的結(jié)論[4]。500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗C/N值除24 d時(shí)略低于對(duì)照外，其余時(shí)間均高于對(duì)照且持續(xù)上升，這與張玉臣等的研究結(jié)果一致[13]。一定的碳水化合物及氮素化合物是波葉金桂不定根形成的基礎(chǔ)，插穗能夠大量生根與插穗體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量高低存在密切關(guān)系[14]。

3.3內(nèi)源激素與生根的關(guān)系

植物不定根的發(fā)生雖然受多種因素的影響，但內(nèi)源激素及外源激素在根原基的形成中起關(guān)鍵作用。高濃度的內(nèi)源GA會(huì)抑制不定根的形成[15-16]，本研究表明，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d IAA含量最高，隨后大幅下降，結(jié)合形態(tài)觀察，此期為根原基發(fā)育高峰期，細(xì)胞在生長(zhǎng)素的作用下大量分裂并分化不定根原基，44 d降到谷值，此時(shí)大量不定根長(zhǎng)出。ABA的變化趨勢(shì)與IAA相反，500 mg/L NAA處理下波葉金桂插穗插后15 d ABA最低，隨后逐漸上升。IAA是促進(jìn)插穗生根的主要內(nèi)源激素，ABA是抑制生根的主要內(nèi)源激素。GA含量變化趨勢(shì)與ABA相似，ZR含量則呈先上升后下降再上升的趨勢(shì)，它們對(duì)生根影響小。ABA、GA、ZR含量與生根率呈負(fù)相關(guān)，IAA含量與生根率呈正相關(guān)，說(shuō)明IAA 與生根率關(guān)系最密切。外源NAA對(duì)內(nèi)源IAA 的合成有促進(jìn)作用，高濃度的IAA 有利于根原基的分化及形成。因此，外源NAA對(duì)波葉金桂不定根的形成有促進(jìn)作用[9]。外源激素對(duì)插穗生根效果的影響可能不是通過(guò)直接改變某種內(nèi)源激素含量而影響生根，而是使內(nèi)源激素之間達(dá)到了一定的平衡，從而促進(jìn)生根。另外，施用外源激素在愈傷形成期降低了生根部位的GA含量，低濃度的GA很可能有利于愈傷組織形成。本研究中由于第一次取樣時(shí)間是在插后15 d，結(jié)合形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察，此期已是愈傷組織根原基大量形成期，因此前期的很多變化均未能體現(xiàn)出來(lái)。

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