曹利君+余斐+陳曉+等

致瀉性大作者簡介：曹利君(1970— )，女,主任技師。48 h內(nèi)干冰包裝送至浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院。

1.2標(biāo)本檢測

按照國家科技重大專項(xiàng)傳染病監(jiān)測技術(shù)平臺項(xiàng)目《腹瀉癥候群監(jiān)測方案》要求的方法，糞便標(biāo)本進(jìn)行沙門菌、志賀菌、致瀉性大腸埃希菌（腸致病性大腸埃希菌、腸出血性大腸埃希菌、產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌、腸侵襲性大腸埃希菌和腸集聚性大腸埃希菌）、霍亂弧菌、副溶血弧菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、嗜水氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌、彎曲菌的分離培養(yǎng)，以及輪狀病毒(A、B和C組)、腸道腺病毒、杯狀病毒（諾如病毒和札如病毒）和星狀病毒的核酸檢測。細(xì)菌鑒定采用法國生物梅里埃公司VITEK全自動(dòng)細(xì)菌分析儀及配套的鑒定板條進(jìn)行。通過多重PCR方法檢測12種毒力基因?qū)χ聻a性大腸埃希菌進(jìn)行鑒定和分型。病毒的檢測均采用PCR方法。所有引物由上海生物工程技術(shù)有限公司合成，PCR相關(guān)試劑購自日本Takara公司。

1.3數(shù)據(jù)分析

調(diào)查數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果均錄入國家傳染病監(jiān)測技術(shù)平臺信息管理系統(tǒng)。數(shù)據(jù)導(dǎo)出后使用Excel 2007軟件進(jìn)行整理。

總之，無論在量或質(zhì)上復(fù)治肺結(jié)核患者外周血中的CD3+T，CD4+T和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量較正常人低，我們在臨床上應(yīng)予足夠的關(guān)注，如加強(qiáng)對病人特別重癥病人細(xì)胞免疫功能檢查，并在抗結(jié)核治療過程中輔以免疫增強(qiáng)劑，以提高抗結(jié)核治療效果。

4參考文獻(xiàn)

［1］Tufariello J M，Chan J，F(xiàn)lynn J L． Latent tuberculosis:mechanisms of host and bacillus that contribute to persistent infec-tion［J］．Lancet Infect Dis，2003，3(9):578-590．

［2］Ahmad S． Pathogenesis，immunology，and diagnosis of latent My-cobacterium tuberculosis infection［J］． Clin Dev Immunol，2011:814-943．

［3］王建中.臨床流式細(xì)胞分析[M].上海:上?？茖W(xué)出版社，2005:73-74.

［4］雷建平.正確認(rèn)識CD+細(xì)胞在結(jié)核免疫治療效果評價(jià)中的意義[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2003，26(2):112-113.

［5］昊守芝，宋俊峰.結(jié)核分枝桿菌致病機(jī)制與免疫[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2003，26(2):101-102.

(收稿日期：2013-09-10)2結(jié)果

2.1病例和標(biāo)本分布

2011年1月—2012年12月，共對603例腹瀉患者開展了調(diào)查和糞便標(biāo)本采集。其中3—5月（春季）收集144例（23.9%）、6—8月（夏季）251例（41.6%）、9—11月（秋季）160例（26.5%）、12—2月（冬季）48例（8.0%）；男性病例343例（56.9%），女性260例（43.1%）；0~5歲135例(22.4%)，6~18歲26例(4.3%)，19~60歲384例(63.7%)，＞60歲58例(9.6%)。

2.2病原譜

603份標(biāo)本中陽性標(biāo)本260份，總陽性率為43.1%。其中僅檢出細(xì)菌的標(biāo)本172份（11份標(biāo)本同時(shí)檢出2種細(xì)菌），陽性率為28.5%；僅檢出病毒的標(biāo)本88份91株（3份標(biāo)本同時(shí)檢出2種病毒），標(biāo)本陽性率為14.6%,病毒陽性率為15.1%(91/603)；細(xì)菌和病毒合并感染的標(biāo)本有16份，占陽性標(biāo)本的6.2%（16/260）。各病原檢出率和構(gòu)成比見表1。

