索南卓瑪
(青海省海南州同德縣畜牧獸醫(yī)工作站,813200)
布魯氏桿菌?。ê喎Q布病,俗稱懶漢?。┦怯刹剪斒蠗U菌引起的人畜共患的慢性傳染病。在自然條件下,家畜對布魯氏桿菌的易感性存在種屬差異,羊、牛易感性較強。羊布病特點是生殖器官和胎盤發(fā)炎,引起流產(chǎn)、不育,還可以出現(xiàn)睪丸炎,跛行,后肢麻痹或脊椎炎,偶爾也會出現(xiàn)子宮炎或膿腫等臨床特征[1]。布魯氏桿菌病無季節(jié)性,一年四季均可發(fā)生。傳播途徑較多,可通過皮膚、消化道、呼吸黏膜等途徑傳播[2]。世界動物衛(wèi)生組織(Of f ice International Des Epizooties,OIE)將布病列為B類動物疫病,我國將其列為二類動物疫病。2013年10月某羊場在調(diào)羊過程中發(fā)生了一起疑似羊布氏桿菌病的疫情,因發(fā)現(xiàn)較早,并采取了積極有效的治療措施,及時控制了布病疫情的蔓延。
該羊場部分羊只食欲減退、消瘦、體溫升高、精神萎靡、偶有公羊跛行;妊娠母羊流產(chǎn)、產(chǎn)死胎弱胎,且流產(chǎn)后胎衣不下,胎衣呈膠凍樣浸潤、胎衣壁增厚并有出血點,陰道分泌褐色惡臭液體;部分羊癥狀不明顯。據(jù)了解,該羊場近期引進了一批羊,未經(jīng)嚴格的檢疫就混群飼養(yǎng)。根據(jù)布病的臨床癥狀和實驗室檢驗結(jié)果,我們作出初步診斷,并立即進行了病羊隔離,圈舍環(huán)境消毒、健康羊只進行預(yù)防接種等處理。
2.1剖檢檢查 剖檢流產(chǎn)死胎2只,胎兒皮下呈血樣浸潤,呈敗血癥樣病變,生殖器官和肝臟炎性壞死,脾、淋巴結(jié)等腫大并伴有出血點,部分器官漿膜和粘膜點狀出血,胃內(nèi)有白色絮狀物。
2.2病原菌鏡檢 分別取流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物和母羊陰道分泌液接種于含1%血清的馬丁瓊脂培養(yǎng)基中,在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h~24 h。取疑似菌落涂片,進行革蘭氏染色,鏡檢顯示,該菌呈革蘭氏染色陰性桿菌,菌體形態(tài)為球桿狀或短桿狀,鏡下散在分布,沒有鞭毛。
2.3虎紅平板凝聚試驗初篩 對該羊場106只羊全部靜脈采血并做好標記,于37℃恒溫培養(yǎng)箱靜置1h,4℃環(huán)境中2h后分離血清,同時準備100μL移液器、載玻片及虎紅凝集反應(yīng)專用抗原等。在潔凈的玻璃板上滴加被檢血清0.03mL,然后再滴加0.03mL專用抗原,并設(shè)立陰陽性對照混勻,在室溫下放置3~4min后進行判定。結(jié)果顯示,有24只羊出現(xiàn)陽性凝集反應(yīng)。
2.4試管凝集試驗 對虎紅平板凝聚試驗呈陽性的24只羊血清進行試管凝集試驗復檢。
2.4.1稀釋待檢血清,取5只小試管,編號1-5,其中1中加入2.3mL 0.5%石碳酸高滲鹽水(12%),3、4、5各加入0.5mL;取0.2mL待檢血清于1中混勻后,取0.5mL各加入2、3號中混勻,然后取3中0.5mL加入到4中混勻;取4中混勻液0.5mL加入5中混勻,然后取0.5mL棄去;1中取0.5mL棄去。
