溫麗英，冀春萍，李曉東

銀屑病性關(guān)節(jié)炎“風(fēng)濕三項(xiàng)”與外周血T細(xì)胞 表達(dá)及其相關(guān)性

溫麗英，冀春萍，李曉東

目的探討“風(fēng)濕三項(xiàng)”與外周血T細(xì)胞在銀屑病性關(guān)節(jié)炎中的表達(dá)及其相關(guān)性。方法2010年7月—2013年10月收治的54例銀屑病性關(guān)節(jié)炎患者為觀察組，另選56例健康體檢人員為健康對(duì)照組。檢測(cè)并比較2組患者的類風(fēng)濕因子(RF)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、抗鏈球菌溶血素O(ASO)的水平，外周血T細(xì)胞(Th1、Th2、Th17、Treg)表達(dá)情況。結(jié)果觀察組銀屑病性關(guān)節(jié)炎患者血清中RF、CRP、ASO水平均顯著高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；外周血Th1、Th17表達(dá)均高于健康對(duì)照組，Treg細(xì)胞表達(dá)低于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；銀屑病性關(guān)節(jié)炎外周血Th1細(xì)胞表達(dá)與RF、CRP相關(guān)(P<0.05)，Th2細(xì)胞表達(dá)與CRP相關(guān)，Th17細(xì)胞表達(dá)與RF、ASO相關(guān)，Treg細(xì)胞表達(dá)與風(fēng)濕三項(xiàng)均無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論銀屑病性關(guān)節(jié)炎外周血Th1表達(dá)與RF、CRP相關(guān)，Th2表達(dá)與CRP相關(guān)，Th17表達(dá)與RF、ASO相關(guān)，Treg表達(dá)與風(fēng)濕三項(xiàng)表達(dá)無(wú)相關(guān)性。

風(fēng)濕三項(xiàng)；外周血T細(xì)胞；銀屑病性關(guān)節(jié)炎；檢測(cè)；相關(guān)性

銀屑病性關(guān)節(jié)炎是一種慢性全身性自身免疫性疾病，與銀屑病密切相關(guān)，其病因至今不明，但是可以確定的是該病復(fù)發(fā)性強(qiáng)，具有遷延難愈等特點(diǎn)。其基本癥狀通常表現(xiàn)為關(guān)節(jié)不對(duì)稱性損害，患者皮膚亦會(huì)遭到不同程度的損害。本文通過(guò)對(duì)血液中類風(fēng)濕因子(RF)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、抗鏈球菌溶血素O(ASO)“風(fēng)濕三項(xiàng)”和外周血T細(xì)胞表達(dá)等指標(biāo)進(jìn)行研究，以期能對(duì)該病早期診斷提供幫助。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 按銀屑病性關(guān)節(jié)炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，收集2010年7月—2013年10月我院皮膚科新診斷的銀屑病性關(guān)節(jié)炎患者54例作為觀察組，排除有惡性腫瘤史、慢性感染史及嚴(yán)重心、肺、腎、胃腸道、神經(jīng)疾病患者。其中男28例，女26例；年齡10～65(35.6±3.3)歲；病程5～20(12.5±3.2)年。另選同期健康體檢者56例作為健康對(duì)照組，均無(wú)慢性感染史和關(guān)節(jié)痛疼史，其中男32例，女24例；年齡15～60(32.5±3.2)歲。2組患者的性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。入選者均知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法

1.2.1 血漿RF、CRP和ASO檢測(cè)： 取晨空腹靜脈血3 ml，經(jīng)3 500 r/min離心分離技術(shù)對(duì)血液進(jìn)行分離提取血漿，對(duì)血漿中RF、CRP和ASO含量進(jìn)行分析。RF采用散射比濁法，所使用Nephstar蛋白分析儀由深圳生物技術(shù)工程有限公司提供，若定量檢測(cè)顯示結(jié)果>50 IU/ml為陽(yáng)性；CRP采用透射比濁法，使用70GD生化分析儀進(jìn)行定量分析，結(jié)果>30 IU/ml為陽(yáng)性；ASO采用乳膠凝聚法，由上海生物技術(shù)有限公司合約贊助，嚴(yán)格按照說(shuō)明書步驟進(jìn)行操作，若在3 min內(nèi)出現(xiàn)凝聚的顆粒則為陽(yáng)性。需特別注意對(duì)RF檢測(cè)時(shí)，需應(yīng)用專用試管并滴加適量抗凝劑，震蕩幅度不宜過(guò)大。

1.2.2 外周血Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)檢測(cè)： 在無(wú)菌狀態(tài)下采集靜脈血10 ml放入肝素鈉抗凝管中檢測(cè)Th表達(dá)：稀釋血液，常規(guī)提取PBMC，1∶1加入PBS，以1 500 r/min分離，放置8 min，清除上清液，加入2 ml的1640培養(yǎng)基，吹打均勻，按照上述步驟洗細(xì)胞，清除上清液，然后加入1 ml的1640培養(yǎng)基定容，加入FACS液體2 ml，離心，棄上清液，反復(fù)幾次后，放入流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。在流式管中加入PBS 400 μl進(jìn)行分析，按照前向角和側(cè)向角對(duì)淋巴細(xì)胞設(shè)門，取門內(nèi)大約5 000個(gè)細(xì)胞進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(%)。