表1寧波市鎮(zhèn)海區(qū)603例腹瀉患者糞便標(biāo)本

常見致腹瀉病原檢出情況

病原陽性標(biāo)本數(shù)檢出率

（%）構(gòu)成比

（%）細(xì)菌致瀉性大腸埃希菌498.126.8腸集聚性大腸埃希菌325.365.3a產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌81.316.3a腸致病性大腸埃希菌40.78.2a腸侵襲性大腸埃希菌30.56.1a腸出血性大腸埃希菌20.34.1a副溶血弧菌6610.936.1嗜水氣單胞菌244.013.1志賀菌91.54.9沙門菌61.03.3彎曲菌40.72.2類志賀鄰單胞菌81.34.4霍亂弧菌30.51.6小腸結(jié)腸炎耶爾森菌20.41.1其它氣單胞菌屬81.34.4其它弧菌屬40.72.1病毒杯狀病毒478.651.6諾如病毒386.980.9b諾如病毒I型91.623.7c諾如病毒II型295.376.3c札如病毒91.618.1b輪狀病毒397.142.9A組輪狀病毒376.894.9dB組輪狀病毒10.22.6dC組輪狀病毒10.22.6d星狀病毒50.95.5腸道腺病毒00.00.0注：分別計(jì)算細(xì)菌和病毒中各病原的構(gòu)成比；a致瀉性大腸埃希菌中各型的構(gòu)成比；b杯狀病毒中諾如病毒和札如病毒的構(gòu)成比；c諾如病毒中I型和II型的構(gòu)成比；d輪狀病毒中ABC三組的構(gòu)成比。

2.3分布特征

從病原總檢出率來看，冬季檢出率（60.4%）要遠(yuǎn)高于其他季節(jié)（春夏秋分別為34.7%、49.8%和35.0%）；從細(xì)菌感染的檢出率看，夏季檢出率（37.1%）明顯高于其他季節(jié)（春、秋、冬分別為15.3%、28.8%、22.9%）；而病毒則是冬季的檢出率最高，達(dá)37.5%（18/48)，高于其他季節(jié)(春、夏、秋分別為19.4%、12.7%、6.3%）。男性和女性檢出率相近，分別為36.2%和35.7%；0~5歲組的病毒檢出率最高，達(dá)26.7%（36/135），19~60歲組細(xì)菌的檢出率高于其他年齡段組。病毒和細(xì)菌感染的流行特征分別見圖1、圖2、圖3。

圖1不同季節(jié)病毒性腹瀉和細(xì)菌性腹瀉的檢出率（%）

圖2不同性別病毒性腹瀉和細(xì)菌性腹瀉的檢出率（%）

圖3不同年齡段病毒性腹瀉和細(xì)菌性腹瀉的檢出率（%）

3討論

腹瀉病是人類常見的具有較高發(fā)病率和死亡率的疾病之一。世界衛(wèi)生組織報(bào)道全球每年約有20億例腹瀉，每年約有200萬人死于腹瀉病，尤其是在發(fā)展中國家，腹瀉病的高發(fā)是普遍存在的問題[2]。2010—2012年的海地霍亂爆發(fā)事件和2011年德國爆發(fā)大腸埃希菌O104:H4疫情導(dǎo)致了嚴(yán)重后果[1,3]，也使我們不得不時(shí)刻意識到感染性腹瀉的嚴(yán)重性，并積極做好防控策略，而對本地區(qū)腹瀉病原譜及流行特征研究是防控策略中的重要依據(jù)。本研究表明，本地區(qū)腹瀉患者糞便標(biāo)本中副溶血弧菌（10.9%）列細(xì)菌性病原的首位，其次為致瀉性大腸埃希菌（8.1%）和嗜水氣單胞菌（4.0%），而志賀氏菌、霍亂弧菌和非傷寒沙門菌合計(jì)檢出率僅占3.0%。病毒性腹瀉以杯狀病毒和輪狀病毒病毒常見，檢出率分別為8.6%和7.1%。

目前，副溶血弧菌感染已成為我國一個(gè)嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問題之一[4]，感染率位于微生物性食源性疾病爆發(fā)之首[5]。通過對海產(chǎn)品中副溶血弧菌的主動(dòng)篩查發(fā)現(xiàn)，浙江省海產(chǎn)品副溶血弧菌污染率和人群感染率均較其他地區(qū)高[5]。本研究中副溶血弧菌居細(xì)菌性病原的首位，且夏秋季的檢出率為14.6%（60/411），遠(yuǎn)高于冬春季的3.1%(6/192)，這與市民在夏秋季喜歡生食、燒烤和腌制海產(chǎn)品等飲食習(xí)慣有關(guān)。另外，氣單胞菌也是夏季腹瀉的常見病原菌之一，該菌作為一種水源性和食源性致病菌廣泛流行并常引起疫情爆發(fā)[6]。本地區(qū)嗜水氣單胞菌的檢出率為4.0%，夏秋季的檢出率為6.1%，冬春季為1.1%，加上其他氣單胞菌檢出率為5.3%（32/603），與白永鳳等[7]發(fā)現(xiàn)浙江省夏季門診腹瀉病人氣單胞菌的分離率8.6%相近。在發(fā)達(dá)國家，腹瀉病人中氣單胞菌的分離率約為2.2%~10.0%[8]，氣單胞菌也是海產(chǎn)品中常見的寄生菌，該菌在本地區(qū)腹瀉人群中的廣泛流行應(yīng)引起我們重視。