2.4.2用0.5%石碳酸高滲鹽水(12%)按1:10比例稀釋專用抗原,向2~5試管中各加入0.5mL稀釋后的抗原,至此2~5中血清稀釋倍數(shù)依次為1:25,1:50,1:100,1:200,試驗中設(shè)陰陽性及血清(1號)、抗原對照,充分混勻檢測管和對照管,于37℃培養(yǎng)箱中20h,取出置室溫靜置2h后,判定結(jié)果。
2.4.3比濁管配制,取上述1:10抗原稀釋液10mL,加入等量的0.5%石碳酸高滲鹽水進行倍比稀釋,按表1進行配制及判定。
表1比濁管配制及結(jié)果判定
羊血清判定標準,1:50(++)及以上為陽性,1:25(++)為可疑的,被檢24份血清中有23份呈陽性凝集反應(yīng),另1份判為可疑反應(yīng)(復檢為陽性)。由此確診該羊場發(fā)生了羊布病疫情。
對24只陽性可疑羊全面撲殺并進行無害化處理,其他羊進行了轉(zhuǎn)圈及隔離處理,采用10%石灰乳和5%NaOH消毒液對污染圈舍、環(huán)境、飼養(yǎng)用具等徹底消毒處理,墊料、糞便、流產(chǎn)胎兒、胎衣、羊水及分泌物等徹底消毒后深埋無害化處理。對發(fā)病的羊用0.1%KMnO4溶液沖洗陰道和子宮后,聯(lián)合長效土霉素(10 mg/kg)和鏈霉素(20 mg/kg)進行肌內(nèi)注射治療,2次/d;對健康的羊用羊型5號弱毒疫苗進行免疫接種。同時加強飼養(yǎng)營養(yǎng),提高羊只免疫力。經(jīng)過20天的治療,該場疫情得到了有效控制,羊只逐漸好轉(zhuǎn),45 d后復檢無陽性檢出。建議該羊場嚴格執(zhí)行檢驗檢疫制度,羊每月定期采血進行虎紅凝集反應(yīng)檢疫1次。
布病預(yù)防,應(yīng)建立科學飼養(yǎng)體系,對牲畜進行定期免疫,培育健康羊群。養(yǎng)殖場應(yīng)堅持自繁自養(yǎng),如確需從外地調(diào)進,必須嚴把檢疫關(guān),并且經(jīng)過一段時間的隔離飼養(yǎng),檢疫觀察,如確實沒問題,方可混入健康羊群[3]。
近年來,我國布病大規(guī)模暴發(fā)流行逐漸減少,小規(guī)模、分散、多點的流行較常見,典型病例增多[4]。疫情范圍進一步擴大,除五大牧區(qū)外,半農(nóng)、半牧和農(nóng)區(qū)的省份布病疫情明顯上升[5],給畜牧業(yè)和人類健康形成了巨大的危害。根據(jù)布病流行特點,我們應(yīng)當以預(yù)防為主,對健康畜群,加強飼養(yǎng)管理,每年定期預(yù)防免疫,堅持自繁自養(yǎng)的方針。相關(guān)部門應(yīng)進一步加大布病檢疫檢測、免疫預(yù)防、流通監(jiān)管、撲殺凈化等防控措施實施力度,對撲殺陽性病畜養(yǎng)殖戶(場)給與補償,使散戶及大小規(guī)模養(yǎng)殖場做到早發(fā)現(xiàn)、早上報、早診斷、早治療,積極有效的防控布病的發(fā)生和傳播。
[1]毛景東,王景龍,楊艷玲.布魯氏菌病的研究進展[J].中國畜牧獸醫(yī):2011,38(1):222-227.
[2]王東梅,胡大勇,汪瀅瀅.淺談布魯氏桿菌病的危害和預(yù)防措施[J].吉林畜牧獸醫(yī):2014,2:64-65.
[3]王彩茹,王艷梅.羊布魯氏桿菌病的診治與防治[J].河南畜牧獸醫(yī):2014,35(3):47.
[4]王傳清,李星.布魯氏菌病的流行和研究現(xiàn)狀及防控策略[J].中國動物檢疫:2009,26(6):63-65.
[5]徐楠,李娜.布氏桿菌病流行病學及診治研究進展[J].中國實用醫(yī)藥:2010,5(20):246-247.