周健鵬，王 衛(wèi)

(天津市藥品檢驗(yàn)所，天津 300070)

氣相色譜法測(cè)定復(fù)方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺的含量*

周健鵬，王 衛(wèi)

(天津市藥品檢驗(yàn)所，天津 300070)

目的：建立氣相色譜法對(duì)5批復(fù)方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺(DMF)的含量進(jìn)行了考查。方法：采用氣相色譜法，HP-5毛細(xì)管柱(30 m×0.53 mm，5 μm)，載氣為氮?dú)?，氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，柱溫90 ℃，保持9 min，以40 ℃/min速度升溫至200 ℃，保持5 min。結(jié)果：對(duì)5批復(fù)方甲地孕酮注射液中的DMF含量進(jìn)行了考查，在所考查的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r為0.999 9，平均回收率為99.0%(n=9)。結(jié)論：本方法靈敏，結(jié)果準(zhǔn)確。

氣相色譜法，復(fù)方甲地孕酮注射液，二甲基甲酰胺

藥品中殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過(guò)程中使用的，但在工藝過(guò)程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。復(fù)方甲地孕酮注射液為混懸液，主要成分為醋酸甲地孕酮和雌二醇，在微粒結(jié)晶制備過(guò)程中，用到了大量的DMF，參考《中國(guó)藥典》2010年版附錄Ⅷ P[1]，DMF為第二類溶劑，應(yīng)該限制使用，殘留的限度為0.088%。因此，為嚴(yán)格控制產(chǎn)品的安全性，此次評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)增加了復(fù)方甲地孕酮注射液中殘留溶劑DMF的檢查，采用氣相色譜法測(cè)定，并比較某公司提供的不同批號(hào)樣品的DMF殘留量[2]。

1 儀器與試藥

1.1儀器 Agilent 7890氣相色譜儀， FID檢測(cè)器。

1.2試藥 復(fù)方甲地孕酮注射液(某公司，批號(hào)090305、100201、100601、100307、100307)，甲醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件及系統(tǒng)適用性 色譜柱為HP-5毛細(xì)管柱(30 m×0.53 mm，5 μm)，載氣為氮?dú)猓鶞?0 ℃，保持9 min，以40 ℃/min速度升溫至200 ℃，保持5 min，進(jìn)樣口溫度200 ℃，檢測(cè)器溫度240 ℃，分流比5∶1，進(jìn)樣品量1 μl。

2.2溶液的制備

2.2.1對(duì)照溶液 精密稱取N,N-二甲基甲酰胺88 mg，置100 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 ml，置100 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照貯備液；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。

2.2.2供試品溶液 復(fù)方甲地孕酮注射液。

2.2.3空白溶液 甲醇。

分別精密量取對(duì)照溶液、空白溶液和供試品溶液1 μl進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖1。

2.3線性試驗(yàn) 分別精密量取對(duì)照貯備液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0和20.0 ml，分置50 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，獲得一系列溶液，精密量取2 μl依次進(jìn)樣，以各溶液濃度X(μg/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積Y為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，Y=1.885 961X-0.313 536(r=0.999 9)，DMF在0.88～17.6 μg/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4精密度試驗(yàn) 取對(duì)照溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算峰面積RSD為1.7%。

1．N，N-二甲基甲酰胺

2.5最低檢出限、定量限試驗(yàn) 取對(duì)照儲(chǔ)備溶液，用甲醇稀釋至信噪比約為3時(shí)，測(cè)定N,N-二甲基甲酰胺最低檢出濃度為0.44 μg/ml(0.44 ng)；信噪比約為10時(shí)，N,N-二甲基甲酰胺定量限為1.32 μg/ml(1.32 ng)。

2.6回收率試驗(yàn) 精取已知溶劑含量的2號(hào)樣品1.0 ml，共9份，分置5 ml量瓶中，分別加入下述溶液2、2.5和3.0 ml各3份(精密量取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照貯備液10 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得),加甲醇定容、搖勻、離心、取上清液進(jìn)樣分析，按外標(biāo)法計(jì)算N,N-二甲基甲酰胺平均回收率為99.0%(n=9)，RSD為1.4%，見(jiàn)表1。

表1 回收率測(cè)定結(jié)果

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn) 取對(duì)照溶液于0和22 h分別進(jìn)樣測(cè)定，N,N-二甲基甲酰胺峰面積分別為7.61和7.72，表明對(duì)照溶液22 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8樣品測(cè)定 精密量取樣品約1 ml，置5 ml量瓶中，加甲醇定容、搖勻、離心、取上清液進(jìn)樣分析，按上述色譜條件測(cè)定，結(jié)果5批樣品中N,N-二甲基甲酰胺分別為0.145%、0.123%、0.163%、0.190%和0.199%。

3 樣品測(cè)定結(jié)果

采用氣相色譜法測(cè)定復(fù)方甲地孕酮注射液中DMF殘留量，結(jié)果5批樣品中DMF殘留量分別為0.145%、0.123%、0.163%、0.190%和0.199%，均超出《中國(guó)藥典》規(guī)定限度0.088%。

4 討論

4.1為排除基質(zhì)效應(yīng)，采用了標(biāo)準(zhǔn)加入法和外標(biāo)法分別進(jìn)行了樣品測(cè)定，經(jīng)SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性檢驗(yàn)分析，結(jié)果顯示兩者無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

4.2本品為復(fù)方甲地孕酮注射液，在生產(chǎn)過(guò)程中是將醋酸甲地孕酮原料微粉化后加注射用水溶解的混懸液。在微粉化的過(guò)程中帶入了二甲基甲酰胺，從而影響了產(chǎn)品的殘留溶劑的量。提示制劑生產(chǎn)企業(yè)為保證產(chǎn)品質(zhì)量的安全性及穩(wěn)定性，應(yīng)慎重篩選原料供應(yīng)商，在控制原料質(zhì)量的同時(shí)，還應(yīng)對(duì)原料微粉化后殘留的二甲基甲酰胺加以控制。

1 中國(guó)藥典[S].二部.2010：附錄61

2 王衛(wèi).氣相色譜法測(cè)定格列本脲膠囊中二甲基甲酰胺的含量[J].天津藥學(xué)，2001，36(2):120-122

DeterminationofDMFincompoundmegestrolinjectionbyGC

Zhou Jianpeng，Wang Wei

(Tianjin Institute for Drug Control, Tianjin 300070)

Objective: To establish an GC method for determination the DMF in compound megestrol injection.Method: The chromatographic separation was achived on a HP-5 capillary column(30 m×0.53 mm，5 μm) ,with FID detector, nitrogen as the carry gas.The programmed column temperature was set as follows: maintained at 90 ℃ for 9 min and then raised to 200 ℃at the rate of 40 ℃/min follow by holding for 5 min.Results: The contentof DMF in compound megestrol injection were investigated, There were good linearies (r=0.9999), the average recovery rate was 99.0%(n=9).Conclusion: The method is accurate and sensitive.

GC，compound megestrol injection，DMF

2014-03-29

R927.2

A

1006-5687(2014)04-0011-02