美國Baltimore和New Haven兩地區(qū)對腹瀉患者的研究顯示，致瀉性大腸埃希菌檢出率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他細(xì)菌，為9.4%（77/823），其中腸集聚性大腸埃希菌占48.1%[9]。朱敏等[10]對河南鄭州市和商丘市20家醫(yī)療機(jī)構(gòu)收集的1 534份腹瀉患者糞便標(biāo)本檢測顯示腸埃希菌檢出率為10.4%，其中腸集聚性大腸埃希菌占34.6%。本地區(qū)致瀉性大腸埃希菌的檢出率為8.1%和這些地區(qū)的相近，其中腸集聚性大腸埃希菌構(gòu)成高于這些地區(qū)，占65.3%。

人類杯狀病毒是引起兒童和成人急性病毒性腹瀉的主要病原。一般認(rèn)為杯狀病毒是僅次于輪狀病毒引起急性腹瀉的常見病原之一[11]，但本地區(qū)杯狀病毒的檢出率高于輪狀病毒（8.6% vs 7.1%）。2011年7—12月上海市浦東新區(qū)的監(jiān)測結(jié)果也顯示，諾如病毒的檢出率為8.3%，札如病毒的為1.4%，而輪狀病毒的檢出率僅為2.8%；寧夏地區(qū)2011年的監(jiān)測也顯示杯狀病毒是引起病毒性腹瀉主要病原，占65.0%，而輪狀病毒僅占6.0%。這說明杯狀病毒可能已經(jīng)取代輪狀病毒成為病毒性腹瀉最常見的病毒。另外，我們發(fā)現(xiàn)病毒性腹瀉多發(fā)生于冬季，并且以0~5歲兒童多見，該結(jié)果與以往的報(bào)道一致。

寧波市鎮(zhèn)海區(qū)腹瀉病原以副溶血弧菌、致瀉性大腸埃希菌、嗜水氣單胞菌、杯狀病毒和輪狀病毒為主，根據(jù)病原的流行特征，本地區(qū)應(yīng)主動(dòng)加強(qiáng)水產(chǎn)品的監(jiān)測和管理，進(jìn)而減少感染性腹瀉的發(fā)病率。

4參考文獻(xiàn)

［1］Frank C, Werber D, Cramer J P, et al. Epidemic profile of Shiga-toxin-producing Escherichia coli O104∶H4 outbreak in Germany[J]. N Engl J Med,2011,365(19):1771-1780.

［2］Kosek M, Bern C, Guerrant R L. The global burden of diarrhoeal disease, as estimated from studies published between 1992 and 2000[J]. Bull World Health Organ,2003,81(3):197-204.

［3］Barzilay E J, Schaad N, Magloire R, et al. Cholera surveillance during the Haiti epidemic the first 2 years[J]. N Engl J Med,2013,368(7):599-609.

［4］劉秀梅，程蘇云，陳艷，等. 2003年中國部分沿海地區(qū)零售海產(chǎn)品中副溶血性弧菌污染狀況的主動(dòng)監(jiān)測[J]. 中國食品衛(wèi)生雜志,2005,17(2):97-99.

［5］劉秀梅，陳艷，王曉英，等. 1992—2001年食源性疾病爆發(fā)資料分析——國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)[J]. 衛(wèi)生研究,2004,33(6):725-727.

［6］Janda J M, Abbott S L. The genus Aeromonas: taxonomy, pathogenicity, and infection[J]. Clin Microbiol Rev,2010,23(1):35-73.

［7］白永鳳. 浙江地區(qū)腹瀉病人氣單胞菌毒力基因及抗生素敏感性研究[D]. 浙江大學(xué),2011.

［8］Parker J L, Shaw J G. Aeromonas spp. clinical microbiology and disease[J]. J Infect,2011,62(2):109-118.

［9］Nataro J P, Mai V, Johnson J, et al. Diarrheagenic Escherichia coli infection in Baltimore, Maryland, and New Haven, Connecticut[J]. Clin Infect Dis,2006,43(4):402-407.

［10］朱敏，謝志強(qiáng)，趙嘉詠，等. 河南省腹瀉病人5種致瀉大腸埃希菌感染調(diào)查[J]. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2010,37(6):1148-1150,1152.

［11］Fankhauser R L, Noel J S, Monroe S S, et al. Molecular epidemiology of “Norwalk-like viruses” in outbreaks of gastroenteritisin the United States[J]. J Infect Dis,1998,178(6):1571-1578.