2 結(jié) 果

2.1 2組“風(fēng)濕三項(xiàng)”水平的比較 觀察組RF、CRP、ASO均顯著高于健康對(duì)照組(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組血漿“風(fēng)濕三項(xiàng)”水平的比較

2.2 2組Th細(xì)胞表達(dá)比較 與健康對(duì)照組比較，觀察組Th1、Th17細(xì)胞表達(dá)明顯升高(P<0.05)，Th2細(xì)胞表達(dá)無(wú)差異(P>0.05)，Treg細(xì)胞表達(dá)明顯降低(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2組Th細(xì)胞表達(dá)情況比較

2.3 外周血細(xì)胞表達(dá)與血漿“風(fēng)濕三項(xiàng)水平”的相關(guān)性 銀屑病性關(guān)節(jié)炎外周血Th1細(xì)胞表達(dá)與RF、CRP高度相關(guān)，Th2細(xì)胞表達(dá)與CRP高度相關(guān)，Th17細(xì)胞表達(dá)與RF中度相關(guān)，與ASO高度相關(guān)，Treg細(xì)胞表達(dá)與風(fēng)濕三項(xiàng)均無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表3 Th1、Th2、Th17、Treg與RF、CRP、ASO的相關(guān)性

3 討 論

銀屑病性關(guān)節(jié)炎是一種慢性全身性自身免疫性疾病，具有復(fù)發(fā)性強(qiáng)、遷延難愈等特點(diǎn)。目前，治療銀屑病性關(guān)節(jié)炎的方法雖然較多，但其根本性根除的概率較低[2]。通過(guò)調(diào)查研究可知，銀屑病性關(guān)節(jié)炎是一種嚴(yán)重的慢性關(guān)節(jié)炎[3]。如果未能早期及時(shí)發(fā)現(xiàn)，治療可能會(huì)導(dǎo)致多關(guān)節(jié)毀損，影響健康，建議早發(fā)現(xiàn)早治療[4～7]。

RF是由變性IgG刺激機(jī)體后產(chǎn)生的自身抗體，CPR是一種免疫調(diào)節(jié)因子，可以激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，ASO是鏈球菌感染機(jī)體后產(chǎn)生的針對(duì)菌體代謝產(chǎn)物鏈球菌溶血素O的抗體，本研究結(jié)果顯示，觀察組風(fēng)濕三項(xiàng)的含量明顯比健康對(duì)照組高。符合報(bào)道結(jié)果[8]，表明銀屑病性關(guān)節(jié)炎與血漿RF、CRP、ASO含量有著比較緊密的聯(lián)系。

RF、CRP和ASO在銀屑病性關(guān)節(jié)炎患者血清中的陽(yáng)性率較健康者水平高，“風(fēng)濕三項(xiàng)”陽(yáng)性可作為判斷銀屑病性關(guān)節(jié)炎的依據(jù)。外周血T細(xì)胞表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明其在銀屑病性關(guān)節(jié)炎發(fā)病中起著非常重要的作用。同時(shí)研究得出，銀屑病性關(guān)節(jié)炎外周血Th1細(xì)胞表達(dá)與RF、CRP高度相關(guān)，Th2細(xì)胞表達(dá)與CRP高度相關(guān)，Th17細(xì)胞表達(dá)與RF中度相關(guān)，與ASO高度相關(guān)，Treg細(xì)胞表達(dá)與“風(fēng)濕三項(xiàng)”均無(wú)相關(guān)性。

綜上所述，“風(fēng)濕三項(xiàng)”與銀屑病性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展有著相當(dāng)緊密的聯(lián)系，外周血T細(xì)胞在銀屑病性關(guān)節(jié)炎發(fā)病中起著非常重要的作用，很可能為銀屑病性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制的研究和臨床診治提供新方向。

1 陳虹霞，鄒先彪．甲銀屑病的診斷與治療研究進(jìn)展[J]．中華皮膚科雜志，2013，46(3)：213-215．

2 Adien E, Aral A, Aybay C, et al. Anti-infliximab antibody status and its relation to clinical response in psoriatic patients:a pilot study[J]. J Dermatol, 2010, 37(8): 708-713.

3 依那西普治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎專家組．依那西普治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎的專家建議(2013)[J]．中華醫(yī)學(xué)雜志，2013，93(18)：1363-1369．

4 王志中，王勇，李軍梅，等．血清MMP-3、TIMP-1與單核細(xì)胞CD147在濕熱痹阻及寒濕痹阻型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的意義[J]．中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，33(6)：770-773．

5 Ursini F, Naty S, Russo E, et al. Abatacept in psoriatic arthritis: Case report and short review[J]. J Pharmacol Pharmacother, 2013, 4(Suppl 1): S29-S32.

6 Alasan MB, Van Den Bosch OF,Creemers MC,et al.Prevalence of methotrexate intolerance in rheumatoid arthritis and psoriatic arthritis[J]. Arthritis Res Ther, 2013, 15(6): 217-218.

7 Vega-Villanueva K, Cortez-Bazán N, Alvarado-Molina A. The use of ustekinumab in refractory treatment of psoriatic arthritis[J]. Rev Bras Reumatol, 2013, 53(5): 448-449.

8 王敏，黃志祥，譚錦輝，等．重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白局部注射治療膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠的療效觀察[J]．中華醫(yī)學(xué)雜志，2013，93(37)：2989-2992．

張家口市科技局指導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目(No.1221055D)

075000 張家口，河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院皮膚科

10.3969/j.issn.1671-6450.2014.06.030

2014-01-23)